Geenien muokkaaminen Flashcards
Mitä geenisiirrolla tavoitellaan?
Geenisiirrolla tavoitellaan jonkin uuden ominaisuuden ilmenemistä, bakteerien tai hiivosolujen proteiinien tuotantoa tai geenikirjastoja.
Miten geeninsiirto tehdään bakteereihin?
Geeninsiirto bakteereihin tapahtuu yhdistelmä-DNA-tekniikan avulla. Plasmidit toimivat vektoreina, jotka bakteerit ottavat sisäänsä. Bakteerit monistavat siirtogeeniä, joka voidaan eristää tutkimuksia varten.
Miksi intronit täytyy poistaa geenistä ennen siirtoa bakteeriin?
Koska bakteereilla ei ole introneita, ne eivät myöskään kykenen muokkaamaan esiaste-RNA:ta lähetti-RNA:ksi.
Mitä kaikkia entsyymejä tarvitaan siirrossa bakteeriin, kun geeni on peräisin tumallisesta solusta?
katkaisuentsyymiä, käänteiskopioijaentsyymiä, RNA-nukleaasia, DNA-polymeraasia ja ligaasia.
Miksi geeninsiirto hiivasoluihin on yksinkertaisempaa?
Koska hiivat ovat tumallisia yksisoluisia eliöitä, jolloin geeniä ei tarvitse muokata ennen siirtoa.
Mitä muita kuin plasmideja hyödynnetään geeninsiirrossa hiivasoluihin?
Keinotekoisia kromosomeja, joihin mahtuu DNA:ta huomattavasti enemmän kuin plasmideihin.
Mitä tapahtuu mikroinjektiossa?
Mikroinjektiossa geeninsiirto tapahtuu eläinsolun tumaan hyvin ohuen lasiputken avulla.
Miten saadaan siirtogeeninen eläin?
Siirtogeeninen eläin saadaan kun tehdään geeninsiirto mikroinjektiolla joko munasolun tai siittiön tumaan ennen niiden yhtymistä.
Miten geeninsiirto soluviljelmään etenee?
Siirtogeenejä lisätään kasvatusliuokseen, johon annetaan lyhyt sähköimpulssi. Sähköimpulssi tekee soluviljelmän solukalvoista ja tumakoteloista läpäisevän. Voidaan hyödyntää myös liposomeja, jotka sulautuvat solukalvoon.
Millä menetelmillä geenejä voidaan siirtää eläinsoluun?
- mikroinjektio
- sähköpulssi
- liposomi
- virus
Mikä on protoplasti?
Protoplasti on soluseinätön kasvisolu.
Miten protoplasteihin voidaan siirtää geenejä?
- mikroinjektiolla
- sähköpulssilla
- liposomeilla
Millä tavoin kasvisoluihin voidaan siirtää geenejä?
- geenipyssy (pieniä DNA:lla päällystettyjä metallihiukkasia)
- agrobakteerit (infektoi kasvisolun)
- mikroinjektiolla
- sähköpulssilla
- liposomeilla
Mitä geenin poistamisessa tehdään?
Geenin poistamisessa haluttu geeni tehdään toimintakyvyttömäksi.
Miten geenin poisto tehdään?
DNA:han liitetään vektorin avulla poistettavaa geeniä vastaava DNA-pätkä, joka ei toimi solussa. Tämä hakeutuu tumaan ja korvaa toimivan geenin solun perimästä.
Mikä on CRISPR-Cas-tekniikka?
Tekniikka, jonka avulla DNA:ta voidaan pilkkoa yhden emäksen tarkkuudella juuri siitä kohdasta, kuin tutkimuksen kannalta on oleellista.
Miten Crispr-tekniikka toimii?
- synteettisesti tuotettua Opas-RNA:ta liitetään cas-entsyymeihin
- opas-RNA:n avustuksella cas-entsyymi leikkaa DNA:n ohjatusta kohdasta
- leikattuun kohtaan voidaan liittää siirtogeeni
- jos leikattavia kohtia on kaksi niiden välistä voidaan poistaa pala DNA:ta
Minkä niminen tekniikka on kehitetty Crispr-tekniikan jälkeen?
Prime-tekniikka, jolla voidaan katkaista DNA:sta vain toinen juoste.
Mitä tarkoitetaan kloonauksella?
Kloonais on bioteknologiassa molekyylien, solujen tai kokonaisten organismien kopioiden tuottamista.
Millä tekniikalla nisäkkäitä voidaan kloonata?
Tumansiirtotekniikalla
Mitä hyötyä kloonaamisesta on?
- nopeuttaa tutkimuksia
- auttaisia sukupuuttoon kuolevia eläimiä
Mitä tapoja geenitietokantojen säilömiseen on?
Geenikirjastot, geenipankit ja biopankit.
Mitä ovat geenikirjastot?
Geenikirjastot ovat bakteereissa tai hiivoisa varastoitujen geenien kokoelmia.
Mitä ovat genomiset geenikirjastot?
Genominen geenikirjasto sisältää mahdollisimman kattavasti eliön genomin eli myös geenien säätelyalueet, intronit ja geenien ulkopuoliset alueet.
Mikä on eksomikirjasto?
Eksomikirjastossa säilytetään vain geenien eksonit.
Mikä on koetin?
Koetin on synteettisesti valmistettu lyhyehkö, yksijuosteinen DNA- tai RNA-pätkä, jolla voidaan etsiä tietty geeni.
Mitä geenipankit sisältävät?
Geenipankit sisältävät eliöiden geenien lisäksi mm. kasvien siemeniä ja eläinten soluja.
Mitä ovat genomitietokannat ja biopankit?
Genomitietokantoihin tallennetaan tietoa ihmisgenomista.
Biopankkeihin tallennetan kudos- ja DNA-näytteitä sekä kyselylomakkeita ja terveystietoja.
