Cours 1 (toxicologie + étude de dose)

Question 1

C’est quoi les 3 types d’étude de dose

Answer 1

1- aigue : 1 jour
2- subchronique: 2 semaines- 3 mois
3- chronique: 6-9 mois

Question 2

Pourquoi on prend plus d’animaux chez les non-rongeurs pour les études de doses

Answer 2

Ils sont plus petits, peuvent mourir ou se blesser plus vite. On a des animaux de plus pour étude de PK

Question 3

C’est quoi le but des études de dose multiple

Answer 3

C’est de trouver NOAEL (dose où il n’y a pas d’effets adverses)

Question 4

Pour les courbes dose-réponse, quel est le meilleur scénario?

Answer 4

C’est d’avoir le meilleur effet thérapeutique maximale sans effets indésirables. Le médicament est optimal s’il a un plus grand espace entre la courbe d’effets thérapeutiques in vivo et la courbe d’effets secondaires/toxiques in vivo. Si les deux courbes se rapprochent, on va avoir une toxicité à effet thérapeutique maximale.

Question 5

Comment on choisi les doses à tester?

Answer 5

Le choix des doses est basé sur les résultats des études de DRF de 7 à 10 jours (souvent sans histopathologie ou limitée) . On a low/mid/high

1) dose élevée: dose maximale tolérée (MTD): on cherche pas une mortalité, on vx voir des effets adverses mais qu’ils soient tolérables
2) dose moyenne: certaine toxicité mais

Question 6

C’est quoi les 5 critères pour choisir la dose élevée (M3R2)

Answer 6

1) dose maximale tolérée (+ important) MTD : dose où la toxicité peux être observé, mais pas assez haute pour que l’interprétation des résultats est menacée par la morbidité ou la mortalité. Déterminé par des paramètres comme les signes cliniques,réduction ou gain de poids.
2) Dose limite : 1000 mg/kg/jour. Cependant, on peut aller jusqu’à 2000 mg/kg/jour si le 1000 mg/kg/jour c’est pas égale à 10x l’exposition clinique ciblée et la dose quotidienne du médicament est plus grande que 1g/ jour
3) Dose maximale basée sur la saturation de l’exposition : données toxicocinétiques indiquent que l’exposition limite l’exposition systémique du médicament. Il est acceptable d’utiliser la dose la plus faible qui atteint l’exposition maximale
4) Dose maximale possible (MFD) : très pertinent pour IV et intra nasale, doit justifier tous les efforts pour une meilleure formulation
5) Dose maximale basée sur une marge d’exposition de 50 fois: relative à l’exposition clinique maximale (AUC)

Question 7

Lors des études de toxicologie (ADME) , c’est quoi les raisons qui pourront expliquer une exposition non proportionnelle à la dose.

Answer 7

1) AUC AUGMENTÉ POINTS PLUS HAUT QUE LA COURBE NORMALE: élimination non linéaire. causé par un processus enzymatique saturable ou une élimination rénale saturable (TOXIQUE!!!!)
2) AUC DIMINUÉ POINTS PLUS BAS QUE LA COURBE NORMALE: absorption non linéaire. causé par un transport dans le GI qui est saturable ou médicament peu soluble

Question 8

Pour l’étude de toxicologie (ADME), si on désire voir la distribution ou l’élimination du médicament. Qu’est-ce qu’on fait?

Answer 8

On injecte un composé radioactif et on le sacrifie avec le temps et on regarde il va s’attaquer où

Question 9

C’est quoi le but de métabolisme dans le corps et qu’est ce qu’on regarde durant l’étude de toxicologie (ADME)

Answer 9

Le but du corps est de rendre le médicament le plus hydrosoluble possible afin de faciliter l’élimination. 2 réactions de manière séquentielle.

Question 10

C’est quelle étude qu’on effectue lors de toxicologie (ADME) et c’est quoi ces buts

Answer 10

1- Par quelle voie le médicament est éliminé (urine ou fèces)
2- Quels sont les métabolites majeurs du médicament ( + 10 %) et comment ils sont éliminés.

