Histología/primer semestre/primer bloque/técnicas histológicas Flashcards
¿Qué es la técnica histológica?
Conjunto de procedimientos aplicados a un tejido para que pueda ser observado y estudiado más fácilmente
¿Qué permiten observar los procesos inmediatos o vitales?
El estudio de células sanguíneas, protozoarios, o células suspendidas en su habitad natural o en una solución salina
¿Qué es la coloración vital?
Cuando se usan colorantes inocuos para la vida de las células
¿Cuántos tipos de coloración vital existen?
Coloración intravital y supravital
¿En qué consiste la coloración intravital?
En la administración de colorantes por las vías digestiva o traqueal, o por inyecciones
¿Cuáles son los colorantes más usados en la coloración intravital?
Tinta china, carmín de litio, azul tripan
¿Qué es la coloración supravital?
La coloración de muestras provenientes de organismos vivos
¿Cómo se muestran las mitocondrias en la coloración supravital?
Con el verde de jano
¿Cómo se muestran las ramificaciones nerviosas con la coloración supravital?
Con azul de metileno
¿Cómo se muestran el ADN y el ARN con la coloración supravital?
Con naranja de Acridina
¿Qué finalidad tienen los procedimientos mediatos o postvitales?
Preparar y preservar tejidos con células muertas
¿Cuáles son los pasos de los procedimientos postvitales?
- Toma de la muestra - Fijación - Inclusión - Microtomía - Tinción - Montaje
¿Cuáles son los dos tipos de toma de muestra?
Mediante biopsia y mediante necropsia
¿En qué consiste la biopsia?
En obtener una muestra de un organismo con vida mediante una cirugía
¿Cómo se extraen células epiteliales de renovación constante?
Mediante citología exfoliativa
¿En qué consiste la necropsia?
En obtener muestras de organismos muertos
¿Por qué no es recomendable usar tijeras en la extracción de muestras
Se pueden lesionar los tejidos y ocasionar distorciones
¿Cuál debe ser el tamaño inicial de las muestras?
Menor a 10mm por lado por 5mm de grosor
¿Cuál es la finalidad de la fijación?
Detener todo proceso autolítico e impedir modificaciones celulares
¿Cómo se consigue la fijación?
Los fijadores químicos inmovilizan principalmente proteínas enzimáticas
¿Cuáles son los dos grandes grupos de fijadores?
Oxidantes y reductores
Ejemplos de fijadores oxidantes
Ácido ósmico, bicromato de potasio, ácido acético
Ejemplos de inmovilizadores reductores
Formaldehído, alcoholes etílico y metílico
¿Con qué fijador se conserva el glucógeno?
Alcohol etílico absoluto
¿Qué fijador facilita la coloración de las mitocondrias?
Bicromato de potasio
¿Qué fijador conserva e inmoviliza parcialmente a los lípidos?
Cloruro de calcio
Ejemplos de fijadores gaseosos
Formaldehído
Ejemplos de fijadores líquidos
Ácido acético, alcohol etílico, acetona
Ejemplos de fijadores sólidos
Bicloruro de mercurio, bicromato de potasio
¿Cuáles son las condiciones para que un fijador sea bueno?
Matar a las células, poder de penetración, poder de difusión, producir dureza, manipulable, no disolvente de componentes celulares, fácil de conseguir
¿Cuál es el mejor fijador simple?
El formol
¿En qué concentración se emplea el formol como fijador simple?
10%
¿Cuál es el tiempo de fijación de las muestras del formol?
De 24 a 48hrs en refrigeración
¿Qué son los fijadores compuestos?
Compuestos de distintos fijadores que forman uno solo
¿Para qué se usa el formol con bicloruro de mercurio?
Para fijar tejidos hematopoyéticos y linfaticoreticulares
¿Cuánto tiempo debe usarse el formol con bicloruro de mercurio?
No más de 48 horas
¿Cuándo se emplea formol con cloruro de calcio?
Cuando se desea preservar lípidos
¿Qué fijador se utiliza en embriones y fetos pequeños?
Fijador de Bouin
¿Para qué se usa el fijador de Canroy?
Para observar cromosomas y glucógeno
¿Cuáles son los criterios para una buena fijación?
Elección del fijador, tamaño de la muestra, volumen del fijador, tiempo de fijación, temperatura de la fijación, almacenamiento y lavado
¿Cuál debe ser el tamaño de las muestras para una buena fijación?
