Bioteknologi Flashcards
Eksempler på tradisjonell biotek
Sopp i ost, avl av husdyr, toksiner fra sopp i pencelin
3 step PCR
- Denaturering 95 grader
- Hybridisering 60 grader
- Polymerisering 72
Hva heter polymerasen i PCR?
TAQ-polymerase
Hvor kan vi få gener fra?
Bakterier, virus, eukaryot celler, kunstig laget
Hvordan genmodifiseres enfrøbladet planter som hvete, ris?
Genkanon,
Hvordan genmodifiseres tofrøbladet som grønnsaker?
Agrobacterium med ti plasmid
Hvordan genmodifiseres eukaryot celle?
Mikroinjeksjon i eggcelle
Hvilken type teknikk er gelelektroforese?
Kromotograferingsteknikk
Hvilke to genterapi metodene har vi?
Somatisk: dyrke celler for å erstatte ødelagt vev
Stamcelleterapi: Beinmargstramplantasjon
Hva er gentesting? Samme som genanalyse?
NEI!
Avdekke syksomsgener i alle livsfaser.
Hvordan fungerer mikromatriseanalysen?
- Finner mRNA i cellene (disse genene er aktive)
- Enzymet revers transkriptase brukes til å lage DNA fra mRNA. dette er cDNA materiale
- cDNA eksponeres for en brikke. DNA er farget og da ser man hvilke felter som er farget.
- Sammenligne med friske pas og syke
Hvordan deler stamceller seg?
Til en lik av seg selv og en ny som kan differansieres.
Hvordan kan stamceller brukes?
Klone frem nye celler
Forskning: se kommunikasjon og oppførsel av celler
Medisinfremstilling: Teste virkestoff
Hvordan underinndeles kloning?
Somatisk kjerneoverføring: Cellekjerna inn i et kjerneløs egg
kan se gjøre forskjellig med dette egget:
- Reproduktiv kloning: surogat
- Terapautisk kloning: Dersom cellegiveren er en pas, da blir dette vevet ikke avstøtet
- Forskning
Embryosplitting: Dersom man feks har laget en zygote ved somatisk celleoverføring
Embryoet splittets til sine 8-celler igjen. Dyr kan nå settes til dyrkning, dyr settes inn i livmor
Hvordan lages en DNA-profil?
Analyserer de områdene som ikke er gener
Hva kalles de ikke kodede delene av DNA?
VNTR: varible numer of tandem repites
Hva heter den klassiske DNA-profil analysen?
RELP
Hva heter den moderne DNA-profil analysen?
STR
Hva er en STR analyse?
Short tanden repits: VNTR med noen få basepar som repiteres 5-50 ganger.
10-17 STR områder analyseres
Bruker Real time PCR: Genererer DNA-profil raskere og mer effektivt
Hva er en RELP-analyse?
Basert på individuelle forskjeller på 5 VNTR områder
Hvordan går vi frem for å lage en DNA-profil?
Mellom genene finnes det områder som repiteres. Antallet av repitisjoner er ulikt fra person til person.
Når vi lager en DNA-profil blir 16 bestemte områder repiterte sekvenser analysert. For hvert område feller vi opp hvor mange ganger den aktuelle basesekvensen blir repitert. I tilegg blir et område på kjønnskromosomene analysert. =utgjør DNA-profil.
Kan vi vite noe om egenskapene til en ved å se på DNA-profilen?
Nei
Hvordan isoleres DNA?
Når vi skal få fram en DNA-profil, klipper vi av enden av DNA-kilden(feks en sneip) og legger den i et eppendorfrør. Deretter tilsetter vi ekstraksjonsløsning. Ekstraksjonsløsningen bryter ned cellemembranen slik at DNA blir frigjort fra cellene.
Når vi skal fremstille en DNA-profil fra en person, er første skritt å stryke en prøvepinne på innsiden av kinnet. Celler fra slimhinnen i munnen vil da feste seg til prøvepinnen og kan overføres til et eppendorfrør.
Hva er kapillær elektroforese?
- DNA bitene blir overført til et tynt rør, kalt kapillær, o en maskin hvor elektroforesen blir gjennomført
- Gelektroforesen gjennomføres, DNA.fragmentene passerer et vindu og blir størrelsen blir registrert
- Når vi finner lengden på en DNA.bit kan vi si hvilket DNA-område biten er fra. Dette er fordi lengen på primere og glankerende sekvenser er kjent for hver DNA-område.
Likheter PCR og DNA-replikasjon
- Dobbelhelix må splittes
- Legges til primere
- DNA-polymerase syntetiserer nytt DNA
Ulikheter PCR og Replikasjon
- C: splittes ved helikase, PCR Splittes ved varme
- Primase legger til RNA primere, DNA-primere
- Vi har humane DNA-polymeraser som arbeider godt ved 37, DNA-polymeraser fra Taq-bakterier
- Produktet er to komplette DNA-molkeyler, mange sykluser med mange milionvis av deler av DNA
- Komplett DNA kopiert, Små intervaller av DNA kopiert
- Egne DNApoly korekturleser, ingen korektur- forurensing kan gi feil