Métodos Cromatográficos Flashcards
Cromatografia
Método de separação físico no qual os componentes a separar são distribuídos em duas fases, uma estacionária e outra móvel que segue uma determinada direção
Cromatografia em coluna
fase móvel pode ser um gás, líquido ou fluído, podendo a mobilidade ser efetuada por gravidade;pressão
Cromatografia planar
fase móvel só pode ser líquida, podendo a mobilidade ser efetuada por gravidade/capilaridade
Cromatografia de partição
retenção do analito é determinada pela diferença de solubilidade que apresenta nas duas fases se a estacionária é líquida, ou pela volatilidade ou solubilidade na fase estacionária, se a fase móvel for gasosa
Cromatografia de adsorção
retenção do analito decorres pela afinidade adsorvente das moléculas que constituem a superfície da fase sólida estacionária, dependendo das interações com os respetivos centros ativos
Cromatografia de reação química reversível
- permuta iónica:retenção do analito ocorre através da permuta iónica entre os iões constituintes do analito e os iões fixos da fase estacionária orgânica através de atração eletrostática
- bio-afinidade: retenção do analito baseia-se na ocorrência de uma reação química específica entre as moléculas do analito e grupos funcionais específicos imobilizados na fase estacionária
Cromatografia de exclusão molecular
retenção do analito resulta da ação mecânica de exclusão ou crivagem do suporte estacionário, inerte e poroso, sobre as moléculas, sendo a distribuição efetuada por tamanho molecular
Tipo de cromatografia
- Gasosa: amostras contendo compostos voláteis, semi-voláteis ou facilmente volatilizáveis e não termolábeis
- líquida: amostras contendo compostos não-voláteis e termolábeis
Eficiência(N)
- capacidade de eluição com o mínimo de dispersão do analito
- >N → >nºpratos teóricos → >possibilidade para uma dada coluna separar as misturas
Resolução(Rs)
- nível de separação entre duas bandas adjacentes em tempo analítico aceitável
- permite afirmar se dois componentes adjacentes são ou não completamente separados por uma coluna cromatográfica (só se Rs ≥ 1,5)
Análise qualitativa
comparação dos tempos de retenção (tR) obtidos no padrão com os obtidos na amostra(usando as mesmas condições cromatográficas)
Análise quantitativa
- Altura do pico(aceitável se não se alterar)
- Área do pico(resultados muito mais satisfatórios)
Cromatografia Gasosa
-usada para amostras que contenham compostos orgânicos gasosos, voláteis ou semi-voláteis e simultaneamente sejam não termolábeis