enzymen uit de recombinant DNA technologie Flashcards
Endonucleasen
Enzymen die in het midden van de streng knippen.
SAM
S-adenosyl methionine
Chimere constructie
DNA van verschillende oorsprong door compatibele eindjes combineren. De stukken DNA worden met behulp van DNA ligase covalent gebonden met een fosfodiësterbinding.
Restrictie-map
Een schematische voorstelling die de knipplaatsen van de verschillende enzymen weergeeft en de afstanden tussen deze knipplaatsen.
CRISPR
Cluster regularly interspaced short palindromic repeats.
Cas
CRISPR associated protein(s)
RGEN
RNA-guided endonucleases
Knock-out
Op internet: een gen uitschakelen of elimineren.
Tijdens de les opgeschreven: genen die niet meer werken worden vervangen met een werkend gen.
Knock-in
Op internet: invoegen, vervangen of aanpassen van een specifieke genetische sequentie in een gen.
Tijdens de les opgeschreven: het gen werkt nog wel, maar wordt vervangen door een ander gen.
crRNA
=CRISPR-RNA. Herkent een complementair stuk van 20 nt in het target DNA. In een ander gedeelte is het complementair aan tracr-RNA.
tracr-RNA
=trans-activating RNA. RNA dat zorgt dat cas 9 aanhecht aan de streng.
sgRNA
Single guide RNA.
Protospacer
Stuk van 20 nt dat herkend wordt door crRNA.
PAM
= protospacer adjecent motif. Motief van 3 nt lang (NGG).
DSB
dubbelstrengige breuk.
Lipofectie
Biotechnologische techniek waarbij lipiden gebruikt worden om genetisch materiaal in de cellen te brengen. Liposomen versmelt met het membraan van de cel, waardoor de inhoudt van het liposoom vrijkomt.
Elektroporatie
Techniek waarbij er een voltagepuls door de cellen worden gebracht, waardoor er tijdelijk porïen in het membraan ontstaan.