Chapitre 1 - Réplication De L'ADN : La PCR

Question 1

PCR

Answer 1

Polymérase Chain Reaction : réaction de polymérisation en chaine

Question 2

objectif

Answer 2

 Amplifier une séquence d’ADN in vitro pour obtenir un nombre important de copies d’une portion d’ADN

Question 3

Application

Answer 3

 Recherche d’une séquence ADN d’intérêt dans un échantillon

 Production d’une séquence d’ADN (pour les applications biotechnologiques)

Question 4

les 3 Etape

Answer 4

1) Dénaturation de l’ADN échantillon db 95°C
2) Hybridation avec des amorces d’ADNsb Entre 48 et 72 °C
3) Extension des amorces par polymérisation 72 °C

Question 5

quelque une Tm et comment la calculer?

Answer 5

T° à laquelle la moitié des complexe formé son dissocier
Formule de SUGGS : tm= 4(C + G) + 2(A + T)
Les amorces doivent avoir des Tm proche

Question 6

comment choisir la T d’hybridation

Answer 6

On choisie Th en fonction de Tm

Th = Tm – 5°C

Question 7

quand son rajouter chaque réactif?

Answer 7

• Tous les réactifs sont introduits en même temps dans le microtube

Question 8

résultat obtenue après notre cycle

Answer 8

• Nombre de copie de l’ADN cible : (en générale 35 cycle)

n cycle = 2n copies