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Biologie Cellulaire Et Developpement > BD Cours > Flashcards

BD Cours Flashcards

0
Q

Organisation des feuillets embryonnaires au stade blastula

A

Organisation étagée

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Q

Gastrulation

A

Remodelage de l’embryon par des mouvements morphogenetiques coordonnés

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2
Q

L’organisation des feuilles embryonnaires au stade gastrula

A

L’organisation concentrique

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3
Q

Événements majeurs de la gastrulation (3)

A

Positionnement des trois feuillets embryonnaires primordiaux
Mise en place d’une nouvelle cavité ; l’archentéron
Réorientation des axes embryonnaires

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4
Q

Initiation de la gastrulation

A

Apparition du blastopore

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Q

Blastopore

A

Site d’invagination du feuillet mésodermique

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6
Q

Definition des stades de la gastrulation

A

En fonction de forme du blastopore

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7
Q

Stades de garstrulations

A 
Anse de panier
Fer à cheval
Jeune bouchon vitellin
Bouchon vitellin âgé
Encoche blastoporale ====> fente blastoporale
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8
Q

Mouvement morphogenetique

A

Changement de forme et déplacement d’un groupe de cellules à l’origine d’un changement de forme de l’organisme

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9
Q

Expérience des marques colorées de Vogt (1929)

But

A

Mise en évidence expérimentale des différents types de mouvements cellulaires de la gastrulation

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10
Q

Types des mouvement en cours de gastrulation

A

Epibolie ou intercalation radiaire : calotte animale
Involution : zms
Extension convergence ou intercalation médiocre latérale : zmp
Invagination : cellule en bouteille
Roation : cellule vitelline

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11
Q

Forme et mouvements des cellules reposent sur

A

L’organisation du cytosquelette

L’adhérence des cellules

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12
Q

Formation des cellules en bouteille par des cellules…

A

Endodermique

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13
Q

Formation des cellule en bouteille

Processus

A

L’invalidation des cellules en bouteilles forme le blastopore ( initiation dorsale)
Leur formation est liée à l’induction du mésoderme

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14
Q

Formation des cellules en bouteille

Niveau cellulaire

A 
Modification du cytosquelette 
Constriction apicale ( actine)
Allongement du corps cellulaire par polymérisation des microtubules
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15
Q

Formation des cellules en bouteille impose

A

Une courbure à l’épithélium

Définit la position du blastopore

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16
Q

La rotation de l’endoderme est initié par

A

La formation des cellules en bouteilles

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17
Q

La rotation de l’endoderme

A

Cellules en bouteilles
Les cellules de l’endodrme pharyngien sont progressivement repoussés et plaquée contre le toit du blastocoele, où elles précèdent le mésoderme
L’endodrme végétatif remonte en partie à l’intérieur du blastocoele
Il sera par la suite inter alizé passivement

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18
Q

L’epibolie de l’ectoderme

A

Intercalation radiale des cellules de l’ectoderme

3 couches ===> 1 couche

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19
Q

Port important pour l’épibolie de l’ectoderme

A

Catherine ( adhésion cellule cellule)

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20
Q

l’expression d’une forme tronquée de la E cadherine…

A

Perturbe l’épibolie en entraîne des déchirures de l’ectoderme

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21
Q

Le toit du blastocoele est recouvert d’une

A

Lame basale constituée de fibronectine et de laminine

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22
Q

Expérience immunoblocage par injection d’anticorps anti-fibronectine dans le blastocoele en début de gastrulation

A

Observation épaississent du calotte animale et absence d’epibolie
Résultat : la matrice extra cellulaire est nécessaire aux mouvements d’epibolie.

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23
Q

L’étalement de la calotte animale est provoquée par

A

Des divisions cellulaires
L’étirement des cellule de la couche externe
L’intercalation radiale des deux couches profondes

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24
Q

Quels type d’interactions sont nécessaires aux mouvement d’epibolie

A

Les interactions matrice extracellulaire cellule fibronectine intégrine
Adhérence cellule cellule E cadherien

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25
Q

Les trois mouvements du mésoderme

A

Involution
Migration
Convergence extension
Comin ;)

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26
Q

Involution versus invagination

A

L’involution est une invagination en doigt de gants associée à un phénomène de tapis roulant

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27
Q

Involution du mésoderme

A

Mouvement d’énroulement du feuillet mésodermique au niveau des lèvres du blastopore
1 lèvre dorsale
2 lèvre latérales
3 levre ventrales

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28
Q

Les premières cellules du mésoderme qui involuent

A

Adaptent un phénotype migratoire

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29
Q

Protrusions cellulaires

A

Lamellipode protrusion large microtubules

Filopode protrusion fine actine.

