Histologie

Question 1

Quels sont les trois étapes de la circulation ?
Les produits utilisés
Leur but

Answer 1

Déshydratation —> Éthanol : déshydrater les cellules puisque la paraffine n’est pas miscible dans l’eau

Éclaircissement —> Toluène : Éthanol n’est pas miscible avec la paraffine. Il faut donc le sortir du tissu.

Imprégnation —> Paraffine : Consiste à imprégner le tissu de paraffine.

Question 2

Quel est l’effet d’une mauvaise déshydratation :
Trop long :

trop court :

Answer 2

Trop long : durcissement excessif des tissus

Trop court : Il reste de l’eau dans le tissu donc l’imprégnation à la paraffine ne se fera pas adéquatement, les coupes et la coloration seront pas uniformes.

Question 3

Pour quel raison doit on faire l’une des étapes de la circulation sous une hotte ?

Answer 3

Car le toluène est toxique.

Question 4

Quels sont les 6 facteurs qui influence la fixation et la circulation ?

Answer 4

1. La concentration du produit déshydratant : Ceci doit se faire de façon graduelle, sinon il y aura rétraction trop rapide du tissu, et de la distorsion sur les coupes histologiques.
2. Volume total d’agent déshydratant et nombre de bains : plusieurs bains de volumes plus petits sont plus efficaces qu’un seul bain de grand volume.
3. Agitation : agiter le solvant favorise les échanges et ainsi l’efficacité de chaque étape.
4. Durée : si le temps de séjour est trop long, il y aura un durcissement exagéré des tissus. (Effets néfastes d’une mauvaise déshydratation)
5. Chaleur : la chaleur modérée accélère les étapes
6. Taille et consistance des pièces : plus la taille de la pièce est grosse, plus le processus sera long. Plus la pièce est dense et fibreuse, plus le processus sera long.

Question 5

Vrai ou faux. Lors de la déshydratation, on veut des bains d’éthanol à concentration décroissante.

Answer 5

Faux. On veut plusieurs bains à concentration croissante.

Question 6

Quels sont les trois buts de l’enrobage ?

Answer 6

1. Facilite la coupe au microtome
2. Facilite la manipulation du tissu suivant la coupe (éviter de toucher au tissu)
3. Facilite l’entreposage (se faire identifier)

Question 7

Quels sont les 5 erreurs/conséquence d’enrobage ?

Answer 7

1. Mauvaise orientation de la pièce
2. Dépôt de la pièce dans le moule avant la paraffine. Va déchirer lors du démoulage.
3. Pinces trop chaudes. Va brûler le tissu
4. Refroidissement trop rapide du bloc de paraffine. Crée une forme concave entre la pièce et le fond du moule
5. Attente trop longue après le dépôt de la paraffine dans le moule et le dépôt de la pièce. Va avoir une trop grande épaisseur de paraffine au dessus de la pièce donc du rabotage excessif.

Question 8

Quels sont les trois étapes du processus de coloration ?

Answer 8

1. Préparation à la coloration = déparaffinage et hydratation.
2. Coloration : imprégnation du tissu avec les colorants (HES)
3. Étapes préparatoires au montage = déshydratation et éclaircissement.

Question 9

Explique moi la différence entre une coloration directe et une coloration indirecte.

Answer 9

Coloration directe : Se lie au tissu sans intermédiaire. Les colorants se fixent directement sur l’objet.

Coloration indirecte : se lie au tissu via un intermédiaire = mordant.

Question 10

Explique moi la différence entre une coloration simple et une coloration combinée.

Answer 10

Coloration simple : un seul colorants
Coloration combiné : plusieurs colorants.

Question 11

Donne moi un exemple d’un colorant direct.

Answer 11

Bleu de Méthylène

Question 12

Donne moi un exemple d’une coloration combinée.

Answer 12

Diff Quick

Question 13

Donne moi un exemple d’une coloration indirecte.

Answer 13

Hématoxyline, ce colorant à besoin d’un mordant.

