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Laboratoire Biologie Médicale > Examen 1 > Flashcards

Examen 1 Flashcards

1
Q

Pourquoi faut-il faire des duplicata?

A

Afin d’évaluer le coefficient de variation, avoir une précision

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Q

À quoi sert une courbe standard?

A

Permet de prédire la concentration du produit dans un échantillon

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3
Q

À quoi sert le coefficient de variation?

A

Sert à comparer le degré de variation d’un échantillon à un autre (le coefficient de variation devient une mesure importante de la fiabilité)

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4
Q

Quelle est l’équation du CV%?

A

CV = s / x (avec barre) x 100%

où s représente l’écart-type de l’échantillon et, x (avec barre) la moyenne de l’échantillon.

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5
Q

Comment faire une courbe standard et pourquoi?

A

Il faut préparer un ensemble de solutions standards avec des concentrations connues de produits afin de faire un lien avec l’absorbance et la concentration.

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6
Q

Qu’est-ce que le bleu de Méthylène? À quoi sert-il dans le labo 2?

A

Chlorure de méthylthioninium

Est un colorant qui peut être bleu (état oxydé) ou incolore (état réduit) tout dépend de son état rédox.

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7
Q

Qu’est-ce que le PBS?

A

Le tampon phosphate salin (PBS)

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8
Q

Quelle pipette utilise-t-on pour un volume qui n’a pas besoin de précision?

A

Pipette Pasteur et une poire

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9
Q

Pourquoi faire des dosages?

A

Afin de mesurer plusieurs composés présent dans le sang, l’urine ou la salive et de mesurer son état de santé.

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10
Q

À quoi sert le dosage du glucose sanguin?

A

Permet de déterminer la glycémie et de diagnostiquer certaines maladies comme le diabète.

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11
Q

Quelle est la fonction principale de l’insuline?

A

Permettre au glucose de pénétrer dans les tissus et les cellules du corps

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12
Q

Quelles sont les valeurs d’une glycémie à jeun normal?

A

Entre 0,74 g/l et 1,06 g/l (4,04 et 5,83 mmol/l)

Moyenne de 0,83 g/l (4,565 mmol/l)

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13
Q

Comment appelle-t-on la mesure du glucose dans l’urine?

A

Glycosurie

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14
Q

Qu’est-ce que l’activité de l’hexokinase?

A

L’utilisation d’une enzyme cytosolique qui transforme le glucose + ATP en G6P + ADP

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15
Q

À quel absorbance maximal le NADH absorbe la lumière UV?

A

340 nm

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16
Q

Qu’est-ce que la protéinurie?

A

La présence de protéines, habituellement de l’albumine, dans l’urine

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17
Q

Qu’est-ce que l’albumine?

A

Une protéine dans le sang la plus abondante (60%). Protéine soluble fabriqué par les hépatocytes. (On en retrouve aussi dans l’alimentation)

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18
Q

Trop de protéines dans l’urine indique quoi?

A

1- Un trouble potentiel au niveau du rein

2- Des troubles cardiovasculaires

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19
Q

Que faut-il prendre en compte dans le dosage des protéines?

A

Le volume sanguin de la personne

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20
Q

Quelle technique est utilisée pour l’analyse des protéines?

A

Électrophorèse

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21
Q

Qu’est-ce que le RIPA?

A

Un tampon dénaturant puissant qui permet d’extraire des protéines de la membrane, du noyau et du cytoplasme à cause du changement de pH.

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22
Q

Que contient le RIPA?

A

1- Tris-HCl ou phosphate de sodium
2- NaCl pour maintenir la pression osmotique près de la physiologique
3- SDS (détergent tensioactif ionique fort)
4- Sodium deoxycholate
5- NP-40 ou Triton X-100

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23
Q

Qu’est-ce que la méthode Folin-Lowry?

A

Une méthode de dosage colorimétrique des protéines en combinant deux réactions chimiques

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24
Q

Quelles sont les inconvénients de la méthode Folin-Lowry?

A

La méthode de Lowry n’est pas totalement fiable à cause des interférences possibles dues aux réactifs. De plus, elle nécessite un certain temps de mise en œuvre. La gamme étalon nécessaire à la détermination de la concentration d’une solution inconnue est délicate à réaliser.

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25
Q

La méthode utilisée en laboratoire pour mesurer la quantité de protéines existantes?

