bio mol

Question 1

calcul Tm

Answer 1

Tm = 2 x (AT) + 4 x (GC)

Question 2

facteurs influençant Tm

Answer 2

compo en bases
concentration en cations
longueur des fragments
mésappariement

Question 3

mésappariement sur Tm

Answer 3

• 1°C par %

Question 4

inhibiteur de PCR (2)

Answer 4

héparine, Hb

Question 5

PCRq

Answer 5

PCR en temps réel, plus il y a de fluorescence, plus il y a de molécules amplifiées

Question 6

efficacité PCRq

Answer 6

pente de Ct=log(nb de copies/microL)

Question 7

matériel Taqman

Answer 7

ADN matrice + 2 amorces + 4 dNTP + polym avec activité exonucléase
+ sonde qui s’hybride sur la matrice entre les amorces

Question 8

sonde Taqman

Answer 8

3’: quencher, bloqué (xOH)

5’: fluorochrome

Question 9

matériel SyberGreen

Answer 9

comme PCR classique

+ molécule intercalante qui se fixe sur le petit sillon de l’ADN double brin

Question 10

LAMP

Answer 10

Loop mediated isothermal amplification

Question 11

matériel LAMP

Answer 11

4 amorces (2 externes simples , 2 internes doubles) reconnaissant 6 régions

Question 12

méthode de Sanger

Answer 12

ADN polym + 1 amorce + dNTP + ddNTP + ADN à séquencer

Question 13

agents recherchés en hygiène alim

Answer 13

flore d’altération

bactéries patho

Question 14

PCR nichée

Answer 14

2 PCR avec 2 couples d’amorces différents:

• 1 pour ext du segment
• 1 pour segment cible

Question 15

PCR

Answer 15

amplification spécifique in vitro d’un segment d’ADN à partir d’un mélange de séquence

Question 16

PCR multiplex

Answer 16

plusieurs couples d’amorces pour amplifier plusieurs séquences

Question 17

transgénèse

Answer 17

insertion d’une séquence d’ADN exogène dans le génome d’un animal ou d’une plante

Question 18

insertion d’ADN dans cellule

Answer 18

1) micro-injection
2) électroporation
3) rétrovirus
4) transfo biolistique

Question 19

structure gène intégré au hasard

Answer 19

enhancer / promoteur / ADNc / intron ext /dépolyadenylation

Question 20

efficacité intégration au hasard

Answer 20

2 à 4%

Question 21

transgène recombinaison homologue

Answer 21

séquence correspondant à l’exon, au niveau d’un locus contenant la séquence intéressante

Question 22

types de recombinaison homologue

Answer 22

utilisation de cellules souches embryo
clonage somatique
knock-in / knock-out

Question 23

CRISPR

Answer 23

clustered regularly interspersed shot palindromic repeats

Question 24

coupure par Cas 9 + ARN guide

Answer 24

ADN double brin

Question 25

réparation ADN ap Crispr Cas 9

Answer 25

NHEJ : mutation INDEL

HDR : ajout d’une séquence comportant des homologie

Question 26

lieu de coupure Cas9 -ARN guide

Answer 26

à côté des PAM

Question 27

thérapie génique

Answer 27

utilisation des AN en thérapeutique