bio mol vidéo 7 Flashcards
quel est le vecteur de clonage
a) sites cos
b) fosmides
c) plasmide f
d) phage
e) aucune de ces réponses
rep: c) plasmide f et d
définir le plasmide f
le plasmide de E.coli permet le clonage de grosse molécules d’ADN ( principe de conjugaison )
qu’est que le fosmide
plasmide + site cos
quel est l’avantage d’utiliser le plasmide f
1 seul copie alors moins de toxicité
les plasmides les plus utilisé contiennent quoi
un gène de résistance à un antibiotique permettant la sélection phénotypique
quel sont les plasmide les plus utilisé
pbr322: tetr ampr
pcu: b-go et site polylinker
vrai ou faux les plasmides sont inutilisable si l’insert plus petit que 20kb
rep: faux plus grand que 20kb diapo 170
vrai ou faux après l’amplification il ne faut pas activer le gène car cela va augmenter la toxicité
rep : faux il faut activer le gène diapo 171
que ce passe t-il lorsqu’on insère un morceaux d’adn dans un polylinker
cela empêche de ne pas briser la fonction du plasmide
le phage lambda est un vecteur de clonage quels sont les deux raison qui justifie ce choix
- empaquetage d’environ 50kb d’adn chromosomique
- la partie centrale du génome du phage n’est pas nécessaire
quel sont les deux possibilité que nous pouvons faire avec le phage
- transformations de bactérie
- empaquetage dans la tête du phage
comment recréer une banque d’ADN
-phage
-génome tumeur
définir digestion partiel
c’est lorsqu’il y a des sites de reconnaissance GATC le sau3A va le reconnaitre des fois ce qui fais que dans un génome on va avoir des possibilité de fragment
définir le sau3A
- c’est une enzyme elle va couper des site de restrictions qui vont couper 4 nucléotide GATC
- son bout de séquence pour la reconnaissance des sites de restriction est complémentaire a Bamh1
- grâce à cette enzyme à beaucoup plus de chance de couper à l’intérieur de notre génome d’adn et cela nous permet d’aller chercher des fragment de 15kb
les cosmides sont les vecteurs hybrides de quoi
- phage lambda
- plasmide
vrai ou faux l’adn des cos peut se répliquer dans la cellule comme celui d’un phage
rep: faux c’est le plasmide qui se réplique et pour le phage d’être empaqueté
L’avantage sur les phage lambda
insert de 45 kb
la majeure partie du phage lambda et les site cos est supprimé
faux parce que les sites cos sont toujours présents
pourquoi on utilise les fosmides
on utilise les fosmides lorsqu’on veut moins de toxicité
quels sont les bienfait du bac
- lorsqu’on insert le bac, la bactérie croit que c’est son propre génome
- le bac est gros 100-350kb
- on va pouvoir avoir des grosses séquences pour faire des banques ADN
décrivez les phage simple-brin
- le phage M13 le plus utilisé
- avantageux pour le séquençage par la technique de sanger
- elles sont capable de faire des séquence rapide en utilisant une amorce
décrivez les vecteurs d’expression
- cellule normale vs cellule cancéreuse ( résultante protéique )
- il faut avoir cloné un gène démuni de ses introns (ADNc)
- ARNm en ADNc
fabrication d’une banque d’ADN
- Au départ l’ADN génomique est purifié. L’ensemble des clones produits la banque d’ADN
- il s’agit d’un clonage aléatoire
- le choix du type de banque utilisé dépend de la taille du génome à l’étude
4.il est possible de fabriquer une banque génomique ou une banque d’ADN complémentaire
quels est l’avantage d’une banque complémentaire
c’est qu’on va étudier les séquences codantes , les séquence qui sont exprimé au moment ou on va isoler cette ADN de nos cellules
vrai ou faux la transcriptase inverse provient des bactéries
rep: faux la transcriptase inverse provient des virus
quels est le rôle de la transcritptase inverse
c’est une enzyme qui va vouloir transformer son ARN en ADN complémentaire et cette ADN complémentaire va pouvoir s’insérer dans le génome de la hôte
quels est le mode du vecteur bactériophage
a) transfomation
b) infection
c) cosmide
d) transduction
e) aucune de ces réponses
rep: b infection
quels est le mode du vecteur plasmide
a) transfomation
b) infection
c) cosmide
d) transduction
e) toutes ces réponses
rep: a transformation
quels est le mode du vecteur fosmides
a) transfomation
b) infection
c) cosmide
d) transduction
e) aucune de ces réponses
rep: d transduction
comment identifier les clones spécifiques à notre gène d’intérêt
- il faut cribler la banque d’ADN génomique ou d’ADNc à l’aide de sonde spécifique à notre gène d’intérêt
- il existe des sondes qui reconnaissent l’ADN et d’autres qui reconnaissent les protéines
c’est quoi la technique de sanger
a) répliquer le plasmide
b) fabrication d’une banque d’ADN
c) produire une protéine à l’aide d’un ARNm
d) remettre dans l’ordre une séquence d’ADN
e) toutes ces réponses
rep : D
