fasicule Technique

Question 1

Quelle technique permet de séparer deux feuillets membranaires ?

Answer 1

La cryofracture

Question 2

Solution hypotonique

Answer 2

Solution de faible tonicité
Concentration en soluté est faible (concentration en sel < 0,6%
Il va y’a voir une entrée d’eau dans la cellule =la cellule va gonfler

Question 3

Solution isotonique

Answer 3

Concentration en soluté correspond à la concentration retrouvédans la cellule
Si la cellule est placé dans cette solution elle ne change pas de forme

Question 4

Solution hypertonique ? Comment on appelle le phénomène qui en découle ?

Answer 4

Concentration en soluté est élévé
La cellule va se contracté
= hémolyse

Question 5

Def osmolarité

Answer 5

Nombre de particules dissoutes par litre de solution

Question 6

Histologie ?

Answer 6

A /L’observation au microscope optique des structures cellulaires d’un tissu se fait sur des coupes histologiques fines que l’on réalise soit à partir d’un échantillon inclus dans de la paraffine soit à partir d’un échantillon congelé selon les étapes des protocoles suivants :

B/L’observation au microscope électronique à transmission (voir Microscropie électronique) des structures cellulaires d’un tissu se fait sur des coupes ultrafines obtenues selon le protocole suivant :

Question 7

Microscopie optique à transmission

Answer 7

Question 8

Microscopie à fluorescence

Answer 8

Question 9

Microscopie éléctronique à transmission

Answer 9

Question 10

Microscopie à balayage

Answer 10

Question 11

C’est quoi la limite de séparation ou pouvoir séparateur

Answer 11

Question 12

Tableau comparatif entre microscopie photonique et électronique à transmission

Answer 12

Question 13

Western Blot

Answer 13

Question 14

Immunofluorescence

Answer 14

Question 15

Comment séparer des organistes ?

Answer 15

Fractionnement cellulaire
Centrifugation sur gradient de densité

La force centrifuge appliquée à des particules en suspension dans un milieu liquide augmente leur vitesse de sédimentation. La vitesse de déplacement des particules dépend de leur taille, masse, densité et de leur forme. Dans des conditions données de centrifugation, pour une particule précise, cette vitesse est constante et la particule peut être caractérisées par son coefficient de sédimentation exprimé en unités Svedberg (S = 10-13 sec).
Les différences de coefficients de sédimentation entre les organites ou les macromolécules cellulaires de taille et/ou de densité différentes permettent leur séparation.

Question 16

Fractionnement cellulaire

Answer 16

Question 17

Centrifugation sur gradient de densité

Answer 17

Question 18

Culture cellulaire

Answer 18

La culture cellulaire est une technique utilisée pour faire croire en dehors de leur organisme d’origine des cellules non organisées en tissus mais capable de se diviser en conservant leur identité spécifiques d’origine (cellules nerveuses, musculaires, hépatique etc…). La culture cellulaire doit se faire dans une pièce de culture cellulaire et dans des conditions stériles. Les cellules se manipulent sous Poste de Sécurité Microbiologique (PSM) pour éviter les contaminations et sont cultivées dans un incubateur à une température de 37 °C et dans une atmosphère très humide à teneur en CO2 contrôlée, souvent 5 %.
On peut cultiver des cellules prélevées fraichement d’un organisme, on parle alors de culture primaire. Ces cellules ont un pouvoir de division limité et ne peuvent pas être maintenues en culture indéfiniment. On peut cultiver des cellules ayant un pouvoir de division illimité, on parle alors de culture de lignées cellulaires immortalisées (cellules cancéreuses, ou cellules saines rendues immortelles artificiellement).
On peut cultiver des cellules non adhérentes, en suspension dans leur milieu nutritif dans un flacon de culture ou des cellules adhérentes, sur des boites de culture en plastique (boite de Pétri) leur offrant des capacité d’adhérence, recouvertes de leur milieu nutritif.

Question 19

C’est quoi un isotope ?

Answer 19

LES ISOTOPES
Les isotopes sont des éléments atomiques ayant le même nombre atomique (même nombre de protons et d’électrons périphériques donc ayant les mêmes propriétés chimiques mais de masse différente.
L’hydrogène 11H, un proton, un électron : isotope le plus fréquent dit froid (stable).
Le deutérium 21H, un proton, un électron, 1 neutron: isotope lourd et stable.
Le tritium 31H, un proton, un électron, deux neutrons : isotope lourd et instable
Le tritium est dit radioactif. C’est un radioisotope c’est-à-dire qu’il se désintègre spontanément en émettant un rayonnement. Dans le cas du tritium, les neutrons se décomposent en émettant des particules b à basse énergie qui sont en fait des électrons.

Question 20

C’est quoi un précurseur ?

Answer 20

Un précurseur est une molécule qui entre spécifiquement dans la composition d’une macromolécule. Si dans cette molécule un ou plusieurs isotopes froids sont substitués par un ou plusieurs isotopes radioactifs, ces molécules sont appelées des précurseurs radioactifs. Ce sera par exemple l’uridine pour étudier l’ARN, la thymidine pour étudier l’ADN, un acide aminé pour étudier les protéines. Pour étudier la synthèse des acides nucléiques, le précurseur est un nucléoside qui peut entrer dans la cellule, il sera transformé en nucléosides triphosphates dans la cellule pour participer à la synthèse d’ARN ou d’ADN).
Des expériences identiques peuvent être réalisées avec des précurseurs lourds ou avec des précurseurs radioactifs, seule la détection de l’isotope sera différente :
Isotopes lourds : détection par centrifugation de densité ou de flottaison
Isotopes radioactifs : détection par autoradiographie ou avec un compteur à scintillation.

Question 21

C’est quoi le principe du marquage isotopique ?

Answer 21

PRINCIPE DU MARQUAGE ISOTOPIQUE
Le marquage isotopique repose sur le fait que la cellule ne distingue pas le précurseur radioactif du précurseur dit « froid ». Il suffira donc de donner le précurseur radioactif en excès par rapport au précurseur froid pour obtenir la synthèse de macromolécules marquées.
Si le marquage (temps d’incorporation) est court (pulse), cela permettra de connaître le lieu de synthèse d’une macromolécule.
Si le marquage est long, on aura alors le lieu de synthèse mais aussi le lieu de migration éventuel de la macromolécule marquée.
Si à un marquage court on fait succéder une chasse (c’est à dire qu’après le pulse, on fournit en excès du précurseur froid), on pourra suivre en fonction du temps des différents temps de chasse le déplacement de la macromolécule marquée depuis son lieu de synthèse vers son lieu d’activité.

Question 22

Dans un marquage isotopique comment détecte-on la radioactivité ?

Answer 22

Question 23

Histoautoradiographie

Answer 23

Question 24

Structure d’une mitochondries ?

Answer 24