Metody Flashcards
CRISPR cas9- NC2020
Jennifer Doudna, Emmanuelle Charpentier
Na čem je založena metoda ELISA
Reakce Ag a protilátky
Izolace DNA
Homogenizace tkáně- odstraň proteinů a RNA- navázání DNA-promytí-eluce
Co je cílem homogenizace tkáně?
Rozrušení membrán
Čím lze denaturovat DNA
Extrémní pH, močovina, teplo
K čemu lze využít restrikční endonukleázu.
Klonování DNA, nalezení určité sekvence
Co dělá ligáza
Katalyzuje vznik fosfodiesterových vazeb
Teploty v jednotlivých krocích PCR
- D 95
- A 50
- E 72
Jak dlouhé jsou primery
20 až 30 nukleotidů
Čím je specifická touch dwn PCR
Při opakovaných cyklech dojde ke snížení teploty annealingu
Kterou modifikaci PCR použiji, když mám málo vzorku?
Nested
Kam přesně se váže interkalační barvivo?
Mezi báze
Kde se využívá Sagnacův interferometr?
SKY
Jak lze detekovat SNP
Sekvenování,restrikční analýza
Typy enzymů v genetické laboratoři
- anabolické
- katabolické
- modifikující DNA
- spojující DNA
Polymeráza beta
Reparační fce
Polymeráza gamma
Replikace MtDNA
Polymeráza delta
Proofreading
Katabolické enzymy=
Nukleázy
Jak homogenizujeme tkáň pro izolaci DNA
Chemicky- tenzid+ proteináza K
Fyzikálně- UZ
Restrikční endonukleáza migruje po molekule DNA a hledá…?
Rozpoznávací místo ( pak většinou zde i štěpné místo)
Typy sond
Malovací
Lokus specifické
Centromerické
Enzymy využívané v pyrosekvenování
Sulfuryláza, luciferáza, apyráza,polymeráza