Chapitre 4 | colorations spéciales Flashcards
quels sont les variétés de fibres conjonctives?
- collagène
- réticuline
- fibre élastique
quelles colorations pour le collagène?
- Van Gieson
- Trichrome de Masson
- APTH (théorique seulement)
quelle coloration est la meilleure pour le collagène?
Van Gieson
quelles colorations pour la réticuline
- Gordon & Sweets
- Gomori (Gridley)
- Del Rio Hortega
quelles colorations pour les fibres élastiques ?
- Résorcine-fuchsine de Weigert
- Fuchsine- paraldéhyde de Gomori
- Hématoxyline ferrique de Verhoeff
quels sont les trois types de microorganismes?
- bactérie
- champignon
- mycobactérie
quelle colo pour les bactéries?
Gram selon Brown and Brenn
quelle colo pour les mycobactéries?
Zielh-Neelson
quelles colorations pour les champignons? La meilleure et les autres?
meilleure: Grocott
autres: colo de routine, gram, pas, zielh neelson
quels sont les deux methode de colorer les acides nucléiques?
- grâce à leur basophilie (adn et arn)
- par des rx nucléaires (adn)
quelle colo pour mettre en évidence les acides nucléiques grace à leur basophile?
vert de méthyle pyronine
quelle colo pour mettre en évidence les acides nucléiques par des rx nucléaires?
Fleugen et Rossenbeck
3 types de glucides?
- mucosubstance neutre
- mucosubstance acide
- mucosubstance neutre et acide
quelles colorations pour les mucosubstances neutre
pas et pas-d
quelle coloration pour mettre en évidence les mucosubstance acides
bleu acian
quelle colo pour les mucosubstances acide et neutres
pas-bleu acian
deux types de protéines à mettre en évidence?
- fibrine
- substance amyloïde
quelles colo pour fibrines?
- trichrome de masson
- APTH
- MSB
- Bleu de méthyl
quelle colo pour mettre en évidence les substances amyloïdes?
rouge congo
quelles précautions à avoir pour colorer les lipides?
- tissu non circulé (donc cryotomie)
- la fixation ne doit pas affecter les lipides
quelle est la technique d’extraction des lipides
technique de chromation
- on ajoute du bichromate de potassium à la solution d’extraction pour extraire tous les lipides sauf les phospholipides
comment sont mis en évidence les lipides
a l’aide d’un lysochrome (substance colorée et non polarisée (auxochrome, pas de charge) non soluble dans l’eau mais très soluble dans les lipides
quoi faire si nous avons des lipides solides(2)
- chauffer la lame pour faire fondre lipides
ou - eau brominée (liquifie certain lipides)
on lave ensuite l’eau brominée avec du métasulfite de sodium sinon le tissu sera jaune
quelle colo pour mettre en évidence les lipides
huile rouge O
qu’est-ce qu’un pigment
substance présente dans les organismes vivant à l’état normal ou pathologique qui est colorée
quels sont les trois types de pigments
- artéfacts
- endogène
- exogène
qu’est-ce qu’un pigment artefacts? par quoi peuvent-ils être produit?
