Hybridation Flashcards
C’est quoi l’hybridation
Étude appartement entre deux brins
Appariement par liaison hydrogène
C’est quoi les conditions pour l’hybridation
Besoins brins complémentaire
Température et condition chimique influence appariement
C’est quoi les applications en laboratoire de l’hybridation
Détection séquence spécifique ADN et ARN
Identifier mutation (ex: cancer BRCA1)
Diagnostic infection (ex: VIH)
Vrai ou faux
Les méthodes d’hybridation doivent être fiable et spécifique pour éviter faux positive
Vrai
C’est quoi des exemples d’application de laboratoire d’hybridation (technique)
Southern blot (ADN)
Northern blot (ARN)
FISH (hybridation fluorescente)
Puces a ADN (microarrays)
Sondes moléculaires spécifique
Pourquoi la spécificité de l’hybridation est-elle cruciale en laboratoire clinique?
Bon diagnostic précis pour bon traitement
Joue sur le taux de faux positive et négative
Éviter nombre de fois analyse sont non spécifique
C’est quoi la température de fusion (Tm)
Température ou 50% des brins sont dénaturés/séparée
La température de fusion dépend de quoi
Composition de base
Longueur de séquence
Concentration en ions
Combien de Liason hydrogène est entre les bases
C-G 3 liaison
A-T 2 liaison
A-U 2 liaison
C’est quoi la formule pour trouver le Tm
Tm = 4 x (G + C) + 2 x (A + T)
C’est quoi la stringences
Influence la spécifité
C’est quoi les composent qui peut influencer la stringence
Température
Concentration en sel (NaCl)
Présence de dénaturants (formamide et urée)
C’est quoi une faible stringence
Non spécifique
C’est quoi la forte stringence
Très spécifique
C’est quoi la méthode de FISH
Détection translocation
BCR-ABL en hématologie