1 a 2cm2 por 2 a 5mm de espesor
¿Cuál es la proporción adecuada de volumen entre muestra - fijador?
1 a 20
¿De qué depende el tiempo de fijación?
Del tipo de fijador que se utiliza
¿Cuál debe ser la temperatura de la fijación?
Menor a 4°C con el fijador enfriado previamente
¿En qué consiste la fijación por perfución?
Se reemplaza la sangre del animal por el fijador deseado mediante un sistema de irrigación y drenaje
¿Para qué se usan las sustancias de inclusión?
Para que la muestra adquiera consistencia y dureza de tal modo que pueda ser rebanada en tiras de 5 a 10 m
¿Cómo funcionan las sustancias de inclusión?
Se infiltran en las células y les sirven de soporte, haciendo de los tejidos un bloque homogéneo
¿Cuáles son las sustancias de inclusión solubles en agua?
Gelatina, carbowax, glicol metacrilato
¿Cuáles son las sustancias de inclusión solubles en solventes orgpanicos?
Parafina, celoidina, resinas epóxicas
¿Cuáles son los pasos para la integración en parafina?
Deshidratación
Impregnación en el solvente (diafanización)
Inclusión
¿En qué consiste la deshidratación para la inclusión con parafina?
La muestra se lava con baños sucesivos de alcohol etílico
¿Cómo se comprueba de deshidratación incompleta de los tejidos?
Cuando muestran un aspecto turbio al sumergirlos en el líquidio diafanizador
¿Cuál es la función del líquido diafanizador?
Mezclarse con el alcohol de los tejidos para eliminarlo y disolver la parafina al mismo tiempo
¿Cuál es el líquido diafanizador más frecuente?
El xilol
¿Qué son las parafinas?
Hidrocarburos saturados provenientes del petróleo
¿Cuántos tipos de parafinas hay?
Blandas, semiduras y duras
Características de las parafinas blandas
Punto de fución entre los 45°C y los 52°C
¿Para qué se usan las parafinas blandas?
Para detectar antígenos mediante inmunohistoquímica
¿Cuál es el punto de fución de las parafinas semiduras?
De los 54°C a los 58°C
¿Cuál es el tamaño de las secciones que se pueden obtener con parafinas semiduras?
De 5 a 7um
Punto de fución de las parafinas duras
60 a 65°C
¿Cuál es el propósito de la microtomía?
Obtener cotes de tejido transparentes y pequeños
¿Cuáles son los microtomos de uso más frecuente?
Tipo Minot
¿Cuándo se usan los microtomos de deslizamiento?
Cuando la inclusión es en celoidina o cuando los tejios a cortar son muy grandes
¿Qué medida de corte producen los microtomos tipo Minot?
Cortes seriados de 4 a 7um
¿Para qué se usan los cortes seriados?
Para realizar reconstruccuines tridimensionales del tejido
¿Qué se requiere para el afilado de las cuchillas de los microtomos?
Placa de vidrio despulida y sustancias abrasivas
¿Para qué se extienden los cortes?
Para evitar que tengan arrugas al momento de observarlos
¿Cómo se extienden los cortes?
Sumergiendolos en el líquido extendedor, el cual está en el baño de flotación a 40°C
¿Cómo se elimina el líquido extendedor de las muestras?
Calentando la muestra en una plancha a 50°C por 3 o 4 horas
¿Para qué se usa la coloración?
Para destacar diferentes células y observar los tejidos más facilmente
¿Cuáles son las dos teorías de la coloración?
Física y química
¿Cómo se da la coloración de acuerdo a la teoría física?
Por un proceso de adsorción. El colorante se mantiene gracias a la cohesión celular
Los lípidos se tiñes por a___
Adsorción, teoría física, Saudnes III o IV
¿Qué propone la teoría química de la coloración?
El colorante se une al los tejidos combinándose con éstos debido a la presencia de moléculas ácidas o básicas
De acuerdo a esta teoría, los colorantes ligan mediante enlaces
Química
¿Qué carga eléctrica tiene el citoplasma celular?
Positiva
¿Cómo se clasifican los colorantes?
Naturales y artificiales
¿De dónde se pueden extraer los colorantes naturales?
De animales y vegetales
¿De dónde se extrae el carmín?
De la cochililla
¿Para qué se usa el carmín de Best?
Para demostrar glucógeno
¿Para qué se usa el carmín de Mayer?
