Croissance, Confluence, Viabilité Flashcards
quels sont les 4 phase de croissance (courbe)
- latence(lag) : adaptation, durée dépend de l’état des cell
- croissance exponnentielle(log): croissance, durée dépend de la densité initiale et du taux de croissance
- stationnaire : inhibition de contact, mort = croissance
- déclin exponnentielle : maque de ressource, mort cell
C’est quand qu’on repique?
à 80% de confluence
Quels sont les facteurs de régulation environnementaux et intracellulaires qui détermine la réalisation du cycle cellulaire ?
- Point d’ancrage et densité cellulaire (extacellulaire)
- Facteurs de croissance (extracellulaire)
- Contrôle intracellulaire
Quels sont les divers facteurs extracellulaires qui influence le cycle?
facteurs de croissance, cellules voisines, MEC
Que verifier les points de contrôle du cycle ?
- G1: L’environnement cellulaire
- G2: L’intégrité du matériel génétique de la cellule (ADN)
- G3 :La qualité du fuseau mitotique / ségrégation des chromosomes (M)
quels sont les molécules à action positive qui permettent à la cellule de franchir un point de contrôle du cycle cellulaire
les cyclines et les kinases cyclines-dépendantes
quels sont les molécules à action négative qui empêchent la cellule de franchir le point de contrôle du cycle cellulaire
protéines p53 et pRB
Quels sont les 3 point de contrôle du cycle cellulaire
- G1 ou point de restriction, gère le passage vers la phase S (synthèse de ADN).
- Le 2em point de contrôle se situe à la fin de la phase G2,
- le 3em survient vers la fin de la phase mitotique, point de contrôle M
Où demeurent les cellules qui ne franchissent jamais le point de contrôle de la phase G1
en G0
Qu’est-ce qui est une caractéristique des cellules normales animales
l’inhibition de la croissance liée au contact cellulaire
C’est quand que les cellules commence leur différenciation?
une fois qu’elles ont couvert la surface du substrat et qu’elles sont collées les unes aux autres, elles arrêtent leur croissance et amorcent leur différenciation
qu’est-ce qu’un point d’ancrage
les cellules adhèrent à la surface et se multiplient
Pourquoi que la croissance des cellules cancéreuse est exceptionnel?
Elles n’ont pas besoin de pas de point d’ancrage et leur croissance n’est pas inhibée par le contact avec d’autres cellules. Elles vont continuer à pousser et s’empiler les unes sur les autres ( même cose pour cell insecte)
Rôle des facteurs de croissance et un exemple
faorise la division cellulaire, ex: le PDGF
Si on ne met pas de facteur de croissance il n’y a pas de division cellulaire qui a lieu
Observation à faire pour évaluer la croissance des cellules
- couleur milieu
- forme
- Présence de contamination/détorioration
- confluence
- l’adhérence
quels sont les signes de détérioration
- Cellules s’arrondissent et ne sont pas brillantes
- Cellules en suspension (mortes) et débris cellulaires
- Cellules multinucléés (si pas caractéristique de la culture)
- Modification anormale du pH du milieu culture
Quels sont les signes d’apoptose?
- Cytoplasme granuleux
- Présence d’un nombre anormal de vacuoles
Quel est l’intérêt d’avoir un contrôle sur la phase de latence(de pouvoir étirer ou diminuer le temps)?
Produire plus ou moin de métabolite pertinent pour notre recherche
Quels paramètres permet d’évaluer l’état de la culture et d’optimiser les conditions de croissances?
- Durée de la phase de latence
- Densité de saturation (plateau!)
- Intervalle des repiquage
- Rapport de division
- Taux de croissance et TDP (temps de doublement de la population)
- Détermination de l’âge
à quoi correspond la densié de saturation ?
au nombre maximal de cellules pouvant être contenues par unité de surface lorsque la culture couvre 100 % de l’espace cultivable
Comment fait-on pour calculer le taux de croissance ainsi que le temps requis pour que la population double
on se sert de la pente de la courbe de croissance (duant la phase de croissance)
À partir de courbes de croissance, quel paramètre est-il possible de mesurer?
- la durée de la phase de latence
- la densité et la concentration optimales d’ensemencement
- la densité et la concentration à confluence età saturation
- les intervalles des passages
- le temps de doublement de la population (PDT).
Pourquoi veut- on maîtriser le PDT
- savoir c’est quand qu’on atteint la conflunce
- toujours avoir un nombre précis de cellule
- mesurer l’effet d’agents cytotoxiques
quel est l’impact du vieillissement cellulaire
- d’augmenter le temps de génération
- de diminuer l’adhérence (elles produisent moins de facteurs d’attachement)
- de diminuer le métabolisme (synthèse de protéines et mitose).
sur quoi est basée a méthode d’estimation de l’âge selon le nombre de générations
sur l’hypothèse selon laquelle les cellules en culture se divisent de manière séquentielle et symétrique, de sorte que l’augmentation de la population est exponentielle. Ainsi, à la fin de n générations, chaque cellule présente dans l’inoculum initial aura produit 2n cellules.
