Bakteriegenetik Flashcards
Varför blir F- inte F+ när dessa konjugerar med Hfr-celler?
Endonukleaset gör enkelsträngsbrottet precis i början av plasmiden som integrerats i kromosomen, varpå samtliga gener stegvis förs vidare in i F-. Konjugationen avbryts precis innan plasmiden överförs.
Vad är interuppted mating technique?
Syftet med tekniken är att mappa ut de gener som finns i en Hfr-cells kromosom genom att studera konjugationen mellan en F- och en Hfr. Viktigt att veta är att generna på kromosomen i F- -cellen ersätts av Hfr-cellens gener, de fördubblas inte.
- I ett prov blandar man Hfr och F-
- De fördelas i flera provrör som studeras efter specifika tidpunkter
- Proven vortexas hårt för att konjugationen ska avbrytas
- Plating på agarplattor - studering av bakterietillväxt.
Beroende på hur lång tid man låter gå innan man avbryter konjugationen har olika gener hunnit överföras till F-. Detta kan studeras genom att låta proverna växa på agarplattor med olika substrat. T.ex om man vet att genen för Azid-resistens finns, kan man mappa ut vilken ordningen den ligger i förhållande till andra gener beroende i vilket prov bakterierna växer.
Vad är transduktion och hur går det till?
Transduktion är då bakteriellt DNA sprids m.h.a fager som infekterar bakteriekroppar.
- En fag binder specifikt till en bakterie - injicerar fag-DNA
- Injektionen gör att bakteriens DNA-och RNA-syntas stannar av - det bakteriella genomet bryts ner
- Men generna för replikation och syntes bryts inte ner - används av fagen för att replikera eget DNA.
- Dagens proteinkomponenter syntetiseras och fag-genomet packas in i fagerna
- Fagerna utsöndrar lysozym som bryter bindningarna mellan NAM och NAG i peptidoglykanet, värdcellen går således sönder.
Varför är det problematiskt med klassificeringen av Yersinia?
Yersinia pestis är en humanpatogen som orsakar pest. Dock finns det andra varianter av Yersinia som t.ex finns i jord och vatten, dessa är inte humanpatogena. Varianterna är kromosomalt identiska, det som skiljer dem åt är plastiker med virulenta gener.
Vad är kapslar och vad utgör det för fördel hos bakterien?
Kapslar omsluter bakteriecellerna och utgör ett skydd för den, de är svåra att fagocytera. De består av ett slemlager som är uppbyggt av polysackarider.