DNA recombinante

Question 1

DNA cromosomico

Answer 1

Escencial para la bacteria

Question 2

DNA plasmido

Answer 2

• Si se puede quitar a la bacteria ye lla seguira viviendo.
• No es escencial y da caracteristicas a las bacterias

Question 3

¿Que es el DNA recombinante?

Answer 3

Molecula de doble cadena que abarca dos tipos de DNA de origen diferente

Question 4

Plasmido +gen=

Answer 4

DNA recombinante

Question 5

¿Cuales son los 2 tipos de DNA que tiene una bacteria?

Answer 5

• Cromosomico
• Plasmido

Question 6

Primer paso en las etapas de la ingenieria genetica

Answer 6

Se localiza el gen que se desea transferir

Question 7

Paso 2 de etapas de la ingeneria genetica

Answer 7

Se aisla el gen utilizando enzimas que cortan el DNA

Question 8

Paso 3 de etapas de la ingeneria genetica

Answer 8

Se inserta el gen en otro segmento del DNA (plasmido)

ADN recombiannte con ayuda de una ligasa

Question 9

Paso 4 etapas de la ingeneria genetica

Answer 9

Se introduce el DNA recombinante en la celula que se quiere multiplicar

Question 10

Paso 5 etapas de la ingenieria genetica

Answer 10

Confirmar que la celula huesped tiene las propiedades del DNA transferido.

Question 11

Paso 6 etapas de la ingenieria genetica

Answer 11

Se clona el gen dejando que se multipliquen las celulas

Question 12

¿De donde provienen las enzimas de restriccion?

Answer 12

De las bacterias

Question 13

Caracteristicas de las enzimas de restriccion

Answer 13

• Son endonucleasas (Cortan en medio de la cadena)
• Son un mecanismo de defensa de las bacterias frente la entrada de DNA foraneo

Question 14

¿Que ocurre despues de que las enzimas de restriccion detectan DNA extraño?

Answer 14

• Detectan el DNA extraño
• Lo identifican,lo cortan
• Lo agregan al DNA cromosomico

Question 15

¿A quien degradan las enzimas de restriccion?

Answer 15

Al DNA extraño

Question 16

¿Como se nombran las enzimas de restriccion?

Answer 16

• 1er letra: género de la bacteria
• 2a y 3a letra: especie de la bacteria
• última letra: cepa
• número romano: # de acuerdo a su cronologia (descubrimiento

Question 17

Enzimas del sitema de modificacion

Answer 17

Metilasas : modifica el DNA propio para que no sea degradado

Metilacion en residuos de Adenina o Citosina cada bacteria reconoce a una secuencia determinada

Question 18

El DNA metilado es ____, si no seria _____

Answer 18

El DNA metiladoes inmune ,si no seria degradado

Question 19

Tipos de enzimas de restriccion

Answer 19

• I
• II
• III
• IV

Question 20

Enzima de restriccion
Tipo1

Answer 20

• Asimetrico
• El sitio de corte es lejos del sitio de reconocimiento (1000 pares de bases)
• El sitio de corte es aleatorio,rio abajo o rio arriba

Question 21

Enzima de restriccion
tipo2

Answer 21

• Reconocen secuencias palindromicas
• El sitio de reconocimeinto es igual al sitio de corte
• Es el mas especifico
• Con esta enzima se corta el DNA

Question 22

Enzima de restriccion Tipo 3

Answer 22

• Asimetrico
• Corte asimetrico
• Corte lejos de la secuencia de reconocimiento( 20 a 30 pares de bases)

Question 23

Enzima de restriccion Tipo IV

Answer 23

• Reconoce DNA metilado
• Corta el DNA metilado

Question 24

¿Que son las secuencias palindromicas?

Answer 24

Son las secuencias que se leen igual de derecha a izquierda y de izquierda a derecha

Question 25

¿Donde hace el corte la enzima tipo II?

Answer 25

En la **secuencia palindromica**

Question 26

Tipos de cortes

Answer 26

* **Cohesivos** :quedan pares de bases libres (cortes en diferente posicion) 3 a 5 nucleotidos de diferencia * **Romos**: Simetricos en ambas cadenas (parejito)

Question 27

**V/F** El DNA y el plasmido se debe cortar con la misma enzima de restriccion

Answer 27

**Verdadero**

Question 28

¿Quien va a unir los fragmentos del DNA eucariota y plasmido?

Answer 28

La **ligasa** une los fragmentos y ya queda el *DNA recombinante*

Question 29

¿Que es un *vector*?

Answer 29

Es una molecula de DNA de doble cadena que puede albergar un fragmento extraño o externo(*plasmido*)

Question 30

Tipos de vectores

Answer 30

* Clonacion * Expresion

Question 31

Vector de **clonacion**

Answer 31

**La bacteria se va a replicar** * Almacenar secuencias * Obtener grandes cantidades de DNA

Question 32

¿Cuales son los tipos de vectores que pueden hacer clonacion?

Answer 32

* Plasmidos * Bacteriofagos * Fagemidos * Cosmidos

Question 33

Vector de expresion

Answer 33

Produce un transcrito o proteina

Question 34

¿Cuales son los tipos de vectores que pueden hacer expresion?

Answer 34

* Plasmidos * Bacteriofagos

Question 35

¿Que tienen que tener el vector (plasmido) par que inicie la **clonacion**?

Answer 35

* **Origen de replicacion** (donde se separan las hebras para que se empiece a copiar) * **Sitio multiple de clonacion** (se encuentran las secuencias palindromicas para que lo pueda cortar la enzima y tambien ahi va insertado el gen) * **Marcador de seleccion**(Selecciona a las bacterias que tienen el plasmido) -Resistencia antibioticos - Proteina verde fluorescente - Enzima para que crezca mas la bacteria

Question 36

¿Que tiene que tener el vector(plasmido) para iniciar la **expresion**?

Answer 36

* **Sitio de origen** (Sitio Ori) * **Promotor** * Como es bacteria no tiene caperuza pero si tiene **sitio de union a ribosoma** * **Sitio multiple de clonacion** * **Cola de Poli A** * **Marcaje de seleccion**

Question 37

¿Como son los vectores **bacteriofagos**?

Answer 37

* Son virus que infectan a las bacterias * Se modifican geneticamente * Eliminan genes que no se requieren para la replicacion y el empaquetamiento.

Question 38

¿Como es el gen que alberga el plasmido?

Answer 38

**Pequeño** por que el lasmid lo es ; en cambio el del bacteriofago es largo

Question 39

**V/F** Lambda es un bacteriofago

Answer 39

**Verdadero**

Question 40

Vectores cosmidos

Answer 40

**Mezcla entre plasmidos y bacteriofagos** * Vectores hibridos * El plasmido se modifica para arrancar gen mas grande y se le pone **sitio cos** region que viene de un bacteriofago

Question 41

¿Para que sirve el **sitio Cos**

Answer 41

Permite que se empaquete el DNA y se pueda poner en el bacteriofago *Esto es para albergar mas pedazos de DNAmas grandes*

Question 42

¿Como son los vectores **Fagémidos?

Answer 42

* Plasmido al que se le incorpora el origen de replicacion de un fago * No tiene sitios cos * Son lineales

Question 43

¿Cuales son los tipos de vectores de **cromosomas artificiales**?

Answer 43

* **BAC **(bacterias) * **YAC** (levaduras)

Question 44

**V/F** Los plasmidos tienen sitio Ori y los bacteriofagos sitio Cos

Answer 44

**Verdadero**

Question 45

DNA recombinante se corta ….

Answer 45

Cohesivo