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30
Q

Un point d’adhésion focal

A

Un regroupement d’intégristes liées au substrat

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31
Q

La matrice est elle nécessaire à la migration es cellules mésodermiques ?
Quelle expérience?
Quelle observation?

A

Invenrtion d’une partie du toit du blastocoele

Lors de leur migration les cellules évitent la région dépourvue de matrice

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32
Q

La matrice est elle nécessaire à la migration es cellules mésodermiques ?

A

La matrice extracellulaire est indispensable à la migration des cellules mésodermiques sur le toit du blastocoele

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33
Q

La fabrication de la matrice est elle nécessaire à la migration ?
Expérience

A

Immunoblocage par injection d’anticorps anti fibronectine
Les anticorps se fixent à la fibronectine
Par encombrement stérique ils perturbent les interactions entre la fibronectine et les cellules de mésoderme

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34
Q

La fabrication de la matrice est elle nécessaire à la migration ?
Observation

A

Un blastopore circulaire sous équatorial : absence de migration des cellules mésodermiques
Un hémisphère végétatif non invaginé
Un hémisphère animal plissé : les cellules ectodermiques continuent de se multiplier activement les cellules de la couche externe s’aplatissent mais pas d’intercalation radiale

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35
Q

La fabrication de la matrice est elle nécessaire à la migration ?

A

La fibronectine est nécessaire à la migration du mésoderme et à la îintercalation radiale

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36
Q

Pour la migration du mésoderme , interaction nécessaire est:

A

Interaction cellule matrice

Intégrine Alpha 5 bêta 1# fibronectine

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37
Q

Mouvement d’extension convergence de mésoderme

A

Au début d la gastrulation le mésoderme se présente comme un anneau dans le plan ésuatorial.
Au cours de la gastrulation, il converge vers le blastopore. Cette convergence s’accompagne d’une extension antero-posterieur du tissu mésodermique sous le toit du blastocoele ( face dorsale)

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38
Q

Expérience de Keller

A

Transplantation des cellules de ZM marquées Che zen hôte non marqué permet d’observation de l’interaction des cellules.
Intercalation médiocre latérale de mésoderme

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39
Q

Intercalation médio - latérale

A

1- protrusion cytoplasmiques dans des directions aléatoires
2- protrusion restreintes aux extrémités medio latérale : cellule bipolaire
Polarité planaire
3- intercalation médio -latérale des cellules ===> extension du tissu

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40
Q

Mise en évidence du rôle de wnt 11 dans le mouvement d’extension convergence
Expérience et conclusion

A

Localisation de Wnt11 et Fz7 par hybridation in situ
wnt11 est exprimé dans la ZMD superficielle
Le récepteur Fz7 est exprimé dans la ZMD profonde

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41
Q

Mise en évidence du rôle de wnt 11 dans le mouvement d’extension convergence
In vitro
In vivo

A

In vitro stratégie des dominant négatifs
L’inhibition de Wnt11 perturbe le convergence extension des explants de Keller
In vivo idem
L’inhibition de Wnt11 perturbe la convergence extension

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42
Q

Mise en évidence du rôle du Dsh dans le mouvement d’extension convergence

A

Une forme tronquée de la protéine Dsh ( domaine PDZ) agit comme un dominant négatif et bloque les mouvements de convergence/extension de la gastrulation
L’inhibition de Dsh perturbe la convergence extension

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43
Q

Voies Wnt mésoderme

A

Voie Wnt canonique bêta caténine : spécification détermination en prolifération cellulaire
Voie Wnt PCP ( planar cell polarity) : convergence extension polarité cellulaire

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44
Q

Les conséquences de la gastrulation

A

Nouvelles positions relatives des cellules

Nouvelles interactions possibles ( communications cellulaires : induction)

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45
Q

Tube neural

A

Une structure épithéliale ectodermique à l’origine de l’encéphale et de la moelle épinière

46
Q

Morphogenèse du tube neural au cours de la gastrulation

A

Spécification des cellules neurales
Épaississement de la plaque neurale
Extension convergence (// allongement de l’axe AP)

