méthode d'analyse

Question 1

que permet le séquençage de ADN

Answer 1

○ Étudier les mutations
○ Etude de l’évolution du génome
○ Etude des maladies génétiques

Question 2

nom de l’étude ARN

Answer 2

transcriptomique

Question 3

nom études des protéine

Answer 3

protéomique

Question 4

fonctionnement PCR

Answer 4

isoler , séquencer et amplifier ADN pour l’analyser

Question 5

types de mutation

Answer 5

→ Silencieuse : pas de changement d’acide aminé
→ Faux sens : changement d’acide aminé
→ Non-sens : apparition d’un codon stop, apparition d’une protéine tronquée

Question 6

Q-PCR

Answer 6

a chaque cycle de PCR = ADN doublé
on y ajoute un agent qui vas rendre l’ADN fluo (ss forme 2 brin)
amplifié par enzyme TAQ
+ ADN + fluo on peut docn tracer la courbe d’amplification
(PCR QUANTITATIVE)

Question 7

rôle transcriptase inverse

Answer 7

transforme ARN en ADN

Question 8

microscopie optique

Answer 8

rayon de nature ondulatoire
inf 400nm : UV A B C
400-760bm : visible
+ 760 : infrarouge (donne chaleur)
virus NON visible
max 0.2um
+++,utilisé , voir élément en couleur et vivant , traverse une cellule dans son intégralité

Question 9

microscopie classique / histologique

Answer 9

sur cell morte
nécessite coupe semi fine 2 à 6um (aide d’un microtome )
rapide
colorant

Question 10

Microscopie à contraste de phase

Answer 10

Elle utilise les propriétés ondulatoires de la lumière
Cette microscopie permet de prendre des cellules vivantes car pas de mise en contact avec des agents colorants toxiques.

Question 11

Microscopie à fluorescence et confocale

Answer 11

détecter spécifiquement une protéine
+ fine et + spécifique
utilisation anticorps (primaire puis un secondaire qui reconnait le primaire )
Image 3D

Question 12

molécule marqueur microscopie a fluorescence

Answer 12

→** Une enzyme **: exemple de la peroxydase qui transforme un substrat incolore en substrat coloré
→ Molécule fluorescente : excitation de la molécule par un faisceau lumineux qui devient visible
→ Immunogold : bille d’or opaque aux électrons en ME

Question 13

❖ Co-marquage en immunofluorescence

Answer 13

→** DAPI **excité en UV et réémission en bleu
→ fluorescéine excitée en bleu pour émettre en vert
→ rhodamine excitée en vert pour émettre en rouge

Question 14

DAPI

Answer 14

excité en UV réémission en bleu

Question 15

→ fluorescéine

Answer 15

excitée en bleu pour émettre en vert

Question 15

Microscopie électronique

Answer 15

Le ME fait appel à un faisceau d’électron, qui rentre en contact avec l’échantillon et qui aboutit à 2 faisceaux :
→ Électrons transmis : MET
→ Électrons secondaire retransmis par l’échantillon : MEB
dans une enceinte sous vide
haure résolution

Question 16

Microscope à transmission

Answer 16

permet de voir l’intérieur des cellules
coupe ultrafine (100 à 200 nm)
On n’observera donc jamais une cellule entière mais une toute petite partie en MET.
agent de contraste ( métaux lourds)
/!\ OBSERVATION DE VIRUS

Question 17

rhodamine

Answer 17

excitée en vert pour émettre en rouge

Question 18

Microscopie à balayage

Answer 18

électrons 2d
donne des images en reliefs
peu information sur la structure
on ne voit que la surface et pas l’intérieur
On peut observer des insectes entiers ou le bourgeonnement du VIH par exemple.