Immunohistochimie Flashcards
Ces quoi le concept de l’immunohistochimie
Antigène-anticorps
Agents de reconnaissance ajouté
Ces quoi l’utilité de l’immunohistochimie
Détection de:
- cellule cancéreuse
- origine des cellules tumorales dans tissu
- cellule métastatique
- présence de toxines
Ces quoi les méthodes de fixation recommandées pour l’immunohistochimie
Fixation par congélation
Fixation par agents chimique
Ces quoi les caractéristiques des fixateurs chimique pour l’immunohistochimie
Coagulant
Non additif
Bonne pénétration de l’anticorps
Quelle facteur peuvent influencé la qualité de la technique de fixation
Délai entre le prélèvement et la fixation
Propriétés et concentrations des fixateurs
PH et solutions tampons
Durée dans le fixateur
Entreposage
Pourquoi le formaldéhyde est t’il non recommandé pour l’immunohistochimie
Endommagé réactivité antigénique
Quellles fixateur sont recommander pour l’immunohistochimie
Actétone et alcool
Formaldéhyde
B-5
Glutaraldéhyde
Ces quoi les caractéristiques de acétone et alcool
Coagulant et non additif
Ces quoi les caractéristiques du formaldéhyde
Non coagulant
Additif
8-12 H (éviter pont de méthylène)
Il faut aller récupérer les élipitopes
Formaldéhyde zinc est meuilleur
Ces quoi les caractéristiques du B-5
Excellent pout morphologie nucléaire
Hématopoïétiques
Remplacé par formol zinc acétique
Ces quoi les caractéristiques du glutaraldéhyde
Préserve bien la morphologie cellulaire
Bloque les déterminants antigénique de façon irréversible
Ces quoi la vimentine
Détermine si tissu est trop fixer
Si aucune vimentine trop fixer
Antigène facilement détruit
La circulation a quelle importance
Assure que la fixation est complète et bien circuler
Ces quoi les caractéristiques différentes au niveau de la microtome
Eau distillée seulement
Aucun adhésif
Lame chargés
Port de gants pour éviter contamination
Veut aucun plis dans tissu
Ces quoi les avantage de récupérer les épitopes
Permet plus grande dilution des anticorps
Détectable
Réaction plus intense et temps incubation moins long
Coloration plus uniforme
Coloration de fonds diminuer
Consistance de la coloration
Meilleur standardisation
Ces quoi l’acronyme pour la méthode à chaleur
HIER
Ces quoi l’acronyme pour la méthode à enzyme
EIER
Ces quoi la visualisation en immunohistochimie
Certains AC sont conjugués a un flurochrome ou a un enzyme afin de visualiser le site de liaison à l’antigène recherché
Ces quoi le concept de l’immunofluorescence
Conjugués a un fluorochrome
Fluoresceine (vert)
Rhodamine (rouge-orange)
Sensible + spécifique + simplicité
Quelle type de spécimen sont recommandé pour l’immunofluorescence
Biopsie de peau ou reins
Congélation préférable
Ces quoi le concept de imunohistochimie enzymatique
Ac conjugués a un enzyme
Enzyme produit composés colorés
Contre colorant ne doit pas contenir d’alcool
Hémateine de Mayer
Ces quoi les 5 méthode immunohistochimique
Direct
Indirect
Complexe immun enzymatique ou non marqué
Avidine-biotine (ABC)
Monomère et polymère
Ces quoi la méthode directe
AC spécifique vers AG dans tissu du patient
Couplé avec fluorochrome
Peau et rein
Fluoroscéine et rhodamine
Ces quoi les avantages de la méthode de la méthode direct
Rapide
Sections 2 microns préférable;e
5-6 microns adéquates
Ces quoi les désavantage de la méthode direct
Seulment section congelé
Entreposage des lame
Ces quoi la méthode indirect
Deux AC pour détecter AG dans tissu du patient
AC 1: spécifique a AG
AC 2: spécifique a AC 1 (AC anti-humain)
On ajoute quoi a la méthode indirect pour faire un produit coloré
DAB
Ces quoi la différence entre la méthode indirect a 2 étape et a 3 étapes
La méthode a 3 étapes intensifie le signal
Coloration plus intense à cause de la présence de deux marquer
Ces quoi la méthode de complexe immunitaire enzymatique ou non marqué
3 étapes
1: AC vers AG
2: AC secondaire ou liaison
3: complexe enzyme (anti-enzyme)
Quelle substrat sont ajouté pour développer la coloration chez le complexe immunitaire enzymatique soluble ou non marqué
PAP (peroxydase — anti peroxydase)
Phosphatase alcaline — anti phosphatase alcaline
Ces quoi la méthode Acvidine-Biotine
Anticorps primaire
Anticorps secondaire avec biotine
Complexe de enzymatique avidine-biotine
Ces quoi l’ Avidine
Proteins
4 site pour liaison de biotine
Très forte affinité pour la biotine
Provient de blanc d’œuf ou streptomycetes
Ces quoi la Biotine
Vitamine
Provient de blanc d’œuf
Forte affinité pour avidine