47
Q

Morphogenèse du tube neural au début de la Neurulation

A

Les bords de la plaque se soulèvent : bourrelets neuraux
La plaque s’incurve en gouttière
Les bourrelets se rejoignent dans le plan médian et se soudent
La fusion progresse de l’A==> P et P==> A

48
Q

Morphogenèse du tube neural en fin de la Neurulation

A

Le tube neural s’isole de l’ectoderme

Fermeture des neuropores Ant et Post

49
Q

La Neurulation conduit à la séparation de trois dérivés ectodermiques

A

L’épiderme
Le tube neural
Les crêtes neurales

50
Q

Les cellules de crêtes neurales

A

D’individualisent grâce à un mécanisme de transition épithélium mesemnchyme puis adoptent un phénotype migratoire

51
Q

Lignage des cellules issues des crêtes neurales

A 
Système nerveux périphérique ( schwann, gliales, orthosympathique, parasympathique) 
Médullo surrénale
Mélanocyte 
Cartilage faciaux
Dentine
52
Q

Aspect cellulaire de la Neurulation : changement de forme des cellules

A

Les cellules neurale s’épaississent
La plaque neurale s’incurve par constriction apicale : mécanisme dépendant de l’actine apicale (+myosine)
Les cellules s’allongent le long de la face inférieur de l’ectoderme adjacent

53
Q

Expérience de Townes et Holtfreter (1955)

Principe

A

Expérience d’agrégation cellulaire
Prélèvement d’un fragment d’épiderme et de plaque neurale sur une jeune neurula de xénope
Dissociation des cellules dans un milieu physiologique dépourvu de ca 2+ ( + EDTA)
Culture de cellules dans un milieu physiologique ( avec Ca2+)

54
Q

Observation de l’expérience de Townes et Holtfreter

A

Les cellules neurales se regroupent au cœur de l’agrégat

Les cellules épidermique recouvrent la structure

55
Q

Quels sont les mécanisme connaissance cellulaire mis en jeu dans l’expérience de Townes et Holtfreter ?

A

Les cellules de l’ectoderme expriment la E cadherine ( low level of cdherin)

Les cellules de la plaque neural expriment la N cadherine (high level of cadherin)

56
Q

Événements majeurs de la Neurulation

A

Au stade neurula le plan d’organisation est établi
Organisateur de spemann
Les régions de l’embryon qui formeront les yeux, les membres et les autres organes sont déterminées

57
Q

Organisateur de spemann

A

La régionalisation le long des axes antero postérieur et dorso ventral est étroitement liée à l’action de l’organisateur de spemann

58
Q

EDTA

A

Inhibiteur de métallo enzymes
Tampon TEA ( purification des acides nucléiques )
En saquancage : bloquer l’activité de nucléase Mg2+ dépendant
Limite l’hydrolyse des protéines dans les extraits cellulaires

59
Q

Clivage

A

Processus durant lequel le centre inducteur de nieuwkoop ce forme dans la région dorso-végétatif et au cours duquel se réalise l’induction du mésoderme

60
Q

Clivage holoblastique

A

Mitose suivit d’une division totale du cytoplasme
1ère division : plan méridien - égale
2ème division : plan méridien - égale
3ème division : plan subéquatorial inégale

61
Q

Blastomère :

A

Cellule embryonnaire

62
Q

Blastocoele

A

Cavité qui se forme au sein de l’embryon en cours de clivage

63
Q

Formation du blastocoele

A

Perte d’adhérence locale ===> élargissement des espaces intercellulaires
Flux de Na+. Et de l’eau du milieu extérieur vers la cavité inter cellulaire
Les jonctions serrées assurent l’étanchéité avec le milieu extérieur

64
Q

Ce qui tapisse le toit du blastocoele

A

Est une matrice extra cellulaire (MEC)

65
Q

Principales molécules constitutives de la MEC

A

Laminine et fibronectine

66
Q

Jonctions serrées

A

Elles assurent l’étanchéité ente le milieu extérieur et le milieu interne de l’embryon
Elles sont constitué d deux composants majeurs : la Claudine et l’occludine

67
Q

Les jonctions communicantes ou jonctions GaP

A

Une jonction GAP est l’ensemble de deux connexons mis bout à bout
Une connexon est un canal formé de six sous unités, les connexines
Taille de pore : 1,5 nm
Molécules circulantes < 1000 Da ex : eau ions AMPc

68
Q

Adhérence cellule cellue:

