Les TP : partie I

Question 1

De quelles manières se font les mesures de la croissance bactérienne ?

Answer 1

Mesure de la DO à 600nm
étalement sur milieu d’une dilution de la suspension bactérienne et numération des colonies après incubation de 12 heures à temparature Optimale

Question 2

Quelles sont les phases de la croissance bactérienne ?

Answer 2

Latence
Accélération
Exponentielle
Ralentissement
Stationnaire
Autolyse

Question 3

A quoi est égale le temps de génération d’une bactérie ?

Answer 3

g = t/n

Question 4

A quoi est égal le taux de croissance TC ?

Answer 4

log xt - log x0 / tlog2

Question 5

Au bout de combien de temps est-ce que les colonies sont visibles dans une culture bactérienne ?

Answer 5

Environ 10h

Question 6

Qu’est-ce qui est nécessaire de faire pour obtenir un nombre de colonies compris entre 10 et 300 ?

Answer 6

Des dilutions en cascade

Question 7

Quelles sont les 4 étapes de l’infection d’une colonie par des virus ?

Answer 7

Le virus rencontre son hôte, le phage s’adsorbe sur la paroi et fait pénétrer son ADN
L’ADN du phage est transcrit en ARNs qui seront traduits en protéines virales précoces puis tardives.
Les protéines tardives s’auto assemblent et les têtes phagiques contiennent de l’ADN : lyse de la cellule

Question 8

Comment estimer la concentration d’une suspension de phages ?

Answer 8

On fait un étalement de bactéries en excès et on procède à l’infection par des phages : chaque phage va s’adsorber sur une bactérie.

Question 9

A quel stade se fait l’infection ?

Answer 9

Au stade de croissance exponentielle d’une colonie bactérienne : si la colonie entre en phase stationnaire, l’infection s’arrête aussi.

Question 10

Que nomme-t-on plage de lyse ?

Answer 10

Un phage libre ou une bactérie infectée.

Question 11

Comment suivre la multiplication dans une culture de bactéries ?

Answer 11

On réalise des prélèvements successifs en fonction du temps, puis un étalement avec dilution : les plages de lyse apparaissent.

Question 12

Quelle est la condition à l’amplification de phages ?

Answer 12

Le nombre de bactéries de départ doit être très supérieur au nombre de phages.

Question 13

Quelle information nous apporte la mesure de la DO ?

Answer 13

Une estimation des bactéries saines et infectées.

Question 14

Que se passe-t-il à t = 0 ? Au bout de 25 minutes ?

Answer 14

à t0 on a le début du premier cycle : une bactérie est infectée. Après 25 minutes les bactéries saines du premier cycle se sont divisées : en même temps la première bactérie infectée se lyse et libère les phages.

Question 15

Quelle est la condition pour le renouvellement d’un cycle ?

Answer 15

Il doit rester des bactéries libres non infectées dans le milieu.

Question 16

Comment faire un cycle unique ?

Answer 16

il suffit d’avoir un nombre de phages initial supérieur au nombre de bactéries.

Question 17

Quand les bactéries sont infectées pourquoi la DO reste stable jusqu’a leur lyse ?

Answer 17

Les bactéries infectées ne se multiplient plus.

Question 18

Quelles sont les trois techniques permettant de visualiser des phages libres ?

Answer 18

Par étalement direct : phage libre = plages - nombre de bactéries infectées
En éliminant les B infectées par centrifugation basse vitesse : les phages se retrouvent dans le surnageant, mais moins fiable.
En lysant artificiellement les cellules par chloroforme

Question 19

Définir enrichissement :

Answer 19

E définit comme étant le rapport des phages finaux sur les phages initiaux.

Question 20

Définir le taux d’adsorption TA.

Answer 20

Définir comme lr apport du nombre de phages adsorbés sur le nombre de phages de départ, x100. Remarque : phages adsorbés = phages initiaux - phages libres

Question 21

Définir le taux de multiplication TM

Answer 21

Définit comme étant le nombre de phages produits par bactéries infectées : (plages de lyse totale - phages libres) / bactéries infectées