Para demostrar mucina
¿Para qué se usa el carmín de litio?
Para demostrar células fagocíticas
¿De dónde se extrae la hematoxilina?
De la corteza del palo de campeche
¿De dónde se extrae la safranina?
De una lilicea
¿Cómo se extraen los colorantes sintéticos?
Del destilado de la hulla o carbón
Nombre genérico de los colorantes sintéticos
Derivados de anilina
Los colotantes artificiles son s___
Sales
¿Cómo se le da color a la anilina?
Con modificaciones químicas en su anillo bencénico
Clasificación de los colorantes artificiales
Ácidos
Básicos
Neutros
Indiferentes
¿Qué son los colorantes ácidos?
Sales cuya parte ácida es la que brinda el color
¿A qué se debe el color en el eosinato de sodio?
Al ácido eosínico
¿Qué carga tienen los colorantes ácidos?
Negativa
¿Con qué otro nombre se le conoce a los colorantes ácidos?
Colorantes citoplasmáticos
La eosina, el amarillo de metanilo y la fuscina son ejemplos de colorantes
Ácidos
¿Qué son los colorantes básicos?
Sales que poseen la parte teñida en su parte básica
El azul de metileno es un colorante
Básico
¿Qué carga poseen los colorantes básicos?
Positiva
¿Por qué a los colorantes básicos también se les llama colorantes nucleares?
Por su afinidad de colorear ADN y ARN
¿Cómo se les llama a las sustancias que se tiñen por los colorantes básicos?
Basófilas
La hematoxilina, el rojo nuclear y el azul de metileno son colorantes ___
Básicos
¿Qué son los colorantes neutros?
Sales cuyas partes ácidas y básicas aportan el color
¿Qué tipo de colorante es el eosinato de azul de metileno?
Neutro
Son colorantes que pueden teñir tanto al citoplasma como a los núcleos
Neutros
¿Qué es la metacromasia?
La capacidad de que un colorante proporcione un color en la muestra distinto del color inicial gracias a la unión con cromotropos
Los colorantes de Wright, May Grünwald y Gimesa son ___
Neutros
¿Qué son los colorantes indiferentes?
No forman sales, son compuestos no iónicos
Tipo de colorantes que tiñe selectivamente a los lípidos
Indiferentes
El sudán negro y el rojo oleoso son ejemplos de colorantes ___
Indiferentes
¿Qué es la coloración directa o sustantiva?
Cuando las células y tejidos se tiñen en el contacto directo con el colorante
Ejemplo de coloración directa
Coloración de los núcleos por el azul de metileno
¿Qué es la coloración indirecta o adjetiva?
Aquella que tiene que recurrir a un mordiente para que el colorante tiña
¿Qué es la laca?
La combinación entre el mordiente y el colorante
¿Qué tipo de tinción son los colorantes de hematoxilina?
Indirecta
¿Cómo es la coloración progresiva?
Se dejan las muestras en el colorante para que éste actúe con el paso del tiempo, y se retiran una vez que se haya alcanzado la coloración deseada
¿Qué es la coloración regresiva?
Los tejidos se tiñen de más y se despintan con ayuda de un diferenciador hasta que se alcance la coloración deseada
¿Qué es la coloración simple?
Cuando se emplea un solo colorante
Teñir los núcleos de las células con tionina es una coloración ___
Simple
¿Qué es la coloración compuesta?
El uso de varios colorantes para teñir diversas estructuras
¿Qué es la coloración simultánea?
Cuando en una sola solución se mezclan varios colorantes al mismo tiempo
¿Qué es la coloración sucesiva?
Consiste en aplicar a los tejidos soluciones sucesivas de varios colotantes
¿Qué es la coloración ortocromática?
Tinción producida cuando el colotante tiñe cierta estructura de su propio color
¿Qué es la coloración pancromática?
Ejercida por colorantes neutros, cuando la parte ácida y básica pintan de colores distintos a distintos componentes, y estos a su vez mezclan colores, resultando en colores nuevos
¿Qué es la coloración H y E?
Coloración de hematoxilina y eosina
¿Cuál es la coloración más frecuente para el microscopio fotónico?
H&E
¿De qué color se tiñe el núcleo con la H&E?
Azul, azul morado, violeta, o negro
¿Cuál es el procedimiento para el montaje?
Añadir la sustancia aderente, evaporar el xilol, tapar con cubreobjetos
