Cour 2 Flashcards
Ronéo 1
La définition du pouvoir de résolution
Plus petite distance observable entre 2 points
sans qu’ils puissent être confondus.
* Ainsi, plus D est petit, plus le microscope est puissant.
* D œil= 0,2mm
Calcul du pouvoir de resolutions
D = 0,61λ / Nsinα
N = Indice de réfraction du milieu, entre la préparation et
l’objectif (ex : N=1 pour l’air, N=1.5 pour l’huile)
λ (lambda) = Longueur d’onde du faisceau
α (alpha) = Moitié de l’angle du cône de lumière qui entre
dans l’objectif (meilleur angle pour α = 70°)
comment observe t-on un echantillon in vivo/ ex vivo
Culture de cellules dans des boîtes de pétri ou dans des tubes.
* Incubation à 37°, dans une atmosphère humidifiée (5% de CO2), dans
des milieux de culture adaptés à chaque type de cellule, en présence
de nutrimentsspécifiques ou de facteurs de croissance.
Pour l’etalement tissulaire quel sont les deux possibilité
La Congélation de la biopsie: azote liquide à -196°C en présence de cryoprotecteurs
ou
Utilisation de fixateurs chimiques comme l’aldéhydes
source lumineuse des microscope optique
Les photons * En tout on a donc un grossissement de
l’image de l’ordre de 400x
D= 0,2 micrometre
preparation pour le microscope optique
Déshydratation etinclusion en paraffine à chaud. La paraffine va entrer dans les
tissus et remplacer l’eau et les différents solvants, refroidissement à une
température de laboratoire (20°-25° voire moins) puis durcissement
coupe a 5 micromètre
Source lumineuse des Microscope électronique à transmission (MET)
les électrons beaucoup plus pénétrant que les photons
préparations en microscope électronique
Échantillon fixé et mort
* Déshydratation etinclusion en résine plastique de type époxyaraldite (se
polymérisent à 60°C)
* Coupe ultramince, 50 nm
dans un Microscope à contraste de phase comment les onde interagissent avec la brilliance
Si lorsque le faisceau traverse l’objet, les ondes sont déviées de la
même manière, il y a augmentation de la brillance
Si lorsque le faisceau traverse l’objet, les ondes sont déviées de
manière différente : il y a diminution de la brillance.