Question 14

Donne moi un exemple d’une coloration simple.

Answer 14

Bleu de méthylène.

Question 15

Explique moi la différence entre une coloration progressive et une coloration régressive.

Answer 15

Coloration progressive: Coloration jusqu’à ce que l’action sélective du ou des colorant(s) permette de bien distinguer les constituants. Puis on lave pour enlever le surplus.

Coloration régressive : Surcoloration, puis décoloration progressive.

Question 16

Donne moi un exemple de coloration progressive.

Answer 16

Diff-Quick

Question 17

Donne moi un exemple de coloration régressive.

Answer 17

Coloration HES

Question 18

Explique moi la différence entre une coloration acide et une coloration basique.

Answer 18

Coloration acide : Les molécules colorantes sont chargées négativement (anions)

coloration basique : Les molécules colorantes sont chargées positivement (cations)

Question 19

Quel type de colorant va coloré les molécules chargées positivement d’une structure ?

Answer 19

Le colorant acide.

Question 20

Quel type de colorant va coloré les molécules chargées négativement d’une structure ?

Answer 20

Colorant basique.

Question 21

Quel type de colorant est chargé positivement ?

Answer 21

Basique

Question 22

Quel type de colorant est chargé négativement ?

Answer 22

Acide

Question 23

Quel type de colorant va coloré le cytoplasme ?

Answer 23

Acide

Question 24

Quel type de colorant va coloré le noyau ?

Answer 24

Basique

Question 25

Donne moi un exemple de colorant acide

Answer 25

Éosine

Question 26

Donne moi un exemple de colorant basique

Answer 26

Bleu de méthylène.

Question 27

Que consiste la coloration HES et explique leur rôle.

Answer 27

Hématoxyline —> À besoin d’un mordant et va colorer le noyau (ADN) Aluminium ammonium sulfate (pas connaître le nom) —> le mordant Alcool chlorhydrique —> enlève le surplus de laque causé par l’hématoxyline et son mordant. Carbonate de lithium —> Stabilise l’hématoxyline Éosine —> Colore le cytoplasme Safran —> Colore le collagène

Question 28

Après la coloration HES, quel couleur devrait être visible pour quel colorant.

Answer 28

Hématoxyline : bleu foncé pour les noyaux. Éosine : rose pour le cytoplasme Safran : jaune/orangé pour le collagène.

Question 29

Quels sont les trois raisons pour le montage ?

Answer 29

1. Protection mécanique des coupes tissulaires : permet une manipulation aisée des lames histologiques. En son absence, les pièces seraient rapidement déchirées, arrachées ou écrasées. 2. Protection chimique des colorants: protège les colorants de l’oxydation par l’oxygène de l’air ambiant et empêche les colorants de précipiter dans les tissus. 3. Permet d’obtenir un indice de réfraction homogène : le milieu de montage a un indice de réfraction très proche de celui de la lame et la lamelle. on obtient donc un objet homogène du point de vue de la réfraction = moins de déviation de la lumière à partir de la source jusqu’à l’œil de l’observateur. Minimise les pertes de lumière et facilite l’observation.

Question 30

Quels sont les 7 principes généraux du montage ?

Answer 30

1. La coupe doit être imprégnée du solvant du milieu de montage avant cette opération 2. Ne pas laisser sécher la coupe entre la fin de la coloration et le début du montage. Il y a risque de précipitation des colorants 3. Après le dépôt de la lamelle on doit faire sortir les bulles d’air emprisonnées entre la lamelle e la lame. Sinon, la visualisation sera moins bonne et la lame sera trop épaisse et non observable à 1000x 4. L’excès du milieu de montage qui déborde de la lamelle peut être enlevé à l’aide de solvant 5. Les lames doivent sécher 30 à 60 min avant d’être lues 6. Laisser sécher les résines 4-5 jours avant d’entreposer les lames dans le classeur 7. Travailler toujours dans un endroit ventilé.