A

Folin-Lowry modifiée — The Bio-Rad DC Protein Assay

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26
Q

Qu’est-ce que la technique de Folin-Lowry modifiée? (quand on utilise le kit DC…)

A

Un dosage colorimétrique de la concentration en protéines après solubilisation dans un détergent

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27
Q

Pourquoi utilise-t-on plus la méthode Bio-Rad DC Protein Assay (Folin-Lowry modifiée) au lieu de Folin-Lowry?

A

Car la réaction atteint 95 % de son développement de couleur maximum en 15 minutes, économisant ainsi un temps précieux, et la couleur ne change pas plus de 5 % en 1 heure ou 10% en 2 heures après l’ajout des réactifs.

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28
Q

Quels acides aminés, lorsqu’ils sont exposés à le phosphomolybdate et le phosphotungstate, provoquent le développement de couleur?

A

Les acides aminés tyrosine (Y) et tryptophane (W)

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29
Q

Quelle est la longueur d’onde à la quel le bleu de Méthylène absorbe (pas mal) de lumière?

A

625 nm

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30
Q

Pourquoi il est important de mettre les échantillons de cellules/prots dans de la glace?

A

Car ils ont une meilleure durée de conservation à une température 4 degrés. La glace fixe leur état, pour qu’on ait une Rx, juste quand on ajoute des produits, pas entre temps (Température pièce plus propice aux Rx spontanés que la glace!)

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31
Q

Pourquoi est-il important de mettre des gants?

A

Car la présence d’une ou plusieurs substances modifiera la réponse de la protéine aux réactifs de dosage

Ex: Protéase sur la peau

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32
Q

Que représente le Réactif A dans le kit DC Protein Assay de Biorad?

A

Une solution alcaline de tartrate de cuivre

33
Q

Que représente le Réactif B dans le kit DC Protein Assay de Biorad?

A

Un réactif de Folin-Ciocalteu, constitué principalement de phosphomolybdate de sodium et de phosphotungstate de sodium (acide chlorhydrique, acide phosphorique)

34
Q

Que représente le Réactif S dans le kit DC Protein Assay de Biorad?

A

Tensioactif est un détergent qui utilise du SDS ayant un agent moussant

35
Q

Pourquoi le Réactif B est dans du papier d’aluminium?

A

Car il doit être conservé à l’abri de la lumière directe du soleil à température ambiante (25-30 °C)

36
Q

Pourquoi faut-il travailler près de la flamme?

A

Car moins de contamination. Zone stérile

37
Q

À quoi sert le coefficient d’extinction molaire?

A

Caractérise les capacités d’une solution à absorber la lumière.

38
Q

Qu’est-ce que la MCF-7 (cellule A )?

A

Le nom de la lignée de cellules tumorales mammaires

39
Q

Qu’est-ce que la MDA-MB-231 (cellule B) ?

A

Une lignée cellulaire de cancer du sein

40
Q

L’intensité du bleu (de tungstène) est proportionnelle à :

A

la concentration protéique de l’échantillon choisi

41
Q

Pourquoi le nom MCF-7?

A

Michigan Cancer Foundation - 7, en référence à l’institut de Detroit où la lignée fut établie -au septième essai

42
Q

Où les cellules MCF-7 et MDA-MB-231 sont-elles prélevées?

A

En culture in vitro à partir d’un épanchement pleural (l’accumulation anormale de liquide dans la cavité pleurale)

43
Q

Les ions de cuivre se lient où à la protéine?

A

À 4 N par liaisons covalentes (PAS SUR)

44
Q

Comment calculer le coefficient d’extinction molaire (absorptivité molaire)?

A

ε(λ) = A(λ) / (L x C)

A=Absorbance
L= L’épaisseur de solution traversée par la lumière
C= Concentration de la solution

45
Q

Pourquoi utiliser une urine fraiche?

A

Car à longue durée, amène des changements biochimiques et micro-biologiques (Bactéries peut manger le glucose)

46
Q

Qu’est-ce qui crée la coloration de la bandelette test ?

A

Deux réactions:
1- Glucose-oxydase catalyse l’oxydation du glucose en peroxyde d’hydrogène et en acide gluconique.
2- Peroxydase catalyse l’oxydation d’un chromogène (iodure de potassium) par le peroxyde d’hydrogène avec une couleur violacée/brunâtre.

47
Q

Une quantité de NADH est proportionnelle à:

A

La quantité initiale de glucose

48
Q

Que contient le PBS?

A

1- NaCl
2- KCl
3- Na2HPO
4- KH2PO4

49
Q

Qu’est-ce que le ppm?

A

Partie par millions (1 mg / 1 L )

50
Q

Quel volume par puits dans la microplaque?

A

Environ 300 ul

51
Q

Pourquoi le NADH absorbe la lumière UV?