On fait le profil de radioactivité ans le plasma,urine,feces,, on met dans spectrométrie de masse et on px voir la structure et les fragments. Cependant, c’est un danger, ça rit induit une collision et beaucoup de déstruction et on ne retrouve plus le composé

Question 11

Lors de l’étude de toxicologie (poids et courbe de croissance). Une perte de poids à court terme signifie quoi?

Answer 11

• diminution d’appétit (anorexie)

- déshydratation ( diminution consommation d’eau et une diarhée)

Question 12

Lors de l’étude de toxicologie, (poids et courbe de croissance). Une diminution de poids à long terme signifie quoi?

Answer 12

• perte chronique d’appétit
• lipolyse
• perde de passe musculaire
• croissance retardé

Question 13

Pour les études de toxicologie, c’est quoi les éléments essentiels dans l’interprétation des courbes de poids

Answer 13

1) Comparer les poids d’animaux ayant le même condition d’alimentation
2) analyser les mâles et les femelles séparément
3) évaluer la corrélation avec les signes cliniques et la consommation alimentaire pour de2terminer l’origine du changement.

Question 14

C’est quoi la différence entre l’histopathologie ou examen ophtalmologique et l’ERG ou tonométrie quand on doit évaluer la toxicologie en préclinique

Answer 14

Histopathologie ou l’examen ophtalmologique ne donnent pas des données fonctionnelles sur la toxicité préclinique, ils nous montrent seulement si il y a des dommages à l’oeil. Cependant, l’ERG ou la tonométrie nous permet de faire une évaluation fonctionnelle de l’oeil lors de l’étude de toxicité préclinique

Question 15

C’est comment que les examens ophtalmologique préclinique se passent.

Answer 15

1) Mydriatique (agent pour dilater la pupille) : tropicalise ou atropine
2) lampe à fente: évaluation de la cornée, chambre antérieure, cristallin et rétine
3) ophthalmoscope indirect: évaluation de l’humeur vitré et rétine. Permet d’examiner la rétine lors de la chambre antérieure ou postérieure (ex: présence d’inflammation)

Question 16

Comment se passe l’ERG et qu’est-ce qu’on regarde?

Answer 16

Pour l’ERG on est capable d’utiliser presque tous les modèles animaux, c’est sous anesthétisie. Il y a un stimulateur lumineux qui font des flashs selon ce qu’on désire voir, des électrodes cornées pour enregistrer l’ERG et des électrodes cutanées qui sont utilisés comme référence.

Si on désirer regarder les bâtonnets on émet de faible lumière bleu, pour les cônes ce sont des flashs lumineux sur une luminescence de fond saturant les bâtonnets. Il y a l’onde A qui est la première défection négative, des potentiels oscillatoire qui sont des ondes sur la phase ascendante de l’onde B et finalement l’onde B qui est la première défection positive

Question 17

Comment fonctionne la tonométrie lors de l’étude de toxicologie (ophtam..)

Answer 17

On mesure la pression intraoculaire de l’oeil (le seuil normal 10 mmHG) .
Il est affecté par la production et le drainage de l’humeur aqueuse, le changement de pression intraoculaire

Question 18

C’est quoi la différence entre les réticulocytes et les érythrocytes (Globules rouges)

Answer 18

• réticulocytes c’est les globules rouges immature et leur poids est plus élevé
• érythrocytes c’est les globules rouges matures

Question 19

Parle moi des globules Blancs (rentre pas dans les détails)

Answer 19

• granulocytes (noyaux segmentés aussi appelé polymorphonucléaires): neutrophiles, basophiles , éosinophile
• monocytes : noyau large bilobé
• lymphocyte: noyau rond central

Question 20

C’est quoi les neutrophiles (6 qualités)

Answer 20

1) 50/70% dans les globules blancs
2) peuvent ingérer d’autres cellules ou agents pathogènes (ex: bactéries)
3) Suite à un phénomène de chémotaxie, c’est eux qui sont premier à arriver au site d’infection
4) courte demi-vie (quelques heures)
5) meurt immédiatement après phagocytose
6) principal composante de pus

Question 21

FITB: Les humains ont plus de _______ que de _______. Cependant, les rats ont plus de ______ que de _____________.

Answer 21

Les humains ont plus de neutrophiles que de lymphocytes. Cependant ;es rats ont plus de lymphocytes que de neutrophiles.

