Citómetro de flujo Flashcards

1
Q

¿Qué es el citometro de flujo?¿Aplicaciones?

A

Es un dispositivo optico de diagnostico para el analisis de multiples parametros de celulas individuales dentro do poblaciones heterogeneas
Se utiliza en:
- Inmuno fenotipado,
- Conteo de cromosomas
- Recuento de células
- Expresión de GFP (proteína fluorescente verde).
La citometría de flujo es una excelente herramienta de diagnóstico óptico, proporcionando a los científicos una manera de recopilar datos estadísticos sobre un gran número de células, y usar esa información para correlacionar múltiples parámetros dentro de una población celular.

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2
Q

Cuáles son los datos recolectados por un citómetro de flujo a partir de análisis estadísticos

A

Tamaño
Fenotipo
Complejidad
Integridad Celular

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3
Q

Es posible utilizar una lámpara UV como fuente de luz en un citómetro de flujo?

A

No es posible utilizar una lámpara de luz UV en un citómetro. El tamaño de las células que detecta un citómetro está en el orden de los micrómetros por lo que es esencial la utilización de un sistema láser correctamente calibrado y alineado al punto de interrogación.

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4
Q

como tiene que ser la forma del spot del laser?

A

El spot del laser debe ser elíptico, con el eje mayor igual al ancho del canal, y un eje menor aproximadamente igual al tamaño de la célula más pequeña. Esto evita perder conteos de células que pasan por las paredes del tubo como ocurre en (a: circ pequeño) o contar como una a dos células como en (c:circ amplio).

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5
Q

cuales son las funciones del sist fluidico?

A
  • presentar la muestra al punto de interrogacion
  • lograr flujo laminar
  • eliminar residuos
  • hacer flujo estrecho y unidimensional
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6
Q
que info me da: 
FSC
SSC
FLUOR
FSC Y SSC?
A

FSC: tamaño celular (tmb indice de refr)
SSC: complejidad interna
FLUOR: info sobre la estructura y funcion celular
FSC y SSC: discriminar entre poblaciones celulares

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7
Q

cual es la funcion de la barra oscura?

A

(similar a un obturador) que no deja pasar el haz de laser directo, para evitar falsos positivos y para proteger al sensor de una iluminación directa de alta potencia del laser.

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8
Q

que hace el umbral de tamaño minimo de deteccion en fsc?

A

evita la recopilación de todos los datos que detecta el sensor (solo me quedo con las cel de interes)
(por ej tengo mucha info de plaquetas y desechos)

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