Les TP : partie II Flashcards
Définir inoculation
utilisation de techniques chimiques phwsiques ou biologiques pour l’introduction des entités virales dans les cellules hôte
A quoi doit on faire attention pour la production de particules virales ?
Le choix de l’hote,
La concentration de l’inoculum
Les conditions du milieu
Comment purifier les particules virales ?
Broyage puis elimination des débris par centrifugation. Les protéines cellulaires sont précipitées puis nouvelle centrifugation.
Finalement on précipite les virions et on ultracentrifuge pour récupérer le culot
Comment met-on en évidence les AN viraux ?
En analysant par spectro
En analysant par electrophorèse
Quelles sont les trois étapes d’une éléctrophogère ?
Coloration du gel
Amplification par PCR
Hybridation moléculaire
Comment analyser les protéines virales ?
Electrophorèse sur gel en condition dénaturantes ou traitement à la chaleur. Western Blot (spécifique)
Quelle coloration est utiliser pour mettre en évidence les protéines virales par electrophorèse ?
Bleu de Coomassie
Quels sont les objectifs d’un investigation virale ?
établir une relation de causalité entre affection et virus
connaître le statut d’un individu avec un virus
évaluer l’efficacité de la vaccination
étudier une épidémie
Quels avantages / inconvénients des cultures pour le diagnostic ?
Démontration non ambigue
Très sensible
Obtention d’un isolat viral
Technique de formation des plages
MAIS
Dur de prélever stocker transporter et longue durée de multiplication parfois
Donner trois méthodes d’hybridation sans amplification pour trouver les virus.
Southern blot : sur membrane
Hybridation in situ
Hybridation en milieu liquide
Quelle différence entre diagnostic direct et indirect ?
Le direct vise à mettre en évidence directement les virus tandis que l’indirect vise à mettre en évidence les anticorps contre le virus.
Qu’est ce qu’une séroneutralisation ?
Utilisation d’anticorps connus pour détecter une présence ou absence d’effet cythopatique
Rappel de ce qu’est le complément
Système enzymatique qui lyse les cellules qui ont fixé a leur surface les anticorps
Comment le complément est il utilisé pour tester si il y a des virus ?
On utilise des globules rouges recouverts d’un anticorps positif au complément : sil en présence du complément il n’y a pas de lyse des globules alors les compléments se sont fixés sur les particules virales.
Quels sont les deux tests effectués pour savoir pourquoi un virus résiste aux médocs
Test phénotypique : mettre le virus en présence de l’antiviras en boite de culture
Test génotypique : essayer d’identifier des gènes de résistance