Question 22

Pourquoi on doit refaire souvent une prise de sang lorsqu’on désire regarder les neutrophiles.

Answer 22

Ils sont souvent adhérés aux parois ( grâce à des facteurs d’adhésion com ICAM/PECAM-1)

Question 23

Les deux types de lymphocytes sont les cellules NK ou lymphocyte T/B. D’où proviennent-ils?

Answer 23

Proviennent des organes lymphoïdes (thymus, rate, noeuds lymphatique, plaque de peser)

Question 24

Donne moi 3 caractéristiques des cellules NK

Answer 24

1) C’est une composante du système immunitaire innée (non spécifique)
2) occupent un rôle important dans La Défense contre les virus et les tumeurs
3) reconnaissent les cellules spécifique grâce au majeur d’histocompatibilité 1 (CMH1)

Question 25

Donne moi 4 caractéristiques des lymphocytes T/B

Answer 25

1) chaque lymphocytes T ou B reconnait un seul antigène du “non-soi” (antigène/ épitoge)
2) demi-vie de plusieurs semaines à plusieurs années (mémoire immunitaire pour les agents pathogènes rencontrés)
3) Lymphocytes T: produit au thymus et sont responsable de l’immunité cellulaire (adoptive et spécifique pour yb a.g)
4) Lymphocytes B: produisent les anticorps (immunité humorale)

Question 26

Donne moi 5 caractéristiques des plaquettes:

Answer 26

1) formés à partir de fragments de mégacryocytes
2) C’est la première ligne d’homéostasie (hémostase primaire)
3) la demi-vie est variable (8 à 12 jours)
4) absence de noyau, agrégation rapide et fréquence suite à un prélèvement (réduction artéfactuelle)
5) impliqués dans des manifestations secondaires de toxicité (coagulation secondaire disséminée)

Question 27

Quels sont les paramètres évalués pour l’hématologie (toxicologie)

Answer 27

compte de globules rouges (RBC)
compte de réticulocytes (RET)
HCT
concentration d’hémaglobuline

Question 28

C’est quoi l’hématocrite:

Answer 28

c’est la proportion en pourcentage d’érythrocytes dans le volume sanguin apres centrifugation (hémolyse diminue HCT)

Question 29

Qu’est ce qui pourrait causer une augmentation de paramètres érythroïdes

Answer 29

99% des cas c’est une déshydratation (vomissement ou diarrhée)
polycéthémie (analogue d’érythropoïétine)

Question 30

Qu’est ce qui cause une diminution de paramètres érythroïdes

Answer 30

• diminution de g.r
• diminution de production au niveau de la moelle osseuse
• diminution de production EPO (toxicité rénale)

Question 31

Pour les globules blancs, quels paramètres pourront être modifiés lors d’un stress et pk?

Answer 31

• catécholamines entrainent phénomène de démarginalisation des neutrophiles (déroulement des neutrophiles adhérés aux parois) donc augmente le nombre de neutrophiles dans le sang
• cortisol entraine une lymphocytes (désintégration des lymphocytes) et donc réduction des comptes de lymphocytes)

DONC STRESS AUGMENTE NEUTROPHILES ET DIMINUENT LYMPHOCYTES

Question 32

Par quels phénomènes le nombre de globules blancs peuvent être modifiés dans le sang (autre que stress)

Answer 32

• myélotoxicité (ex : antinéoplasique qui est un tx anticancéreux ) va diminuer tout les lignées cellulaire de la moelle osseuse
• réaction d’hypersensibilité (certains véhicules comme le Tween) vont augmenter le nombre d’éosinophiles et de basophiles

-inflammation chronique ou effet glucorticoïdes vont augmenter monocytes.

Question 33

D’où proviennent ces paramètres: (ALP,ALT,AST,CK,GGT)

Answer 33

1) GGT (gamma glutamyl transferase) : foie et CANALICULES BILIAIRES (en parralèle que ALP), pancréas
2) CK (créatinine kinase): MUSCLES SQUELETTIQUES
3) AST (aspartate transaminase) FOIE, coeur,muscles sequeletiques,reins,cerveau,globules rouges
4) ALT (alanine amino transférase): FOIE (PARENCHYMES), MUSCLES SQUELETTIQUES, coeur
5) ALP (phosphatase alcaline) : foie et CANALICULES BILIAIRES (tube qui reçoit la bile secrétés par les hépatocyte), os,reins, placenta,intestin

Question 34

Donne moi un cas où une augmentation d’ALP est dangereux et une où c’est totalement normal.

