los microorganismos Flashcards
origenes de la microbiologia
- hooke: desarrollo de microscopios
- Van leeuwenhoek: perfeccionó el microscopio y describio los microbios = animaculos
- Julius Cohn: formas de las bacterias: bacilo, vibrio, cocos y espirilos + clasificacion binaria en genero y especie
resolucoin de un microscopio
- distancia minima entre dos objetos para podeer verlos separados
- resolucion de luz visible = 200nm (longitud de onda de 400-400nm) = vemos la forma peor no detalles int6ernos
q determina la resolucion
- el objetivo: la distancia a la que se encuentre: objetivos pequeños = angulos grandes
- indice de refraccion del medio: usamos aceite de inmerdion proque n es mayor que el del aire (1,5 frete a 1)
- longitud de ionda de la luz
= longitud de onda de la luz /2. NA (apertura numérica del objetivo)
apertura numerica del objetivo (NA)
n x sin (µ)
n= indice de refraccion del medio
µ= angulo de entrada de la luz
proceso de tincion
- ponemos el cultivo en un porta y lo dejamos secar
- lo acercamso a una llama para matar las bacterias
- añadimos el colorante
- miraqmos en el microscopio con objetivo de 100 y aceite de inmersión
Este proceso de tinción suele disminuir la resolución porque le estamos pegando cosas y al final estamos cambiando su forma.
longitud de onda de la luz ultravioleta
- 100-400 nm
- si le sumos un objetivo con una apertura numerica grande aumentamos mucho la resolucion
microscopia confocal
- para mejorar la resolucion
- laser conUV
- microscopio enfoca distintos planos = imagen 3D
- imagenes mas nitidas pepro como seguimos tiñendo no tenemos muchos detalles de su morfologia externa
- si que tenemos info de su morfologia molecular
- los fotones utilizados son muy energeticos = se cargan las bacterias
- para solucionar este problemas usamos la microscopia de dos fotones que usa uin laser inflarrrojo menos energetcio
refutacion de la teoria de generacion espontanea
- experimento de redi del bote cerrado
- Spakkanzani: caldo cerrado
- pasteur: matraz de cuello de cisne
estirilizacion
- autoclave: 15min a 121º
- radiaccion gamma: plasticos
- calor seco = vidrios
- forma quimica
- si teiene productos termolabiles lo quie se hace es ultrafiltracion
componenetes de un cultivo
Agentes gelificantes: agar.
Sistemas amortiguadores: fosfatos…
Azúcares, aminoácidos, vitaminas …
Extractos (medios complejos, no se sabe exactamente lo que tienen): levadura, carne, hígado, semillas…
Peptonas: soja, carne, gelatina, caseína…
Indicadores de pH: rojo neutro, cristal violeta, rojo de fenol…
Agentes reductores: microaerofilia o anaerofilia.
Agentes selectivos: sales biliares, antibióticos…
medios de cultivo
- Sólidos y líquidos. Para solidificar usamos el agar que nos da gel con 15g por l.
- Medio definido (se sabe exactamente la concentración de cada uno de los componentes que posee, es sintético) y medio complejo (no se sabe exactamente qué tiene ni en qué concentración; ej: caldo de carne, suelen ser extractos).
- Medio mineral o basal: no poseen ninguna fuente de energía (fuente de carbono), solo compuestos inorgánicos, por lo que solo sirven para crecer organismos autótrofos, pero no heterótrofos que necesitan una fuente de carbono. Para las bacterias mas simples que no necesitan medios específicos para crecer. Si aquí le añadimos por ejemplo glucosa pasaríamos a hablar de un medio definido porque ya conocemos todo lo que tiene.
- Medio mínimo: medio basal + fuente de carbono.
- Medio complejo: medio rico: con todos los requerimientos nutritivos
- Medio diferencial. Medio en el que, al crecer dos microrganismos distintos, los visualizo de forma diferente. Ej: adición de un colorante que me permite visualizar de color blanco a los organismos gram (-) y rojo a los gram (+). Podemos hacer que dos microorganismos distintos crezcan y se comporten de forma distinta. Ej: agar de maconke que si fermenta lactosa sale rojo y sino sale blanco entonce en este medio podemos difernciar unabacteria lac (+) o lac (-)
- Medio de enriquecimiento. Medio en el que a partir de una muestra del ambiente, donde hay muchas bacterias, añadiendo un sustrato favorezco el crecimiento de una de las especies de bacterias (enriqueces el crecimiento de solo un tipo de ellas). Eriquecemos lo que nos interesa.
- Medio selectivo. Medio en el que solo crece una especie de bacterias. Ej: si echamos un antibiótico en el medio, solo crecerán aquellas bacterias a las que hayamos añadido el gen de resistencia a dicho antibiótico.
- I-chip.
Consiste en unas placas de 100 pocillos cada una en las que diluyendo una muestra de suelo se puede crecer bacterias características del suelo. Se intenta que en cada uno de los pocillos del chip caigan pocas bacterias. Este aparato es semipermeable de forma que se coloca en contacto con el mismo suelo del que he obtenido mi muestra. De esta forma, las bacterias que están creciendo en los pocillos lo hacen en las mismas condiciones que lo harían de forma natural, por eso sirve para mejorar el rendimiento.
postulados de koch para determinar que unmicroorganismo caiusa una enfermedad
- presnte en los enfermos y no en lops sanos
- aislarle y hacer un cultivo puro
- si se inulan vuelvenm a causar la enfermedad
- podemos viler a ailarlo y cultivarlo
resumen de historia moderna de la microbiologia
- determinacion de mecanismos bioquimicos de los SSVV usaqndo bacterias ciomo modelos
- aparicion de microbianos y control de infecciones
- tecnologia del ADN recombinante, secuenciacion de Sanger y reaccion en cadena de polimerasa
- estudios de comunidades microbianas
- secuenciacion masiva y m,etagenomica: conociiento de bacterias que no podemos cultivar mediante secuenciacion
- ARN ribosomal 16S = relacoines filogenetiocas entre bacterias = primera clasificacion antes de conocer los genomas completos
taxonomia
Se define como la ciencia que da nombre a las bacterias.
En microrganismos existe una organización taxonómica jerárquica (reinos – grupos – clases - orden – familia – género – especie (2 palabras)).