A

Car possède une adénine contenant des cycles à liaisons doubles.

52
Q

Qu’est-ce que l’AMFO?

A

Une mousse antibactérienne

53
Q

Qu’est-ce que l’ERα+ ou ERα- ?

A

Contient des récepteurs pour l’hormone d’oestrogène Récepteurs d’oestrogène

  • plus : se traite avec l’hormone d’oestrogène
  • moins : ne se traite pas
54
Q

Qu’est-ce qu’une solution mère?

A

Une solution extrêmement concentrée

55
Q

Pourquoi avons-nous de la protéase sur la peau?

A

Afin d’aider les nutriments à passer par la peau.

56
Q

Qu’est-ce que le bec bunsen?

A

Un appareil de laboratoire destiné à produire une flamme ouverte avec du gaz combustible afin de chauffer et/ou de stériliser

57
Q

À quoi sert le PBS?

A

1- La [] des ces sels dans le PBS sont généralement égale à celle du corps
2- Sert surtout à rincer les cellules pour enlever toute trace de milieu
3- Peut être utilisé comme diluant
pour assurer le stockage à sec des biomolécules
4- Empêche la dénaturation
5- Peut servir de valeur (spectre) de référence

58
Q

Quelle est la différence entre le coefficient de variation et l’écart type?

A

Coefficient de variation : Comparaison entre les échantillons
Écart type : Comparer avec son même échantillon (duplicateur)

59
Q

Quand changeons-nous pas l’embout?

A

Quand on a la même solution de même concentration et qu’il a pas de liquide restant dans la micropipette.

60
Q

Quand le bleu de Méthylène est en contact avec le glucose ça devient quelle couleur?

A

Incolore, car le bleu va être réduit par le glucose (forme réduite) (Gagne un électron)

61
Q

Autre qu’un colorant, qu’est-ce que le bleu de méthylène?

A

Un antiseptique, un antioxydant et parfois un antidote ( intox nitrates, nitrites et chlorates)

62
Q

Qu’est-ce que la solution Stock?

A

Solution très concentration prête à être diluée, car utilisé souvent (éviter d’en refaire)

63
Q

À quoi sert le blanc dans une microplaque?

A

Sert de valeur de référence (on fait une blanc par chaque substance à analyser)

64
Q

Le b de l’équation représente quoi?

A

L’absorbance du blanc (conc.=0 (la plupart du temps) mais peut aussi contenir des petites qu. de la substance à analyser.

65
Q

Qu’est-ce que le coefficient d’extinction milimolaire?

A

Caractérise les capacités d’une solution à absorber la lumière.

66
Q

Quoi le symbole du coefficient de corrélation?

A

R (racine carré du coefficient de détermination)

67
Q

Quand utiliser la pipette graduée et pompe à crémaillère?

A

Pour avoir des plus grands volumes tout en étant plus précis qu’avec la Pasteur

68
Q

Quel est le problème de santé relié à l’hyperglycémie?

A

Diabète

69
Q

Quelles sont les problèmes de santés réliés à l’hypoglycémie?

A

1- Maladies endocriniennes
2- Anorexie/malnutrition
3- Insuffance surrénalienne et hypophysaire
4- Métastases hépatiques

70
Q

Quels sont les deux types de réactions dans la réaction basée sur l’activité hexokinase selon la commission des enzymes (biochimie)?

A

1- Phosphotransférase

2- Oxydoréductase

71
Q

Quel est le type de diabète quand il y a une absence d’insuline?

A

Type 1

72
Q

Quel est le type de diabète quand il y a un mauvais fonctionnement de l’insuline?

A

Type 2

73
Q

Quelle est la différence entre le vortex et spin down (centrifugation rapide)?

A

Le vortex est mélangé et le spin down est de séparer les composantes.

74
Q

Pourquoi laisser la plaque à une température pièce pendant 15 minutes?

A

Afin de laisser le réactif réagir

75
Q

À quelle concentration de protéine dans l’urine devient un problème de santé?

A

Supérieur à 50 mg/L

76
Q

À quoi sert la protéine albumine?

A

1- Transporte des substances comme des hormones

2- Maintient la pression oncotique (la pression osmotique qui attire l’eau en direction des protéines) du sang

77
Q

Pourquoi faut-il mélanger le réactif A et S en premier dans le laboratoire 4?

A

Afin de faciliter les liaisons du Cu2+ plus tard

78
Q

Quel est l’utilité des types de cellules?

A

Comparer avec d’autres cellules pour des traitements médicaux

Laboratoire Biologie Médicale (2 decks)

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