Fluorometri

Question 1

Vad innebär fluorescens?

Answer 1

Processen där en molekyl kan avge ljus efter excitation

Question 2

Vad är en fluorofor?

Answer 2

Molekyl som kan absorbera ljus och sedan emittera det..

Question 3

Vad innebär fluorometri?

Answer 3

Att analysera och mäta fluoroscens

Question 4

Vad är Stoke’s shift?

Answer 4

Energiskillnaden mellan den exciterande och emitterande fotonen.
Energin är alltid lägre hos den emitterande fotonen jämfört med den exciterande

Question 5

Vilka andra sätt kan en molekyl exciteras?

Answer 5

Kemiluminescens
Bioluminescens
Fosforescens

Question 6

Vad är ett excitationsmaximum?

Answer 6

Den våglängd som mest effektivt ger fluorescens

Question 7

Vad är emissionsmaximum?

Answer 7

Den våglängd som emitteras med största sannolikhet av en flourofor

Question 8

På vilka olika sätt kan det uppstå fluorescens hos en molekyl?

Answer 8

Fluorofor: själva molekylen kan fluorescera
Fluorescent sond/probe: Fluorofor designad att binda till viss struktur eller reagera på viss stimuli
Fluorescentmärkta antikroppar: Fluorofor kopplad till antikropp

Question 9

Vad behövs för att mäta fluorescens?

Answer 9

Ljuskälla
Filter för att skilja våglängd på det exciterande ljuset
Filter för att skilja exciterande från emitterade fotoner (dikroisk spegel)
Detektionssystem

Question 10

Vad finns det för olika instrument för att mäta fluorescens?

Answer 10

Spektrofluorometer: Mäter på populationen av celler eller fluorescensen i en lösning
Flödescytometer: Mäter fluorescensen på varje cell i en population
Fluorescensmikroskop: Kan se fördelningen av fluorescens i en cell eller vävnad

Question 11

Vilka faktorer kan påverka fluorescensen?

Answer 11

pH
Mängden fluorofor
Ljusintensiteten vid excitation
Hur lång tid fluoroforen belyses
Bakgrundsfluorescens