cours 6 Flashcards
Schématiser un anticorps, identifier les chaînes lourdes/légères, les régions de reconnaissance d’épitopes et les régions variables/constantes
Correction diapo 3 PDF cours 6
Vrai/Faux : chaque antigène peut être reconnu par plusieurs anticorps, pourquoi?
Vrai, parce que chaque antigène a plusieurs épitopes qui peuvent être reconnus par plusieurs anticorps spécifiques
Nommer les trois types d’épitopes protéiques
1) Conformationnels
2) Linéaires
3) Néoantigéniques
Vrai/Faux : vu que les anticorps font partie de la réponse innée, il n’y a aucune adaptation lors d’expositions multiples
Faux, on peut avoir entre autres augmentation de la quantité d’anticorps produits, changements d’isotypes et augmentation de l’affinité des anticorps produits.
Décrire la méthode de production d’anticorps polyclonaux
1) Injection d’un antigène dans un animal (ex. lapin, chèvre, poulet, mouton, lama, etc.)
2) Activation de la réponse immunitaire de l’animal, notamment lymphos B
3) Production d’anticorps polyclonaux par lymphos B de l’animal
4) Prélèvement du sérum de l’animal pour récolter les anticorps
Décrire la méthode de production d’anticorps monoclonaux
1) Exposition répétées d’un animal à l’antigène cible pour augmenter affinité et quantité d’anticorps spécifiques
2) Récolte de la rate de la souris pour prélever lymphos B
3) Fusion des cellules de la rate avec cellules myélomes (tumorales) pour immortaliser cellules productrices d’anticorps
4) Sélection des hybridomes (mélange myélomes et cellules de la rate) pour avoir ceux produisant anticorps désirés
5) Croissance massive in vitro ou in vivo
Vrai/Faux : un anticorps monoclonal est spécifique à un seul épitope
v
Qu’est-ce qu’un anticorps monoclonal chimérique?
Un anticorps qu’on a modifié pour que sa région variable soit d’une espèce animal et que sa région constante soit humaine.
Qu’est-ce qu’un anticorps humanisé
Un anticorps chimérique pour lequel on a retiré le plus de régions étrangères possibles tout en gardant la fonction de l’anticorps.
Vrai/Faux : plus un anticorps est humanisé, plus ses chances d’être attaqué par l’organisme dans lequel on l’injecte (immunogénicité) est faible
v
Décrire la fonction d’un anticorps secondaire
Reconnait des épitopes sur régions constantes d’un autre anticorps
Qu’est-ce qu’un anticorps anti-espèce?
Anticorps secondaire dont l’épitope est les anticorps d’une autre espèce
Nommer les 5 méthodes de détection de substances basées sur la spécificité des anticorps
1) ELISA
2) Immunobuvardage de type Western
3) Immunoprécipitation
4) Cytométrie en flux
5) Immunocytochimie/immunohistochimie
Caractériser la méthode ELISA, ses cibles, ses éléments essentiels, sa fonction et ses 4 sous-types
Détecte un antigène dans un format liquide
Essentiel : anticorps reconnaissant spécifiquement antigène désiré
Permet détection précise d’une substance de manière quantitative. Tient pas compte de la taille de la protéine
1) Directe : antigène reconnu directement par anticorps primaire marqué
2) Indirecte : antigène reconnu par anticorps primaire, lui-même reconnu par anticorps secondaire (ex. anti-espèce) marqué.
3) Sandwich : anticorps capturant lie l’antigène, puis l’anticorps primaire reconnait ledit antigène, et est à son tour reconnu par un anticorps secondaire marqué.
4) Compétitive : on met deux antigènes pour le même anticorps, mais seul l’un des deux déclenche le marquage.
Voir diapo 25 PDF cours 6 pour schémas
Qu’est-ce que la courbe étalon?
Courbe de concentration d’anticorps selon la concentration d’antigènes
Voir diapo 26 PDF cours 6 pour schéma
Caractériser la méthode d’immunobuvardage de type Western, ses cibles, ses éléments essentiels et sa fonction
Détection d’un antigène dans un lysat de cellules, d’organes ou dans un liquide par la dénaturation des protéines vers leur forme primaire (sur le gel polyacrylamide)
Essentiel : anticorps reconnaissant épitope linéaire
Permet discrimination de protéines ayant un épitope commun, mais de taille différente. Technique quantitative.
Caractériser la méthode d’immunoprécipitation, ses cibles, et sa fonction
Isolement d’une protéine à partir d’une solution liquide, puis précipitation du complexe anticorps-protéine pour identification
Caractériser la méthode de cytométrie en flux, ses cibles, ses éléments essentiels et sa fonction
Détection d’un antigène à l’aide d’anticorps fluorescents sur ou dans des cellules en suspension
Élément essentiel : anticorps reconnaissant épitopes conformationnels
Permet d’analyser simultanément de nombreux paramètres comme la surface intracellulaire, pH indicateur, influx de calcium, phagocytose de particules et molécules de signalisation phosphorylées. Méthode quantitative
Vrai/Faux : la technique de cytométrie en flux permet de déterminer la granularité des cellules, comment?
Vrai, en évaluant le degré de diffraction des rayons, une cellule hautement granulaire déviera plus de rayons qu’une cellule sans granules
Vrai/Faux : en plus de toutes leurs autres fonctions, les cytomètres peuvent aussi trier les cellules qui passent selon qu’elles soient positives ou négatives pour le marqueur détecté
v
Caractériser les méthodes d’immunocytochimie et immunohistochimie, leurs cibles et leur fonction
Détection colorimétrique (comme ELISA) ou par fluorescence (comme cytométrie)
ImmunoCYTO = détection d’antigène sur cellules
ImmunoHISTO = “ sur une coupe histologique
Permet de localiser les épitopes dans une cellule, un organelle ou un tissu
Compléter le tableau de comparaison des diapos 52 et 53
Correction diapos 42 et 43 PDF cours 6
Nommer les 4 plateformes classiques de vaccination
1) Virus complet inactivé
2) Virus vivant atténué
3) Sous-unité protéique virale
4) Particule imitatrice de virus
Voir diapo 44 PDF cours 6 pour schéma
Décrire les étapes de l’infection par SRAS-CoV2 (causant COVID19)
1) Virus entre dans corps et lie récepteur ACE2
2) Utilise machinerie cellulaire pour se répliquer
3) Virus est relâché et peut être phagocyté par cellules présentatrices d’antigènes
4) Présentation d’antigènes viraux au système immunitaire adaptatif (lymphos B et T)
5) Production de cellules B et T et d’anticorps
6) Élimination de l’infection
7) Mémoire immunologique
Voir diapo 45 PDF cours 6 pour schéma
