Examen 2 Flashcards
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Quelles sont les trois étapes du cheminement diagnostique au laboratoire de microbiologie?
Étapes pré-analytique, analytique et post-analytique.
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Expliquez en quoi consiste l’étape pré-analytique
L’étape avant l’analyse des échantillons :
* Examen du médecin
* Collection du spécimen
* Fiche remplie et envoi de l’échantillon au laboratoire de micro
* Entrée des informations dans un “log book”
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Quels sont les 5 éléments important de l’étape pré-analytique?
- Diagnostic médical
- Prélèvement
- Transport
- Réception au laboratoire
- Critères de rejets
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Quels sont les principes généraux important lors de la collecte d’un échantillon pour diagnostic?
- Le prélévement doit être effectué au site approprié
- Il doit être fait à un timing approprié dans l’évolution de la maladie
- Une quantité suffisante doit être prélevée
- Privilégier les tissus et ponctions plutôt qu’écouvillons
- Avoir le bon instrument de collecte
- Milieu de transport adéquat
- Technique aseptique pour éviter contamination
- Identification du spécimen
- Transport au laboratoire
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez des exemples de tests effectués pendant l’étape analytique
- Examen direct
- Colorations
- Tests phénotypiques (enzymatiques, métaboliques)
- Milieux de culture/condition d’incubation/examen de colonies…
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez des exemples d’examens directs et coloration effectués
- Gram : bactéries
- KOH-calcofluor : fungi
- Ziehl-neelson : mycobactéries et actinomycètes
- Auramine : mycobactéries
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez les quatres principales utilités de l’examen direct
- Appréciation de la qualité du spécimen
- On peut effectuer un diagnostic préliminaire
- Démostration de la mobilité de certains microorganismes
- Comparateur au résultat de la culture
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez ces colorations
a) Gram (bactéries)
b) Calcofluore (fungi)
c) Encre de chine (fungi)
d) Ziehl-Neelson (mycobactéries)
e) Auramine (mycobactéries)
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Expliquez l’utilité des tests immunologiques en médecine?
L’utilisation des anticorps afin de reconnaitre des antigènes spécifiques est extrêmement utile, puisqu’on peut identifier des pathogènes spécifiquement en fonction des antigènes qui leurs sont associés.
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Comment fonctionne l’immunofluorescence?
C’est le couplage d’une substance fluorophore à un anticorps, qui s’active seulement lorsque l’anticorps se lie à son antigène. On peut ainsi identifier précisément si un organisme est présent dans l’échantillon.
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Comment les différentes flores normales peuvent influencer la collecte et l’interprétation des résultats de la culture bactérienne?
Une bonne compréhension des flores normales est importantes
Les flores normales sont souvent présentes dans les échantillons, en fonction de comment l’échantillon a été collecté
Certaines bactéries peuvent faire partie des flores normales et ne pas être prises en compte comme pathogènes.
Certains bactéries ne sont pas sensé être à l’endroit de la collecte, ce qui signifie qu’elle est probablement pathogène.
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez des m-o de la flore normale pour :
1. Flore cutanée
2. Flore digestive
- Staphylocoques, micrococcus, …
- Entérobactéries, enterococcus
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Qu’est-ce que la sérologie?
La détection d’anticorps dans le corps d’une personne.
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Quels anticorps pourraient être retrouvés par la sérologie et que réflètent-ils?
- IgM réflètent une exposition récente (détectable de façon transitoire)
- IgG réflètent une exposition moins récentes (>2 à 4 semaines)
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Quelles sont les utilités médicales de la sérologie?
Permettent le diagnostic de certaines infections difficilement détectables par cutlure ou autres modalités
Permettent de mesurer la réponse vaccinale
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez 1 exemple d’infection pouvant être détecté par sérologie pour chacune des catégories
1. Virus
2. Bactéries
3. Mycologie
4. Parasites
Virus : VIH, hépatites, EBC, CMV
Bactéries : syphilis, maladie de lyme, leptospirose, …
Mycologie : aspergillus, coccidioïdomycose
Parasites : toxoplasmose, cysticercose, tichinellose
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Que permettent de faire les tests antigéniques rapides?
Détecter un antigène d’intéret et sa présence active ou très récente
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Expliquez le fonctionnement des test antigéniques rapides
- L’échantillon est déposé sur la bandelette
- Des anticorps couplés avec un tag migrent capillairement avec l’écantillon
- Une ligne de test contenant des anticorps primaire permet la liaison des anticorps seulement s’ils sont liés avec l’antigène de la maladie
- Une ligne contrôle permet de s’assurer que les anticorps avec tag ont bien migré
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez les 8 étapes du cheminement habituel d’un spécimen au labo de microbiologie
- Réception
- Examen direct
- Ensemencement + incubation
- Postes de travail de lecture
- Évaluation des géloses et repiquage des pathogènes potentiels
- Identification d’un isolat
- Antibiogramme
- Validation et sortie du rapport
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez les cinq principales techniques d’identification bactérienne
- Tests biochimiques conventionnels
- Tests biochimiques en micropuits
- Automates d’identification biochimique
- Maldi-tof MS
- Techniques de biologie moléculaire
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez les avantages et inconvénients des tests biochimiques conventionnels?
Avantages :
* Tests rapides pour germes dont indentificaiton sommaire à l’espèce est validée (ex. E.coli)
* Utiles pour diriger utilisation d’autres méthodes
Inconvénients :
* Très lent, limité, manque important de discrimination, temps technique important, prend de l’espèce, coût élevé
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Expliquez les avantages et inconvénients des tests biochimiques en micro-puits (API, …)
Avantages: facile, peu de temps, entreposage prolongé, bon taux d’identification pour souches courantes
Inconvénients : lents, manque de discrimination, banque limité pour fastidieux/plus rares, erreurs d’identification fréquentes
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Nommez des exemples d’automates d’identification biochimique
Vitek2 et BD pheonix
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Avantages et inconvénients des automates?
Avantages : facile à utiliser, peu de temps technique, taux d’identification excellent pour souches habituelles, assez bon pour souches plus rare
Inconvénients: incubation de 16 à 24h, souches fastidieuses encore difficile à identifier
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Avantages et inconvénients du MALDI-TOF
Avantages : rapide, coût minime par isolat, pas besoin d’orientation préalable, reproductible et précis, …
Inconvénients : dispendieux à l’achat, entretien et calibration rigoureuse, perte d’expertise, plan de contingence complexe
Diagnostic de laboratoire en microbiologie
Qu’est-ce que le TAAN et nommez des exemples de TAAN.
Test d’amplification des acides nucléiques
* PCR
* NASBA, TMA, SDA, …