ELISA Flashcards
metodologia se baseia em reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações enzimáticas.
Quais são os modelos:
Indireto, sanduíche e competitivo.
Quais são os materiais?
Placa de polixireno, pipetas automáticas, amostras de antígeno e anticorpo, enzima de identificação e espectofotrometro.
Processos: Sensibilização e lavagens.
ELISA INDIRETO
Antígeno fica aderido a microplaca, colocamos o soro do paciente, pra resposta positiva, anticorpos específicos se ligam aos antígenos na fase solida.
Na segunda etapa, joga um anticorpo específico que se liga as imunoglobulinas da espécie, ligado a peroxidase, formando um conjugado. Aonde houve uma ligação terá alteração de cor.
ELISA SANDUÍCHE é utilizado pra que?
Proteínas séricas, hormônios, marcadores tumorais e antígenos patógenos.
ELISA SANDUÍCHE como funciona
Reveste a placa com o anticorpo primário fornecido pelo laboratório. Específico para determinado epítomo ou m.o que se deseja detectar. Depois faz uma lavagem com solução tampão pra retirar todo anticorpo que não ficou retido. Solução teste (paciente) é adicionado na placa. Lava novamente a placa. Depois disso um segundo anticorpo se liga, mas esse está conjugado com uma enzima. Outra lavagem é feita.
ELISA COMPETITIVO
Antígeno marcado, pra competir com o da amostra. Na placa vai anticorpo de captura, e depois antígenos. Feita a lavagem para retirada. Quanto menos alvo é negativo, se tiver muito alvo é positivo. Oposto, cor forte positiva e fraca negativo.
