Cours 3 (Nutrition et croissance des microorg) Flashcards
Qu’est-ce que la croissance des microorganismes?
La croissance est définie par un accroissement du nombre de cellules ou de la masse cellulaire totale.
Chez la plupart des procaryotes, la croissance d’une cellule se poursuit jusqu’à quoi?
Jusqu’à sa division en deux nouvelles cellule par fission biniare (scissiparité)
Qu’est-ce que l’anneaux FtsZ?
Anneau qui sépare le la bactérie répliquée et la bactérie mère.
Par quoi est exprimmé la courbe de croissance d’une population bactérienne?
Log de 10 de la [concentration bactérienne] (bact/mL) en fonction du temps d’incubation (heures)
Quelles sont les 4 phases de croissance de la courbe de croissance ?
- latence
- expontentielle
- stationnaire
- mortalité
Qu’est-ce que la phase de latence ?
Première phase : il n’y a aucune division cellulaire. Il s’agit d’une phase d’adaptation.
Comment varie la durée la phase de latence?
- selon l’âge des bactéries
- de l’origine (composition, température du milieu)
Qu’est-ce que la phase de croissance exponentielle ?
2e phase de la croissance bactérienne. Accélération de la croissance des batéries ainsi que de la division cellulaire.
- Développement et divisent à vitesse maximale
- Population uniforme
- Courte durée
- Relation entre [Nutriment] et croissance
Qu’est-ce la phase Stationnaire ?
3e phase. Nombre total de microorganismes viables (reste constant). Équilibre entre division et mort cellulaire.
Cause :
- limitation des nutriments
- accumulation de déchet toxiques, acidité
Quelles sont les causes de la mort cellulaire durant la phase stationnaire?
Cause :
- limitation des nutriments
- accumulation de déchet toxiques, acidité
Qu’est-ce que la phase de mortalité ?
Dernière phase. Arrêt de la divison cellulaire. Nombre de bactéries viables ou cultivables diminue.
Quelles sont les causes des effets néfastes de la phase de mortalité?
Causes:
* Dommages irréparables conduisant à une perte de viabilité
* Réponse génétique déclenchée (Mort cellulaire programmée)
* Formation de cellules viables non cultivables (VNC) (dormance)
Quelles sont les méthodes directes de mesure de la croissance des microorganismes?
- Décompte total des microorgansimes (dépend de la taile)
- Hémocytomètre (chambre de comptage observée)
- Cellule de Petroff-Hausser (chambre de comptage observée)
- Compteur de cellules Coulter et Cytomètre de flux ( mycètes, et cells. mammifères)
Quels sont les avantages et incovénients des méthodes directes?
Avantages :
- faciles à utiliser, rapide , peu $
- information sur la taille/morphologies
Inconvénients :
- densité micro. élevée (petit volume)
- décompte des cellules mortes et vivantes
Quelle techniques de chambre de comptage observée (méthode directe) possède une dimensions + petite ? Hémocytomètre au Cellule de Petroff-Hausser ?
Cellule de Petroff-Hausser < Hémocytomètre (1/100000cm, 10x plus petit)
Qu’est-ce qu’un décompte des unités viables (capables de se reproduire)?
- méthode de dilution en milieu liquide et d’étalement sur gélose
- Méthode des filtres de cellulose
Quels sont les avantages et inconvénients du décompte des unités viables ?
Avantage : Les colonies proviennent seulement des cellules vivantes capables de se reproduire.
inc : Amas de cellules = 1 colonie
Comment appelle-t-on les unités sur la gélose formé par le décompte des unités viables ?
Unités Formant des Colonnies (UFC) entre 30-300 UFC
Cellules Viables Non Cultivables (VNC)
utilise des dilutions en série
Qu’est-ce que la méthode des filtres de cellulose?
L’échantillon est passé sur un filtre de cellulose dont la porosité retient les micro-organismes.
Que sont les méthodes indirectes de mesure de la croissance des microorgansimes ?
- mesure de l’activité
- Mesure de la masse cellulaire
Mesure de l’activité (mesure indirecte)
En mesurant la consommation de substrats (C, N2, O2 ou facteur spécifique de croissance) ou excrétion de certains produits (Co2 ou NH3). Permet d’évaluer [microbienne]
Mesure de la masse cellulaire (méthode indirecte)
poids sec
* Récolte des micro-organismes (filtration sur membrane)
* Lavage + dessiccation (100 à 110oC)
* Pesée (toutes les bactéries, mortes ou vivantes sont pesées)
* Valeurs exprimées en g/L
* Valeurs exprimées en cellules/ml (nécessite un décompte
* cellulaire avant de récolter les bactéries)
Qu’est-ce que la Turbidimétrie ?
Évaluation de la concentration cellulaire à l’aide de sa densité optique [D.O.] (absorption lumineuse) à une certaine longueur d’onde (Ex 600 nm)
Dans une certaine limite (106/ml < [ ] < 108/ml), la D.O. d’une suspension
microbienne est directement proportionnelle à sa concentration cellulaire
Comment peut-on évaluer la concentration microbienne d’une suspension inconnue?
préalablement établir à l’aide d’un spectrophotomètre une courbe de référence pour des concentrations microbiennes connues
Quelles sont les trois (3) expressions mathématique de la croissance bactérienne?
1 - temps de génération ou de doublement : g = t/n
2 - Taux de croissance (k) = nombre de générations par unité de temps :
k = n/t
3 - Nombre de générations (n)
n = (logNt-LogNo)/log2
Quels sont les avantages de la culture continue (ouvert) ?
- apport de nutriment
- élimination des déchets
- phase de croissance exponentielle (2e) est matenue sur une longue période
- concentration constante de biomase
Quels sont les deux (2) types de culture continue (ouvert)? Décrivez.
Chémostat et tubidostat
- Chémostat : apport constant de nutriments à la même vitesse que le milieu est éliminé
- Turbidostat : vitesse de dilution déterminée par la densité
Qu’est-ce qu’un milieux de culture?
Préparations utilisées pour réaliser la croissance, le transport ou la conservation des microorganismes.
- Leurs compositions varient à l’infini
- Doivent respecter les exigences nutritives des micro-organismes
- La composition précise d’un milieu de culture dépend de l’espèce à
cultiver
Quel est la différence entre les milieux de culture liquides et solides?
On ajoute de l’agar (Polysaccharide extrait d’une algue rouge et utilisé comme agent gélifiant (non métabolisé par les microorganismes). dans les milieux solides.
Les deux sont des bouillons de culture.
Quels sont les deux (2) types de milieux de culture ?
Classées selon la composition
- Synthétique ou empirique
Classés selon l’usage
- Sélectif ou différentiel (ou les deux)
Qu’est-ce que le type de milieu de culture Synthétique?
La composition chimique est entièrement connue.
Milieux pauvres permettent la croissance de seulement certains microorganismes (source de C, N, S, etc…)
Qu’est-ce que le type de milieux de culture empiriques ou complexes?
La composition chimique est indéterminée (peptone, extrait de levure).
Milieux riches permettent la croissance d’une grande variété de microorganismes.
Quels sont les types de culture selon l’usage ? (3)
- Milieux de base ou de propagation
- Milieux sélectifs
- Milieux différentiels