Electroforesis

Question 1

Objetivo de la electroforesis

Answer 1

Analizar el o los fragmentos de pares de bases nitrogenadas

Question 2

En la electroforesis con geles de agarosa y poliacrilamina que sucede

Answer 2

Se separan los fragmentos dependiendo del tamaño y se los puede visualizar con una tinción. Se analiza el CONTENIDO de los ácidos nucleicos.

Question 3

Principio en el que se baja la electroforesis de ácidos nucleicos

Answer 3

Combinación de fuerzas eléctricas y fricción permite el desplazamiento y separación de fragmentos dependiendo del tamaño o topografía.

Question 4

Ácidos nucleicos expuestos a un campo eléctrico, el ADN y ARN tienen carga neta negativa

Answer 4

Los ácidos nucleicos se van a mover al ánodo en una malla tridimensional de agarosa, donde se mueven rápido moléculas pequeñas y se mueven lento las moléculas más grandes

Question 5

Rango de tamaños en agarosa y rangos de concentración

Answer 5

Se separan moléculas de 50pb a 40kb. Estos rangos son ideales para analizar el producto de enzimas de restricción. La concentración de agarosa varía entre 0.3 -2 p/v.

Question 6

La concentración de agarosa

Answer 6

Mientras más baja sea la concentración, mayor es el tamaño de las moléculas que pueden separarse

Question 7

Con que técnica se puede combinar el gel de agarosa

Answer 7

Southern blot

Question 8

Campo eléctrico uniforme y constante

Answer 8

Gel de agarosa que corre en la cámara de forma horizontal

Question 9

Agarosa

Answer 9

Polímero compuesto de D-galactosa y 3,6-anhidro-L-galactosa. Unido por enlaces glucosídicos

Question 10

Reactivos

Answer 10

• Muestra de ADN
• Amplicones
• Productos de digestión de enzimas
• Escaleras moleculares -> Gene ruler
• Buffer de electroforesis -> TBE 1X
  -Buffer de carga
• Pocillo de gel
  Solución de teñido de bromuro de etidio o sus homologos (SYBR safe, gold, gel stain)