Crecimiento y conteo microbiano Flashcards
Define crecimiento
Aumento de constituyentes celulares
Define cenocítico
Un microorganismo multinucleado en el que las divisiones nucleares no incluyen divisiones celulares.
-Incremento de tamaño no de número de células
¿Cuando es que podemos medir el crecimiento?
Cuando el microorganismo se divide por gemación o fisión binaria
¿Cómo se mide el crecimiento?
Observando los cambios en el número total de la población
Cultivo discontinuo o sistema cerrado
Normalmente es cuando se cultivan en un medio líquido. La cantidad de nutrientes es limitada y conforme pasa el tiempo este va disminuyendo y los residuos aumentan
¿Cómo se representa el crecimiento de un microorganismo que se multiplica por fisión binaria?
El logaritmo del número de células frente al tiempo de incubación
Fases de la curva de crecimiento
Fase de lactencia, fase exponencial, fase estacionaria, fase de muerte
Fase de lactencia
No hay división celular ni crecimiento neto de masa, la célula esta sintetizando nuevos componentes.
¿Por qué la célula pasa por un proceso de síntesis en la fase de lactencia?
-Si las celulas son viejas, estas deben sintetizar: ATP, cofactores esenciales y ribosomas antes de que inice el crecimiento
-Si es diferente el medio al anterior debe sintetizar nuevas enzimas para ese medio.
-Los microorganismos hayan sido alterados y necesitan un tiempo de recuperación
¿Cuánto dura la fase de lactencia?
Varía considerablemente dependiendo de la condición de los microorganismos y la naturaleza del medio
¿Cuál es el otro nombre de la fase exponencial?
Fase logarítmica
Define la fase exponencial
En donde los microorganismos crecen y se dividen al nivel máximo posible
Características de la fase logarítmica
-La velocidad de crecimiento es constante
-La curva de crecimiento aumenta suavemente
-La población es mas uniforma, química y fisiologicamente
¿Qué pasa en la fase estacionaria?
El crecimiento de la población cesa y la curva de crecimiento se vuelve horizontal.
¿A qué nivel de población llega para que comience la fase estacionaria?
Cuando el nivel de población es aproximadamente 10^9 celulas por mL
¿Cómo es el número total de microorganismos en la fase estacionaria?
Constante
Menciona las razones por las cuales los microorganismos pasan a una fase estacionaria
-Limitación de nutrientes
-Acumulación de productos residuales tóxicos
¿Cómo es normalmente la fase de muerte matemáticamente?
Logarítmica (una cantidad constante de células muere cada hora)
¿Qué se suele hacer para saber si una celula realmente murió?
Incubarla en un medio fresco
La población será de 2 células después de 20 minutos , de 4 células a los 40 minutos y así sucesivamente. ¿Ejemplo de qué es este patrón?
Tiempo de generación o de duplicación y es el tiempo en que una población duplica su tamaño.
El crecimiento microbiana ¿Qué incrementa?
Tanto masa como el número celular de la población
Para esta determinación de numero de células se usa una cámara de Petroff.-Hausser (bacterias) o hemocitómetros (eucariotas) donde en un porta-objetos con una rejilla grabada en el fondo de la cámara
Recuento directo
Inconvenientes del recuento directo
-La población microbiana debe ser grande
-Dificil o imposible distinguir entre células vivas o muertas
Contador coulter ¿Para qué sirve?
Permite el conteo de protozoos, algas y levaduras no filamentosas . En este una corriente eléctrica fluye atreves de un orificio donde esta la muestra y los electrodos a ambos lados de la muestra miden la resistencia electrica.
-Ofrece resultados precisos de células grandes
-Permite medir eritrocitos y leucocitos
-Contador de coulter, también llamado contadores electrónicos
¿Cómo se pueden medir las celulas viables?
A partir del número de colonias formadas y la dilución de la muestra
¿Cómo se suelen expresar los resultados de técnicas de siembra? ¿Por qué?
Como unidades formadoras de colonias debido a que no se está totalmente seguro de que cada colonia proceda de una célula original
¿Cuál es el rango viable que debe tener un muestra para conteo en placa?
Para algunos autores de 25 a 250 colonias y otros 30-300
¿Por qué se dice que la siembra en placa por extensión ofrece recuentos superiores que los de sembrado en profundidad?
Ya que el Agar usado en la siembra en profundidad está caliente y puede dañar o matar células sensibles
Método más directo para conocer la masa celular total
Por medio de la determinación de peso seco microbiano
¿En que consiste el método de peso seco y que se suele medir con este?
Se recogen las células de un medio líquido por centrifugación, se lavan, se secan en estufa y se pesan
Se usan para medir el crecimiento de hongos.
Ventaja y desventaja del método de peso seco
-Ventaja: medir el crecimiento de hongos
-Requiere mucho tiempo y no es muy sensible
Es una técnica sencilla y rápida y se relaciona con la luz. Cuál es y explica como se usa
Es la técnica que enseña como dispersar la luz que incide sobre células microbianas. Cuando se incrementa la población también se incremente la turbidez y con ello la luz transmitida a través del medio. Se usa el espectrofotómetro
¿Qué es necesario que tenga el medio para medir la turbidez?
Que la población sea lo suficientemente grande
¿Cómo se pueden dividir los métodos de detección microbiana?
Cualitativos y cuantitativos
Menciona los tipos de métodos de detección microbiana cuantitativa
Directos e indirectos
Es un método de detección microbiana cualitativa
Estriado en placa
Métodos directos
-Peso seco
-Conteo microscópico
-Conteo en placa
-Filtración por membrana
Métodos inditectos
-Turbidez
-Actividad metabólica
-Número más probable
-Componentes bioquímicos
Describe en qué consiste del número más probable
Se basa en la probabilidad de encontrar crecimiento bacteriano después del cultivo en medio líquido de diluciones sucesivas
¿Para qué es empleado el NMP? ¿Cual es su condicionante?
Su condicionante es que es conveniente para el recneto de número pequeño de microorganismos
Para microorganismos particulares o muy especificos
Medios sintéticos o definidos
Son medios relativamente sencillos, , los medios definidos se emplean frecuentemente en investigación, para conocer qué esta metabolizando el microorganismo
Medios complejos
Donde la composición química exacta no se conoce
-Se usa para microrganismos de los cuales no se conoce bien sus necesidad nutricionales
Tres medios complejos más comunes
-Caldo nutritivo
-Caldo de triptona y soja
-Agar Mac-Conkey
¿Qué y en qué cantidad se solidifica un medio?
Se usa Agar, y se usa entre el 1-2%, el agar proviene de algas rojas
Medios enriquecidos
Se les agrega otras sustancias para favorecer el crecimiento de heterótrofos exigentes
Medios selectivos
Favorecen el crecimiento de microorganismos especificos. Estos suelen inhibir el crecimiento de algunos microoganismos y favorecer el crecimiento de otros
Medios diferenciales
Son aquellos qe se diferencian entre gurpos distintos de bacterias e incluso permiten una identificación tentativa de los microorganismos según sus características biológicas
