Capitulo 10. Preparación de muestras, extracción y análisis de ácidos nucleicos Flashcards
Fases del proceso analítico
- Preanalítica
- Analítica
- Postanalítica
¿De dónde se pueden obtener las muestras celulares?
Tejidos sólidos Células embrionarias Células del embrión no implantado Líquido amniótico Tejidos y sangre fetales Células de sangre o de médula ósea adultas Muestras bucales Semen Células de cultivo Líquido cefalorraquídeo Líquidos o derrames serosos Líquido articular o sinovial
Estrategias de disociación de la muestra tisular
Fragmentación mecánica
Disgregación química
Digestión enzimática
¿De qué consta la fragmentación mecánica?
De corte, troceado o triturado de la muestra original para obtener células individuales o fragmentos titulares pequeños
¿De qué consta la disgregación química?
De la rotura de la matriz extra celular y de las uniones Inter celulares mediante homogeneización isotónica o por sonicación con presencia de detergentes.
¿De qué consta la digestión enzimática?
Las proteínas de la matriz se digieren con proteasas (colagenasa, proteínas a K, pepsina o tripsina. Puede requerir tiempos prolongados de incubación
¿Cómo funciona la centrífugación diferencial?
Se inicia con velocidades bajas, solo se pueden separar celular con grandes diferencias de tamaño.