extração de dna plasmidial Flashcards

1
Q

qual a importância de centrifugar os tubos mais de uma vez

A

é imporante para aumentar a quantidade de dna plasmidial na amostra, o que permite um melhor resultado na eletroforese

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2
Q

qual a função da glicose na extração de dna

A

elevar a pressão osmótica do meio extracelular para que a lise da parede plasmática ocorrra de maneira menos brusca

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3
Q

qual a importancia do TRIS

A

age como um agent tamponante que mantem o ph costante para que não haja desnaturação das proteínas

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4
Q

qual a importancia do EDTA

A

impede a degradação do dna por enzimas de degradação (DNAses) por se ligar aos cations bivalentes necessŕios pra sua ação

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5
Q

qual a importante da adição de NaOH

A

criar um meio alcalino para o rompimento celular e da dupla fita de dna

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6
Q

qual a importancia da adição da proteina SDS

A

age como um detergente desnaturando a membrana plasmatica e proteinas de degradação que indepndem de cations bivalentes

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7
Q

qual a importancia do acido acético

A

viabiliza a restauração do dna pois neutraliza o pH

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8
Q

qual a importancia do acetato de potassio

A

o acetato precipita o SDS e o debri celular (dna cromossomico)

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9
Q

qual a importancia do etanol

A

precipita os acidos nucleicos, separando-os das proteínas celulares

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10
Q

qual a importancia do etanol 70%

A

auxilia na remoção do excesso de sal e de SDS na solução

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11
Q

qual a importancia da agua bi-destilada

A

ressuspender o dna

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