Méthodes de biologie moléculaire Flashcards
type polymérase Taq polymérase
ADN polymérase ADN dépendante,
transcriptase inverse
ADN polymérase ARN dépendante
capacités NGS
fragments de séquence de 150 à 300 pb sont lus jusqu’à 20 milliards de fragments en 1 fois
hème inhibe
Taq polymérase
L’héparine inhibe
réaction de PCR
matériel nécessaire pour PCR
une matrice ADN
deux amorces simple brin
la Taq polymérase
4 dNTPs
matériel nécessaire séquençage Sanger
matrice d'ADN 2 amorces simples brin Taq polymérase dNTPs en excès ddNTPs en faible quantité
matériel nécessaire pour transcription inverse
une matrice d’ARNm + transcriptase inverse + amorce poly(dT) simple brin + désoxyribonucléotides (dNTP
agent utilisé pour visualiser électrophorèse
bromure d’éthidium
température dénaturation
94°
température hybridation des amorces
variables
température extension
72°
capacités méthode sanger
ron 800 pb en 1 heure sur 1 capillaire
source majeure d’ADN
leucocytes sanguins
ordre étapes PCR
dénaturation par chauffage
hybridation des amorces
extension
nombre cycle pour que produit de PCR soit visible
vingtaine de cycles
ordre sanger
élongation
ordonnancement
détection
ordre étapes NGS
ordonnancement
élongation
détection
restauration