Answer 34

augmentation d’ALP dangereux : dommage osseux

augmentation d’ALP normal: croissance des os chez les enfants

Question 35

Quels paramètres seront modifiés lors d’un dommage musculaire

Answer 35

augmentation de CK,ALT,AST

Question 36

Quels paramètres peuvent expliquer des dommages parenchymes?

Answer 36

augmentation d’ALT et d’‘AST

Question 37

Donne moi 5 caractéristiques de l’albumine

Answer 37

1) 60% des protéines du plasma
2) produite par le foie
3) poids 69 000 Dalton
4) elle est essentielle pour le maintien de la pression oncotique (si il y a une hypoalbumie il y a un risque d’oedème)
5) essentielle pour le transport d’ex, a.g et composes liposoluble

Question 38

Parle moi d’un des test qu’on fait avec l’albumine et pk?

Answer 38

C’est quel pourcentage d cela drogue est lié à l’albumine car c’est seulement la fraction libre qui fait son effet dans le crops

Question 39

C’est quoi la différence entre l’albumine et la globuline

Answer 39

l’albumine est produite par le foie, mais ls globuline est produite par le foie et le système immunitaire

Question 40

Parle moi de quelques situations où on px retrouver une diminution ou augmentation de paramètres sanguins

Answer 40

1) dommage aux glomérules rénaux. (dommage chronique) peut entraîner une perte d’albumine (poids moléculaires inférieurs)
2) dommage hépatique chronique. entraine une baisse d’albumine (production)
3) Diarrhée ( perte de protéines comme albumine ou globuline)

Question 41

Pourquoi la créatinine est un bon marqueur de filtration de reins?

Answer 41

il n’est pas réabsorbé après la filtration

- une diminution de fonction rénale = augmentation de créatinine plasmatique

Question 42

Nomme/ Explique les trois causes d’une diminution de fonction rénale

Answer 42

1) pré-rénal (une diminution de filtration):
- déshydratation (diarrhé) , on va remarquer une augmentation HCT car il y a une augmentation de protéines plasmatiques
- hypovolémie (hémorragie) on va remarquer une diminution de pression artérielle (moins de sang qui rentre aux reins)

2) rénal ( dommage et perte de fonction au rein) : néphrotoxicité (ex: aminoglycosides)
3) post-rénal (obstruction des canaux) : non applicable à la toxicologie

Question 43

C’est quoi une hémostase primaire?

Answer 43

c’est le bouchon plaquettaire immédiatement après le dommage vasculaire. On compte le nombre de plaques

Question 44

Comment peut-on évaluer l’hémostase primaire?

Answer 44

1) aggrégation plaquettaire in vitro
2) temps de saignement: - incision cutanée superficielle (ex: 1mm de profondeur et 5 mm de longueur) - papier filtre pour mesurer temps de saignement ( normal c’est < 4 min chez le chien) ( augmenté avec aspirine)

Question 45

c’est quoi une hémostase secondaire?

Answer 45

formation d’un caillot avec déport de fibrine (on remarque une augmentation quand il y a un probléme hépatique)

Question 46

Combien de voies y-a-t-il pour l’activation de prothrombine en thrombine

Answer 46

3 voies qu’on est capable de mesurer int/ext/commune

Question 47

Parle moi du temps de prothrombine (sec) PT

Answer 47

c’est le temps de transformation du fibrinogène en fibrineuses par la voie commune et extrinsèque de la coagulation .
elle évalue les facteur de coagulation 1 (fibrinogènes) , 2 (prothrombine)

Elle est prolongé avec certaine toxicité ( 1) insuffisance hépatique, 2- coagulation intramusculaire disséminée (augmentation des facteurs de coagulation) , 3-warfarin, héparine)