- attribuable à des produits chimiques employés dans les différentes étapes de lhistotechnologie
- par des fixateurs (ex.: bouin, formol 10% T
qu’est-ce qu’un pigments endogènes et exemple
- conséquence du métabolisme
- fer melanine calcium bilirubine
qu’est-ce qu’on pigment exogène et exemple
- dépôt de substance provenant de l’extérieur de l’organisme (ex.: que l’on respire)
- carbone, silice, amiante, tatouage
formaldéhyde
- vient d’où
- comment éviter
- aspect
- quoi faire pour éliminer
- interaction entre l’Hb et ses dérivés et le formol dont le pH est inf à 6,0
- formol tamponné à pH 6,5
- brun et noir
- traiter la coupe avec une solution. saturée d’acide picrique alcoolique pour 2h
chrome
- vient d’où
- comment éviter
- aspect
- quoi faire pour éliminer
- fixateur utilisant du bichromate de potassium et de l’éthanol
- laver les tissus à l’eau courante une nuit entière
- jaunâtre
- passer la coupe dans un mélange d’alcool acide pour 30min
mercurique
- vient d’où
- comment éviter
- aspect
- quoi faire pour éliminer
- utilisation d’un fixateur contenant du mercure
- rien
- brun noir
- traiter la lame à l’acide d’une solution d’iode alcoolique (le mercure est rendu soluble et éliminé par le thiosulfate de Na
nedzel
- vient d’où
- comment éviter
- aspect
- quoi faire pour éliminer
- déparaffinage insuffisant
- s’assurer qu’elle les temps et les réactifs soient adéquats
- zone incolore (il reste de la paraffine donc ça ne colore pas)
- augmenter le temps de contact et/ou le nombre de bains ou deparaffiner a 60oC, en gros bien deparaffiner
quels sont les deux principaux pigments endogènes
pigments hematogène
pigments phénoliques
qu’est-ce qu’un pigment hématogène? et quels sont les principaux?
- produit de dégradation des GR
- Hb, porphyrine, hémosidérine, pigment biliaires
- qu’est-ce que les pigments biliaires?
- quelle couleur?
- où principalement?
- quelle méthode pour mettre en évidence
- GR âgés phagocytés par la rate
- pigment jaune/brun à l’état naturel
- foie
- methode de Gmelin, méthode de Fouchet, réaction aux sels de diazonium
- qu’est-ce que l’hémosidérine et le fer
- comment est mis en évidence
- pigment brun renfermant du fer ionique
- avec rx histochimique (rx plus forte que juste histologique)
lors de surcharge en fer ou se trouve dhab l’hémosidérine
- rate, foie, ganglions lymphatiques
- mais possible qu’il en ai partout où il y a une destruction importante de GR
où trouve t on normalement une petite quantité de fer
rate et moelle osseuse
donc si disparition de fer la, on peut dire carence en fer
qu’est-ce que l’hémocromatose
pathologies liées au métabolisme du fer
quelles sont les trois méthodes de mise en évidence du fer et que mettent elles en évidence
1- bleu de Prusse de Perls
- mise en évidence le fer ferrique (Fe3+)
2- bleu de Turnbull
- mise en évidence le fer ferreux (Fe2+)
3- Tirman-Schmeltzer
- mise en évidence le fer ferrique et ferreux
Bleu de Prusse de Perls
- but
- principe
- rx utilisé
- met en évidence le fer ferrique de l’hémosidérine
1- libération du fer Fe3+ lié à l’hémosidérine par hydrolyse acide légère
2- mise en évidence du fe3+ libre - ferocyanure de k+ acidifié (rompt le lien entre hémosidérine et le fer)
methode au bleu de Turnbull
- but
- principe
- réactif
- mise en évidence du fer ferreux fe2+
- on met sulfure d’ammonium pour passer de fe3+ en fe2+ ensuite on met du HCl 1% pour libérer le fer des protéines et on ajoute du ferricyanure de K+ le fer se lie et forme un complexe bleu (bleu de turnbull)
qu’est-ce qu’un pigment phénolique, exemple
mélanine
qu’est-ce que la mélanine
- pigment brun noir lorsque coloré à HPS ou non coloré
- présent sur niveau de la peau, œil, cheveux, follicule pileux et grain de beauté (neavus)
détection des métastases de mélanomes
comment peut être mis en évidence la mélanine (5)
- par ses propriétés physiques (blanchit quand on met peroxyde d’hydrogène)
- son caractère réducteur (Fontana Masson)
- propriété de fixer les ions ferreux (bleu de Turnbull)
- mise en évidence de la tyrosinase
- immunohistochimie
Fontana Masson
imprégnation métallique de type argentaffine (capacité de réduire l’argent)
qu’est-ce qu’un pigment d’origine exogène
les trois principaux
- pénètre dans l’organisme) vient de l’extérieur
- par inhalation ou implantation sous la peau
1- carbone
2- silice
3- amiante
carbone
- provient de où
- couleur
- où se trouve t il
- à quoi ressemble t il et comment faire la différence
- vient de la pollution
- noir et irrégulier
- système respiratoire
- ressemble à mélanine, on différencie avec peroxyde d’hydrogène (mélanine blanchit, carbone reste noir)
- qu’est-ce que la silice?
