le NPC Flashcards
comment se sont former les pores nucléaires.?
Les membranes nucléaires internes et externes s’unissent de place en place pour former des perforations circulairesdans l’enveloppe,
dimension des pores nucléaires?
(100 nm de diamètre)
l’enveloppe nucléaire que permet t’elle et non pas?
.n’est pas une barrière continue entre le nucléoplasme et le cytoplasme a cause des pores . elle permet de nombreux échanges dans les deux sens.
cb de pores nucléaires par noyau?
Il y a environ 3000 à 5000 pores nucléaires par noyau
Technique de la Cryofracture
1)Congeler l’échantillon à très basse température (azote (N2) liquide (-196°C) 2)Effectuer une cryofracture aléatoire, le plus souvent entre la membrane et le cytoplasme ou entre les deux feuillets de la bicouche phospholipidique 3°)Réaliser le cryodécapage de la surface pour faire apparaître les particules transmembranaires. Rajouter un ombrage au platine opaque aux électrons, avec un angle de 45°pour augmenter l’impression de relief 4)Créer une consolidation par le carbone qui servira de moule transparent. 5)Procéder a une digestion des tissus sous-jacents pour obtenir une réplique de la surface étudiée en 3D , mais très fine et que l’on observera au microscope électronique à tansmission (MET)
le Complexe du Pore Nucléaire (NPC) = nuclear pore complex
Il s’agit d’une structure complexe, formée de nombreuses sous-unités protéiques et traversant toute l’épaisseur de l’enveloppe :
le NPC présente une structure géométrique très particulière,
octogonale, avec 8 granules périphériques, 8 rayons et un granule central (bouchon)
Le complexe du pore nucléaire (NPC) est une structure volumineuse, d’une masse d’environ?
125.000 kDa et d’un diamètre de 120 nm (il dépasse donc de part et d’autre du pore nucléaire)
Le NPC est formé de l’assemblage de nombreuses protéines
La limite d’exclusion du NPC
= 60 kDa
un Transport passif
sans apport d’énergie à travers un canal central de 9 nm de diamètre et 15nm de long, qui permet la libre diffusion passive des petites molécules inférieure à 5000 Da (ions, sucres, acides aminés, nucléotides, vitamines..)
dimension d’un canal passive?
un canal central de 9 nm de diamètre et 15nm de long,
un Transport Actif
pour laisser passer les molécules plus grosses telles que les enzyme nucléaires (ADN ou ARN polymérases),les facteurs de transcription qui doivent rentrer (importation) et aussi les ARNm, les sous-unités ribosomales qui doivent sortir (exportation) etc.
comment un transfort actif arrive laisser passer de grosse molecule?
nécessite l’hydrolyse d’ATP pour agrandir le canal (26 nm)
Pour traverser le NPC par Transport actif, les grosses protéines doivent posséder
r une séquence peptidique spéciale: signal d’importation nucléaire (NLS) ou un signal d’exportation nucléaire (NES)
Structure du NPC
8 filaments épais cytoplasmiques de 50nm sur un Ø anneau cytoplasmique, applati Ø
l’anneau central composé de 8 rayons épais qui se projettent du transporteur central vers la périphérie en s’élargissant sous forme d’une collerette ancrée dans la membrane nucléaire par une glycoprotéine appellée la gp 210 (16 par NPC) Ø
l’anneau nucléoplasmique, applati et composé de 8 granules Ø
8 filaments formant un panier (basket) d’environ 100 nm de hauteur dans le nucléoplasme. Ø
un anneau distal à l’extrémité du panier qui s’ouvre et se ferme.
taille du pore vs NPC
Le diamètre du pore est de 100 nm, celui du NPC d’environ 120 à 150 nm.
Les filaments cytoplasmiques épais
s stockent les protéines en attente de passage, grâce à des répétitions de 2 acides aminés (F-G repeats)
Le transporteur central est constitué
de deux diaphragmes superposés (méchano-ATPases) qui s’ouvrent et se ferment
composition du npc?
8 filaments épais cytoplasmiques de 50nm sur un Ø anneau cytoplasmique, applati Ø l’anneau central composé de 8 rayons épais qui se projettent du transporteur central vers la périphérie en s’élargissant sous forme d’une collerette ancrée dans la membrane nucléaire par une glycoprotéine appellée la gp 210 (16 par NPC) Ø l’anneau nucléoplasmique, applati et composé de 8 granules Ø 8 filaments formant un panier (basket) d’environ 100 nm de hauteur dans le nucléoplasme. Ø un anneau distal à l’extrémité du panier qui s’ouvre et se ferme
Ø La corbeille ou panier du NPC est fixée ,former et sert de ?
à l’anneau nucléoplasmique et formé de 8 filaments fins qui s’assemblent en présence de Ca++ (se désassemble en absence de Ca++) Ø Le panier sert à orienter et guider les ARN et nucléoprotéines qui doivent sortir du noyau par le NPC, il possède aussi des F-G repeats.
Ø L’anneau distal à l’extrémité du panier, s’ouvre en présence
de Ca++ pour laisser passer les ARN
Le NEL « nuclear enveloppe latice »
est un filet supplémentaire qui relie l’anneau distal des NPC