Question 48

Parle moi du temps de prothrombine partielle activée = aPTT

Answer 48

évalue le temps de transformation du fibrinogène en fibrine par la voie commune et intrinsèque
- voie intrinsèwue est activé par contact avec la surface endommagée
e2value les facteurs de coagulation 1 (fibrinogène), 2 (prothrombine)
- prolongé avec certaine toxicité (1- insuffisance hépatique 2- coagulation intravasculaire disséminée, warfarin héparine)

Question 49

Pour quel genre d’études l’analyse urinaire est nécessaire

Answer 49

toxicologie répétées (subchronique et chronique) pas d’étude aigue 1 ou 2 jours

Question 50

Parle moi comment il peut y avoir une augmentation d’urobilinogène et de bilirubine lors d’une choléstase.

Answer 50

Lorsque le globule rouge est détruit, la bilirubine est libre. Cependant, elle n’est pas hydrosoluble donc elle se lie à l’albumine. Quand elle est lié, elle doit se rendre au foie ou la bilirubine va se conjugué avec l’acide glucoronique. Le conjugué va être sécrété au niveau de l’intestin pour être éliminé. Si jamais on a une cholestase, la bilirubine conjugué ne px pas aller à l’intestin. Elle va aller dans la circulation sanguine et va être éliminé au niveau du rein. L’urobilinogène conjugué dans l’estomac aura une certaine partie réabsorbé au niveau du foie, mais puisqu’il y a une cholestase, elle ne retourne pas à l’intestin et va aux reins. C’est pour ça qu’on remarque une augmentation de ces facteurs lors d’une cholestase.

Question 51

Parle moi de l’analyse urinaire (densité/uro/bilirubine)

Answer 51

1) densité (évaluation de la capacité de concentration des reins): augmentation à cause déshydratation
2) bilirubine : (produit lors de la déstruction des G.R en hème et bilirubine): hémolyse (pH, osmolalité et type de véhicule), augmentation lors d’une toxicité hépatique (ex : choléstase)
3) urobilinogène: augmentation lors d’une toxicité hépatique

Question 52

C’est quand qu’on remarque des corps cétoniques dans l’urine

Answer 52

jeune, hyperglycémie et diabète

Question 53

Pourquoi on remarque des protéines dans l’urine?

Answer 53

1) protéinuries de surcharge: - quantité anormal de protéines de faible poids moléculaire dans l’urine (bcp de protéines de sang qui vont se faire éliminer)
2) protéinuries tubulaires: - protéines de faibles poids moléculaire non réabsorbée par le tubule proximal. Toxicité à certains antibiotiques (ahminoglycosides)
3) protéinuries causées par une hyperperméabilité glomérulaires: - dommage au glomérule induisant souvent une albuminurie.

Question 54

Quels observations sont courantes sur le poids des organes lors d’une nécropsie (pathologie macroscopique)

Answer 54

1) diminution du poids du thymus et glandes surénales: stress
2) augmentation du poids du foie : - hypertrophie hépatocellulaire due à l’induction enzymatique
3) diminution du poids des reins : -toxicité rénale

Question 55

À quoi sert la pathologie microscopique?

Answer 55

identifier les organes cibles de toxicité

Question 56

Qu’est-ce qu’on px déterminer avec la pathologie microscopique ?

Answer 56

on px voir si il y a un lien entre la toxicité de l’organe observée et l’administration du composé, une dose dépendance et si il y a une réversibilité des lésions

Question 57

Nomme moi les expériences à effectuer lors d’une analyse de toxicité microscopique

Answer 57

1) préparateur de frottis de moelle osseuse (classique) :
on compte les types de cellules par un pathologiste clinique (500 cellules) on sépare les cellules
- cellules myéloïdes: neutrophiles,basophile,neutrophile,éosinophile
- cellules érythoïdes: érythrocytes
on calcule le ration myéloïde/ érythoïdes

2) immunohistochimie (pas kkch de classique)
on utilise des anticorps pour identifier la densité d’un antigène sur une lame histologique.
- anticorps primaire cible un antigène et n’est pas habituellement conjugué à. un marqueur
- anticorps secondaire conjugué à une enzyme (peroxydase) ou un fluorophore pour identification de l’a.c primaire et le visualiser