A

Les cadherine
Interaction homophilique
Dépendantes du calcium

69
Q

Les interactions cellules matrices

A

Fibronectine

Intégrine

70
Q

La transition blastuléenne

A

Rupture dans le rythme de division cellulaire et désynchronisaiton
A lieu au 10-12 eme cycle de division embryon a 2ˆ12 ou 4096 cellules

71
Q

Importance de transition blastuléenne

A

Après 10-12 cycles de divisions rapides sans transcription( interphase limité à phase S) on va reprendre la transcription

72
Q

Les 3 feuillets embryonnaires sont spécifiés au cours de la

A

Période de la clivage

73
Q

Pour savoir si la cellule est spécifiée ou déterminée il faut réaliser

A

Des expériences de culture et de transplantation

74
Q

Comment les differnets feuillets embryonnaires sont ils spécifiés?

A

Certains déterminants sont régionalisé

Le mésoderme est induit

75
Q

Rôle de protéine Veg T

A

Facteur de transcription
Nécessaire pour la spécification de l’endoderme et aussi pour l’induction du mésoderme
En fonction de la concentration Veg T spécifie l’endoderme et ou mésoderme

76
Q

Expérience de Nieuwkoop ( 1969)

A

Mise en évidence expérimentale de la spécification des cellules de la blastula
Mise en évidence expérimentale de l’induction du mésoderme

77
Q

L’expérience de Nieuwkoop observation

A

Fragments de blastula mis en culture séparément
Cellules de calotte animale : ectoderme ( pas de neurone)
ZMV : mesenchyme sang épiderme
AMD : muscle tube neurale notochord
Cellules d’hémisphère végétale : endoderme

78
Q

Résultat de l’expérience de Nieuwkoop

A

Les trois feuilletes embryonnaires sont spécifiés pendant le clivage et le mésoderme est régionalisé le long de l’axe dorso-ventral

79
Q

Résultat de l’expérience de Nieuwkoop partie 2

A

L’association de cellules de la calotte animale avec des cellules végétatives conduit à la formation de tissus mésodermique
Des interactions entre cellules de la calotte animale et blastomère végétatifs induisent la spécification du mésoderme

80
Q

A partir de quel élément de l’association se différencie le mésoderme ?

A

Expérience de Dale et Slack (1985) injection de traceurs fluorescents

81
Q

Expérience de Dale et Slack (1985) injection de traceurs fluorescents
Protocole et observation de exp 1 et 2

A

1: marquage des cellules de la calotte animale ====> contact calotte animale et endoderme ====> marquage de l’ectoderme et des dérivés mésodermiques , endoderme non marqué
2: marquages des cellules végétatives ====> contact calotte animale et endoderme ====> ectoderme et dérivés mésodermiques non marqués , marquage de l’endoderme

82
Q

Expérience de Dale et Slack résultat

A

Les tissus mésodermique se forment à partir des cellules de la calotte animale
Les cellules végétatives induisent les cellules de la calotte animale

83
Q

Le contact cellule cellule est il nécessaire à l’induction du mésoderme ?
Exp + résultat

A

Placer un filtre micro poreux entre les cellules de CA et les blastomères végétatifs
Induction du mésoderme a lieu normalement
‘ Inducteur est donc une substance diffusible , il n’y a pas de nécessité de contact entre les cellules

84
Q

Compétence

A

A

85
Q

Les cellules de la calotte animale sont compétentes

A

Entre 4 et 11 heures après la fécondation

86
Q

L’induction de mésoderme commence

A

Des le stade 32 cellules, nécessite un contacte de minimum 2 heurs avec l’inducteur

87
Q

Induction. Et compétence

A

La cellules inductrice libére le signal inducteur , si la cellule récepteur soit compétente elle devoit cellule induite ===> au lieu de voie de différenciation par défaut elle va utiliser la voie de différentiation induite

88
Q

Repnse cellulaire à l’induction

A

Changement de forme de mobilité

Changement transcriptionneles

89
Q

Le mésoderme e et régionalisé selon

A

L’axe dorso ventral

90
Q

Mésoderme axial en. Blastula

A

Chorde en gastrula

91
Q

Mésoderme para axial de blastula

A

Sommités os muscle squelettiques en gastrula

92
Q

Mésoderme intermédiaire de blastula

A

Reins gonades en gastrula

93
Q

Mésoderme latéral de blastula

A

Sang tissu conjonctif système cardiovasculaire en gastrula

94
Q

Cellules de la calotte animale + cellules végétatives dorsales

A

Chorde et muscles ===> mésoderme dorsal

95
Q

Cellules de calottes animale + cellules végétatives ventrales

A

Sang, tissu vasculaire ===> mesoderm ventral

96
Q

Résultant de l’expérience de Dale et Slack au stade 32 cellules

A

L’induction est régionalisée : D 1 induit le mésoderme dorsal, D4 le ventral
Soit il existe differnets facteurs inducteur
Soit un facteur exprimé en gradient dont l’effet est dose dépendant

97
Q

Quelle est la nature moléculaire des signaux inducteur se mésoderme ?

