Föreläsning 2

Question 1

Vilka egenskaper är önskade hos en matris?

Answer 1

I en kolonn utgörs ungefär 90% av denna av tillsatt matris. Storleken kan variera mellan 2-100 um.

-hydrofil
-specifik bindning av protein
-stabil mot höga flöden och tryck
-stabil mot extrema buffertar
-möjlighet att sätta dit funktionell grupp.
-kan processas till olika format.

Question 2

Ge exempel på matris av oorganiskt material

Answer 2

• silika
• glas
• hydroxyapatit

Question 3

Ge exempel på matris av organiskt syntetiskt material

Answer 3

-polyakrylamid
-polymetakrylat
-polystyren

Question 4

Ge exempel på matris av organiska polysackarider som material

Answer 4

• cellulosa
• agaros
• dextran

Question 5

Vad menas med aerogel och ge exempel

Answer 5

aerogel är en matris som har samma volym oberoende av vätskefasen. Exempel på sådana matriser är poröst glas, silika, polystyren gel och polymetakrylatgel.

Question 6

Vad menas med Xerogel och ge exempel

Answer 6

matris som sväller beroende på vätskefasen. Exempel på sådana är dextran, agaros och polyakrylamid

Question 7

Vilka material kan göra både xerogel och aerogel matris av?

Answer 7

cellulosa och hydroxyapatit

Question 8

Vad är effekten av små respektive stora matriskulor?

Answer 8

För mindre kulor så är effektivitet högre men motståndet är stort. För större kulor så är motståndet mindre men effektiviteten är också lägre

Question 9

Förklara mikroporös matriser

Answer 9

De är ofta mindre än 2 um, de är mjuka och klarar enbart låga flöden. Är korslänkade polymer som exempelvis dextran. Dessa passar till size exclusion chromatography.

Question 10

Förklara makroporösa matriser

Answer 10

Dessa är ofta större än 50 um. Dessa tillverkas genom aggregera och sedan korslänka exempelvis agaros. Dessa passat till adsoptions kromatografi.

Question 11

Förklara vad en komposit är.

Answer 11

Det är matriser som både har makro och mikroporer.

Question 12

Vad är monolith?

Answer 12

Det är ett annat alternativ till matriskulor. Dessa är av ett poröst material med kanaler. Dessa passar bra till separation av stora molekyler men är känsliga för skjuvkrafter.

Question 13

Vad är membran?

Answer 13

Ett alternativ istället för matris som använder membran med hög adsorption. Dessa sätts ofta i kasset och möjliggör högt flöde. dessvärre är dessa ofta för engångsanvändning.

Question 14

Vilka engenskaper är önskade hos buffert?

Answer 14

• Hydrofil
• Icke toxiskt
• hög buffertkapacitet (pH intervall, sprädning, temperatur)
• Hög renhet
• liten absorbans vid 280 nm
• liten salt effekt/interaktion med andra komponenter
• stabil
• avluftad.

Question 15

Vilka är de vanligaste tillsatserna i buffert?

Answer 15

• Syra/bas
• salt
• anti-oxidant (DDT)
• proteashämmare (PMSF)
• metallbindare (EDTA)
• detergenter (trixon x-100)
• stabiliserare (glycerol, arginin, glycin)
• bakteriehämmare ( natriumazid)

Question 16

HLPC

Question 17

FPLC