Coloração de Gram

Question 1

Diferença entre Gram + e Gram -

Answer 1

A parede de ambas constituída por peptidoglicano, sendo que as Gram- têm uma camada mais espessa. A grande diferença está na presença de lipopolissacarídeos (LPS), que está presente apenas nas bactérias Gram -. Os LPS fornecem fornecem características antigénicas às bactérias. Para além disso, os LPS fazem com que a bactéria não retenha o corante (primário).

Question 2

Que tipo de coloração é?

Answer 2

É uma coloração diferencia, que divide as células bacterianas em dois grandes grupos: bactérias Gram + e Gram -.

Question 3

Processo:

Answer 3

Deitar o 1º corante (violeta/roxo de genciana) - todas as estruturas ficam roxas
Deitar o mordente (lugol)
Deitar o descorante - umas ficam roxas e outras sem cor
Deitar o corante de contraste (safrina) - Gram - ficam vermelhas e Gram + ficam roxas

Question 4

Importância do uso de lugol

Answer 4

Se não pusermos lugol na coloração de Gram o corante sai inclusivamente nas Gram +. As Gram + têm pouquíssimos lípidos em relação às Gram -, mas as que têm abrem alguns poros na membrana, logo se não tivermos lugol o primeiro corante não fica retido ficando tudo Gram -, pois adquirem a cor do corante de contraste

Question 5

Causas de erros nas colorações de Gram

Answer 5

lâminas engorduradas que fazem com que o esfregaço não adira à lâmina e não seque bem;
mais tempo do que o desejável quando deitamos o álcool-acetona (pois a técnica é muito minuciosa e diz que temos de deitar álcool-acetona até não arrastar mais corante);
saltar a etapa do lugol;
corantes não estão bem filtrados (se tiverem alguns cristais inviabilizam a leitura do Gram ao microscópio).