A

Sont produits par les blastomères végétatifs
Sont diffusibles
Induisent le mésoderme entre le stade 32 cellules et la fin de la période de clivage
L’induction est régionalisé le long de l’axe dorso-ventral

98
Q

Perte de fonction in vivo par l’injection précoce et differnets stratégies
Ovocyte
Zygote
2 ou 4 cellules

A

Utilisation d’oligo nucléotides anti sens
Utilisation de dominants négatifs
Immunoblocage

99
Q

Molécules secrètes par les blastomères végétatifs

A

TGF bêta ( transforming growth factor bêta)
Vg1
Activine
Xnr1-4 ( xénope nodal related factor)
BMP( bone morphogenetic protéin)
FGF ( fibronlast growth factor)

100
Q

Les TGF bêta

A

Petites protéines monomeriques sécrétées
2 types de récepteur à activité serine thréonine kinase
2 voies de transduction ( Smad 2,3,4 et Smad 1,5,4)

101
Q

Vg1

A

ARN m maternel

L’ARNm est localisé dans le cortex végétatif de l’ovocyte ( avant la fécondation )

102
Q

Expérience de gain de fonction de Vg 1:

Observation

A

Injection d’ARN m Vg1 dans la calotte animale ===> aucun effet
Injection d’ARN m Vg1 dans un embryon ventralisé aux UV ===> aucune sauvetage

103
Q

Expérience de gain de fonction de Vg 1:

Résultats

A

Les protéin de type TGF bêta subissent des modifications post traductionnelles qui les rendent fonctionnelles.
Les enzymes qui modifient Vg1 sont présentent dans les blastomères végétatifs et pas dans les cellules de la calotte animale
L’injection de la protéine Vg1 activée induit en mésoderme dorsal les cellules de la calotte animale et de sauver des embryons ventralisés.

104
Q

Forme active de la protéine Vg1

A

Vg1 ====> dimerisation ====> clivage ====> forme active

105
Q

In vitro l’acrivine ….

Mais le problème est ….

A

L’acrivine est suffisante pour induire du mésoderme et les effets sont dose depandant
L’acrivine n’est pas présent in vivo au début du developpemt l’acrivine mime peut être l’action d’une autre protéine TGF bêta

106
Q

Goosecoid

A

Facteur de transcription exprimé spécifiquement dans le centre organisateur de Spemann
Goosecoid active les gènes codant les protéines responsables de l’activité du centre organisateur de spemann

107
Q

VegT et bêta caténine active fortement

A

La transcription de Xnr

= synergie fonctionnelle

108
Q

Vg1 versus activine

A

Vg1 et activine ont des effets variables in vitro en fonction de leur concentration
Aucune des deux n’est exprimé en gardien in vivo
Vg1 et activine peuvent mimer l’action d’autres protéines TGF bêta : les Xnr

109
Q

Nodal ( Xnr)

A

Les Xnr sont exprimés en gardient dans les cellules végétatives
L’expression des Xnr est activés par Veg T, Vg1 et la bêta caténine
Faiblement activé par Veg T dans les cellules végétatives ventrales
Fortement activés dans les cellules végétatives dorsales par l’action conjuguée de Veg T de Vg1 et de la bêta caténine active

110
Q

Le centre organisateur de spemann

A

Régionalisation dorso ventrale du mésoderme

Le mésoderme dorsale dorsalise le mésoderme ventral

111
Q

Signaux ventralisants

A

BMP4 ubiquitaire

Xwnt8 zone marginale

112
Q

Signaux dorsalisants produits par le COS :

A

Chordine noggine antagonistes de BMP4

Frizbee antagoniste de Xwnt 8

113
Q

L’inhibition de la signialisation BMP est

A

suffisante pour dorsaliser le mésoderme

Biologie Cellulaire Et Developpement (5 decks)

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