COURS 3

Question 1

nomme les inhibiteurs utilisés dans le traitement du cancer

Answer 1

methotrexate : inhibe la dihydrofolate reductase

5-fluorouracile : inhibe thimidilate synthase

Question 2

Nomme les inhibiteurs du ribosome bactérien (antibiotique)

Answer 2

néomycine et tetracycline

Question 3

lorsquon mesure lactivité enzymatique, combien on met de substrat

Answer 3

une concentration de substrat dépassant 10X le Km doit etre utilisée

Question 4

pourquoi la vitesse de la rx pendant la periode d’incubation doit etre linéaire

Answer 4

detecter convenablement la formation de produit de la rx

Question 5

stratégies pour éviter l’accumulation de produit et la retro-inhibition

Answer 5

analyser une rx sur une courte durée

hautes concentrations de substrat

utiliser des ph non physiologiques (si le produit est un proton, on met un ph basique pour l,éliminer)

Question 6

Qu’est ce qui peut influencer le Km et le Vmax (sauf les inhibiteurs)

Answer 6

Ph (exemple avec la phosphatase alcaline qui a un plus gros km à ph 10-11 qu’à pH 7)

Temperature (peut dénaturer l’enzyme et diminuer la rx)

force ionique (du tampon) (compétitionne avec le substrat pour atteindre l’enzyme)

Question 7

si on augmente la T de 10 degrés, qu’arrive-t-il a la vitesse de rx

Answer 7

augmente d’un facteur 2

Question 8

mesure de l’activité enzymatique par methode discontinue vs par methode continue

Answer 8

discontinue: on observe la rx seulement un certain moment et on arrête l’enzyme avec précipitation ou dénaturation thermique ou SDS ou une methode non dénaturante.

Continue: progrès de la rx observé pendant toute la rx au complet

Question 9

Quelles enzyme on peut mesurer l’activité par methode continue

Answer 9

déshydrogénase qui utilise NAD ou NADP
hydrolase (libere produit coloré ou fluorescent)
polymère endohydrolase (réduisent la viscosité du polymère)

Question 10

Pour mesurer le produit, on utilise deux techniques en particulier avec deux approches différentes c’Est quoi

Answer 10

spectophotométrie et fluorométrie
détection directe : produit de la rx absorbe la lumière (ex:NADH)
Détection indirecte : on ajoute un autre ezyme qui fait réagir le produit et le transforme en NADH par exemple stoechiometrique c’Est important ici

Question 11

comment on peut séparer les produits des réactifs pour pouvoir doser le produit?

Answer 11

chromato!