BD/TD1 Flashcards
Taille de l’œuf alécithe
100 micromètre
La quantité de vitellus dans l’œuf alécithes
Pas de réserve
Exemple de taxons avec l’œuf alécithes
Mammifères aplacentaires et placentaires
Métathéories, euthériens
Sourie
Développement interne
Quantité de vitellus dans l’œuf oligolécithe
Réserves peu abondantes
Répartition cytoplasmique de vitellus dans l’œuf oligolécithe
Répartition relativement homogène
Taille de l’œuf oligolécithe
100 micromètre
Exemples de taxons avec l’œuf oligolécithe
Échinoderme, procordés
Acidie, oursin
Quantité de vitellus dans l’œuf hétérolécithe
Réserve moyennement abondantes
Répartition cytoplasmique dans l’œuf hétérolécithe
Répartition inégale, existence d’un gradient vitellin
Taille de l’œuf hétérolécithe
1 MM
Exemple de taxons avec l’œuf hétérolécithe
Amphibiens, annélides
Xenope
Quantité de vitellus dans l’œuf centrolécithes
Réserve très abondantes
Répartition cytoplasmique de vitellus dans l’œuf centrolécithes
Masse vitelline regroupée au centre de l’œuf
Taille de l’œuf centrolécithes
1mm
Exemple de taxons avec l’œuf centrolécithes
Insectes
Drosophile
Quantité de vitellus dans l’œuf télolécithe
Réserve très abondante
Abondante
Répartition cytoplasmique de vitellus dans l’œuf télolécithe
Distribution généralisée,
Zone germinative réduite à l’état d’un disque en position polaire
Taille de l’œuf télolécithe
1 cm
Exemple de taxons avec l’œuf télolécithe
Mollusques céphalopodes, nombreux poissons, sauropsidés (reptiles/oiseaux), mammifères ovipares ( protothériens) Poulet Poisson zèbre
Analyse des profiles d’expression des gènes sur embryons fixés
Hybridation in situ
But d’hybridation in situ
Localisation d’une séquence d’ARN m
Est ce que le gène est exprimé?
Est ce que l’ARNm est présent ou pas?
Principe de hybridation in situ
Sonde : séquence complémentaire d’orientation opposé marqué avec une Ez?!?!
Étapes de l’hybridation in situ
Fixation Permeabilisation Hybridation avec sonde ARN dénaturé Lavage Révélation par saturation d'anticiper digoxygenine in toto ou en coupe
Avantage d hybridation in situ // immunodetection
Pour certaine protéine il n’y a pas d’anticorps
Les Ac sont très chères
But d’immunodetection
Localiser une protéine au niveau cellulaire in situ ou en coupe à l’aide d’un anticorp spécifique
Principe d’immunodetection
Complexe Ag - Ac avec un Ac localisable
Les étapes de l’immunodetection
Fixation
Inclusion coupes
Perméabilisation et saturation ( masquer des sites non specifique)
Incubation Ac1
Lavage
Incubation Ac 2 marqué
Observation sous loupe ou microscope fluorescence
Gaine de fonction par
Sur expression ectopique de gènes
Ajout de ARN m
Perte de fonction
Mutation knock out
Anti sens inhibé la traduction
ARN double Brian va être dégrader dans la cellule car la cellule le détect comme un virus
Analyse des fonction des gènes sur embryons vivnats
Gain de fonction
Perte d fonction
Effet de bêta caténine
Dorsalisant
Injection de l’ARNm sens
Contrôle négatif
Pour voir si c’est bien l’anti sens de ARN chercher