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Culture Cell > Intro + Conditions De Culture > Flashcards

Intro + Conditions De Culture Flashcards

1
Q

Avantage d’utiliser des cellules animales

A
  • la potéine produite mature de la même façon que la protéine native (profil de glycosylation complet)
  • sécrétion du produit (facilite la purification)
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Q

Désavantage d’utiliser des cellules animales

A
  • croissance très lente
  • milieux de cultures sont complexes et coûteux
  • ils sont très vulnérables à la contamination
  • très sensibles au cisaillement
  • concentrations cellulaires max assez faible en culture
  • rendement faibles en produit (-10 à 100mg/L)
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3
Q

Quel organite est responsable de la forme des cellules

A

Le cytosquelette

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4
Q

Une fois adhérées, la morphologie des cellules varie selon les types. Quels sont les formes

A
  • Ellipsoïdales (rare)
  • Fusiformes (fibroblaste)
  • carrées ou polygonales (épithéliale)
  • ramifiées ( bipolaire, multipolaire) : fibroblaste
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5
Q

Que sont les BHK

A

Fibroblastes

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6
Q

Que ssont les L6

A

Cellules musculaire

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7
Q

Que sont les SH-SY5Y

A

Neurone

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8
Q

Que sont les cellules HEK

A

Cellules Épithéliales

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9
Q

Que sont les Jurkat

A

Lymphocytes

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10
Q

Quels sont les types cellulaires les plus fréquemment utilisés et les plus faciles à cultiver?

A

Les fibroblastes et les cellules épithéliales

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11
Q

Quels sont les cellules animales les plus difficiles à propager

A

Les lymphocytes

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12
Q

Quelles cellules animales ont une durée de vie infinie

A

Cellules cancereuse et les cellules souche

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13
Q

Quels sont les caractéristique du cancer

A
  • croissance anarchique
  • pas de mort cellulaire
  • divise a l’infini
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14
Q

On préfère travailler avec quel type de lignée? Et quels sont les risques?

A

Les lignée continues ou établies car elles ont une durée de vie illimité donc on aura jamais besoin de racheter des cellules mais c’est moin représentatif de ce que notre coprs fait

Risque: si on travaille avec des cell cancereuse et qu’on se fait mal on peut infecter nos cellules

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15
Q

Quel est la lignée qui ont une durée de vie limitée?

A

Lignées diploïdes (euploïde). Il faut jeter la souche après 20 a 80 passage. Ex la MRC-5

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16
Q

Quels sont les lignées qui ont une durée de vie illimité?

A

Les lignées continues ou établies comme les anaeuploïdes non tumorales (BHK) et les hétéroploïdes tumorales/néoplasiques (NS-0)

17
Q

À quoi est lié le processus de différentiation cellulaire?

A

À la présence de messagers chimiques produits par des cellules éloignées

18
Q

Quelles cellules est plus facile à différencier?

A

Celle qui est la plus haute “supérieure” dans une lignée

19
Q

Quels sont les 3 différents feuillets

A
  • endoderme
  • mésoderme
  • ectoderme
20
Q

Expliquer les types de communication cellulaire

A
  • communication autocrine: cellule s’envoye un message a elle même
  • Communication paracrine: à des cellules proches (il y a 2 type)
    - communication hétérocrine: envoye un message à une cellule cible de type différent
    - communication homocrine : envoye un message à une cellule cible de même type
  • jonction ouverte ou désmosome : c’est un contact direct entre les 2 cellules

Endocrine : envoye un message à une cellule cible par les vaisseaux sanguin

21
Q

Quels sont les conditions de culture?

A

T° = 37°C ou 34°C si on veut ralentir la croissance

Humidité : on va mettre un bassin d’eau stérile dans le fond de l’incubateur pour que les milieux de cultures ne s’évapore pas si non les cell vont se déshydrater

CO2 : 5 à 10 %

PH : 7.4 (6.2 pour insect)

22
Q

Les pourcentages de gaz dans l’incubateur et de où proviennent-ils ?

A

CO2 : 5 à 10%

Vient d’un cylindre de gaz carbonique comprimé et du métabolisme des cellules en culture

(H2O + CO2 –> H2CO3 –> H+ + HCO3- )

Air : 90 à 95 %

Vien de l’atmosphère ( il faut un volume minimal de milieu de culture pour assurer une bonne diffusion de O2)

23
Q

Quels sont les 2 tampons utilisé pour un maintien du pH?

A
  • Tampon carbonate : pH 5 à 7

- tampon hepes : pH 6.6 à 8 (plus constant)

24
Q

Quel est l’indicateur de pH utilisé?

A

Le phénol rouge

25
Q

Le pH influence le métabolisme de quoi?

A
  • biodisponibilité des nutriments
  • liaisons covalentes protéines
  • sensibilité des enzymes

Voir diap 28 pour couleur milieu selon le pH

26
Q

Si la couleur du milieu est jaune ca veut dire quoi? Et quel est le pH

A

Le pH est de 6.5 et il faut regarder s’il y a de la contamination et changer le milieu aujourd’hui

27
Q

Si le milieu est orange ca veut dire quoi? Et le pH est de combien

A

PH est de 7 et il faut changer le milieu dans les 24-48h qui suivent

28
Q

Si le milieu est rouge ca veut dire quoi? Et le pH est de combien

A

On le laisse comme ca et le pH est de 7.4

29
Q

Si le milieu est rouge foncé/mauve ca veut dire quoi? Et le pH est de combien

A

Changer le milieu ou remettre du CO2, regarder l’incubateur et la source de CO2 et le pH est de 7.8

Culture Cell (7 decks)

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