Cytometrie

Question 1

Qu’est ce que la cytometrie ?

Answer 1

• Technologie qui permet la mesure simultanée de plusieurs caractéristiques physique
• analyse multiparametrique

Question 2

Quelles sont les principes de la CMF?

Answer 2

• Travail sur cellule isolé entraîné par un flux laminaire qui permet la caractérisation individuelle grâce à l’allignement de chaque événement par système de pression
• focalisation selon l’intensité de lumière on obtient la taille FSC. Les micro granules vont diffracter le rayon qui permet d’obtenir la complexité=SSC

Question 3

Sur quelles tissus peut on faire une analyse au CMF?

Answer 3

• tissus circulants: déjà en suspension
• tissus cellule cohésive: nécessite dissociation tissus mécanique et enzymatique
• cellule en suspension: en suspension
• cellules adhérentes: à décoller de manière enzymatique ou par grattage

Question 4

Combien de cellules faut il au minimum pour la CMF?

Answer 4

5 x 10^4 a 10^7

Question 5

Quelles sont les deux types de sources lumineuse ?

Answer 5

• laser
• lampe au mercure ou xenon

Question 6

A quoi correspond FSC?

Answer 6

• taille
• petite angles <12

Question 7

A quoi correspond SSC?

Answer 7

• Grands angles
• 90
• complexité cellulaire

Question 8

Comment sont convertis les signaux ?

Answer 8

• Signaux lumineux converti en signaux électriques par les photomultiplicateurs (PMT)
• convertit en signal numérique

Question 9

Quels types dhistogramme peut on avoir?

Answer 9

• histogramme monoparametrique
• histogramme biparamétrique = cytogramme

Question 10

Que permet un CMF muni d’un trieur ?

Answer 10

Trier les cellules des la sortie

Question 11

Quels sont les avantages et limite du CMF?

Answer 11

• rapide
• multiparametrique
• quantitative et qualitative
• sensible
• Nécessite bcp de cellule

Question 12

Quelles cellules peut on analyser ?

Answer 12

• bactérie
• GR
• PLT

Question 13

Comment se fait la détection du signal?

Answer 13

Détection avec un filtre our une longueur d’onde

Question 14

Qu’est il nécessaire de faire pour la lecture du cytogramme?

Answer 14

Compensation de fluorescence avec la methodes des médianes

Question 15

Qu’est ce que l’apoptose ?

Answer 15

Déclenchement autodestruction en réponse à un signal. Mort programmé

Question 16

Quelles sont les différentes étapes de l’apoptose?

Answer 16

• phase d’induction
• phase effectrice
• phase destruction

Question 17

Comment fait on la détection du potentiel de membrane mitochondrial?

Answer 17

• charge négative qui rentre dans la cellule
• valinomycine crée canaux K a travers la membrane ce qui crée une perte de potentiel mesurable avec sonde JC1

Question 18

Quand le JC1 est vert ? Rouge ?

Answer 18

• ## monomère cellule en apoptose