- ressemble à quoi?
- mise en évidence
- inhalation dans les mines de silices
- précipite gris et amorphe
- on chauffe une lame à 650-700oC pour détruire les matières organiques mais l’es dépôt métalliques y restent
l’amiante
- où
- ressemble à quoi
- recouverte par quoi
- mise en évidence
- cutané ou respiratoire
- ressemble à silice mais en plus allongée et fine
- par des protéines dont l’hémosidérine (hémosidérine + amiante = corps asbestosique) (aug la fibrose)
- bleu de Prusse
quelle charge est le collagène
+
dans quoi le collagène est il soluble ou insoluble
soluble dans milieux acide neutre ou alcalin
insoluble dans l’eau mais hydratable
sur quoi la mise en évidence du collagène est-elle basée
sur son acidophilie et sa perméabilité (se laisse pénétrer facilement par les colorant )
van gieson principe
noyaux
deux colorants acides mais pas la même diffusion
- l’acide picrique diffuse mieuc donc colore les plus petites structures en jaune(fixe aussi le collagène mais sa couleur est masquée par la fuchsine )
- la fuchsine acide diffuse moins bien donc colore les plus grosse molécule donc le collagène en rose
- noyaux sont colorés par une laque ferrique dhemateine qui résiste au ph acide (laque aluminique serait éliminé)
où se trouve les fibres de réticuline
organes lymphoïdes
organes hématopoïétiques
peau
vx sanguins
os
muscle
tumeur malignes comme adénome du sein, sarcome
quelles sont les 6 étapes d’une imprégnation argyrophile
- oxydation
- sensibilisation
- imprégnation
- réduction
- virage à l’or
- enlèvement des sels d’argent soluble produits
1- oxydation
oxydation des fractions glucidiques en aldéhydes
2- sensibilisation
augment le contraste et rend plus spécifique
optionnel
3- imprégnation
on fixe l’argent (Ag+) au niveau des aldéhydes de la réticuline
il y a une légère réduction de Ag+ en Ag0 mais la plupart du Ag reste lié à la réticuline
4- réduction
on utilise le formol 10% pour changer Ag+ en Agº (donc Agº encore attaché aux aldéhydes
5- virage à l’or
on substitue l’Ag précipite pr un précipité d’or pour avoir un meilleur contraste
pour se faire on utilise une solution de chlorure d’or
cela crée ses sels d’argent
6- élimination des sels d’argent
on lie les ions Ag+ pour qu’il devienne soluble
on utilise du thiosulfate de sodium qui réagit avec l’argent
les sels produits sont éliminés avec l’eau
quelle charge a les fibres élastique
-
ou pouvons nous trouver des fibres élastique normalement
aorte
poumon
peau
castillane élastique (oreille)
principe de la méthode de Feulgen et Rossenbeck
on libère le desoxyribose à l’aide de HCl ce qui va produire des aldéhydes
on utilise ensuite le rx de schiff pour mettre en évidence ça en fuchsia
contre colore au vert lumière
arn ps colorer avec ça car juste finies donc pas d’aldéhyde produit
principe PAS
- on utilise l’acide périodique pour produire des aldéhydes
- on utilise rx de schiff pour mettre en évidence ça
si PAS D même chose mais au début on digère le glycogene
principe bleu acian
mucosubstance acide sont - et le bleu acian est + donc affinité
mais on trempe la lame dans de l’acide acétique 3% npiur rendre encore plus acide
quelle est la charge de la fibrine
-
qu’est-ce que nous dit la présence de fibrine dans un tissu
fibrine est le produit final de la coagulation
réaction inflammatoire aiguë accompagné d’une destruction de la paroi des vx sanguins (souvent site hémorragique)
