Chapitre 4 - La chromatographie (11-20) Flashcards
Quels sont les critères d’un bon mode de détection ?
Un bon mode de détection doit :
- fournir une réponse proportionnelle à la concentration
- être sensible et stable dans le temps
- avoir une faible inertie
- produire peu de bruits de fond
Quels sont les principaux modes de détection utilisés en chromatographie ?
Les principaux modes de détection utilisés en chromatographie incluent :
- la colorimétrie, qui repose sur des réactions chimiques pour détecter les substances
- la spectrophotométrie, qui mesure l’absorbance à une ou plusieurs longueurs d’onde
- la spectrofluorimétrie, qui détecte des composés fluorescents ou fluorescents par dérivation
- la radioactivité, qui utilise des substances marquées pour permettre leur détection
Quels sont les éléments constitutifs d’une chromatographie en phase gazeuse ?
Les éléments constitutifs d’une chromatographie en phase gazeuse sont :
- un gaz vecteur chimiquement inerte
- un échantillon volatil
- une colonne capillaire de 10 à 50 mètres de long
- un four pour contrôler la température
- un détecteur tel que le FID (ionisation de flammes)
Comment se fait la séparation en chromatographie gazeuse ?
La séparation en chromatographie gazeuse dépend :
- des interactions entre l’échantillon et la phase stationnaire
- du point de volatilisation de l’échantillon
Pourquoi utilise-t-on des dérivations en chromatographie gazeuse ?
Les dérivations sont utilisées pour rendre les échantillons plus volatils ou moins polaires.
Elles permettent d’améliorer la séparation et la détection des composés.
Quelles sont les étapes de la dérivation des acides gras ?
La dérivation des acides gras implique :
- une estérification pour transformer les acides carboxyliques en esters méthyliques (FAME)
- une augmentation de la volatilité grâce à cette méthylation
Comment les glucides sont-ils préparés pour la chromatographie gazeuse ?
Les glucides peuvent être préparés par :
- une hydrolyse acide pour couper les liaisons osidiques
- une réduction au NaBH4 pour linéariser les monosaccharides
- une acétylation pour conférer un caractère apolaire
Quelles sont les différentes chromatographies spécifiques abordées ?
Les chromatographies spécifiques abordées sont :
- la chromatographie ionique, qui sépare des composés selon leurs interactions ioniques
- la chromatographie d’adsorption, qui repose sur l’interaction des composés avec une phase stationnaire solide
- la chromatographie d’affinité, qui repose sur les interactions spécifiques entre ligands et cibles pour séparer des protéines ou des complexes biologiques
- la chromatographie en phase inverse, qui utilise des phases stationnaires hydrophobes pour séparer des composés apolaires
- la chromatographie d’exclusion stérique, qui trie les molécules par taille
Comment fonctionne la chromatographie d’affinité ?
La chromatographie d’affinité fonctionne ainsi :
- une phase stationnaire spécifique interagit avec un ligand cible
- les molécules ayant une forte affinité restent fixées
- une élution est réalisée en modifiant les conditions (pH, force ionique) ou par compétition avec un autre ligand
Quelles sont les applications courantes de la chromatographie ?
Les applications courantes de la chromatographie incluent :
- la purification de protéines en biochimie
- le contrôle de qualité des médicaments
- l’analyse des composants alimentaires et cosmétiques
- la détection de substances dopantes ou toxiques
