Asepsie Flashcards
Définir la culture cellulaire
Consiste à cultiver et à maintenir des cellules, des tissus ou des organes animaux ou végétaux dans des conditions de culture propices.
depuis combien de temps extrait-on les cellules animales et végétales pour les cultiver en laboratoire ?
130 ans
Définir pluripotence et totipotence.
Pluripotence: Capacité des cellules de se différencier en tous les types cellulaires d’un organisme
Totipotence: Capacité des cellules de se différencier en tous les types cellulaires d’un organisme ainsi que de regénérer un organisme en entier.
La réussite d’une culture cellulaire dépend de quels facteurs?
- Milieu de culture (explants petits, adapté/solide, liquide, hormone/auxine, nutriment)
- Asepsie (compétiteurs et contaminants, gagnant plantes ou bactérie, hotte flux laminaire, équipement stérile)
- Homéostasie (Maintien de l’équilibre dynamique, Bris)
- Matériel et équipement (adéquat, entretien, connaissance)
Quel est la fonction d’un agitateur magnétique?
- Accéléré le processus de dissolution.
- Assure mélange uniforme (homogène)
- Mouvement constant
Quel est la fonction d’une plaque chauffante?
- Sert à chauffer les solutions
- Pour évaporer les solvants
- Faire fondre des substances
- Pour sécher des solutions
Quel est la fonction d’une balance analytique?
- Sert à offrir une précision élevée dans les mesures des masses (2mm, plus petite quantité)
- Sert à préparer des solutions chimiques.
Quel est la fonction d’un purificateur d’eau?
- Purificateur d’eau par osmose inverse
- Utilise une membrane qui est semi perméable pour faire pour faire de l’eau distillé.
Quel est la fonction d’une hotte chimique?
- Assurer la sécurité des utilisateurs en éliminant les vapeurs
- Elle aspire les vapeurs, les gazes nocives et aide à filtrer l’air.
Quel est la fonction d”un pipeteur et d’un dispensette?
Pipeteur:
* Faire un dosage précis
* Économie de temps
* Éviter la contamination croisée
* Prévention des éclaboussures.
Dispensette:
* Distribution précise
* Permet le réglage du volume désirer
* Économie de temps
* Prévention des éclaboussures
Quel est la fonction d’un four à micro-onde?
- Liquéfier la gélose
Quel est la fonction d’un réfrigérateur - congélateur?
- Stockage des milieux de cultures
- Stockage des échantillons biologique
- Conservation des stocks de cellules
- Conservation de certain produit
Quel est la fonction d’une loupe binoculaire?
- Identifier les contaminations
- Documentation visuelle
Quel est la fonction d’un bacticinérateur?
- Sert à stériliser les équipements
- 815C (10 sec.)
- Se retrouve dans la hotte flux laminaire verticale
- Éliminer les agents pathogènes
Quel est la fonction de la chambre de croissance?
- Fournir un environnement contrôler pour la croissance et le développement des cellules.
- Contrôle la lumière et la température.
Quel est la fonction d’un agitateur orbital?
- Sert à effectuer des mouvements circulaires pour aider à mélanger le liquide afin de faire de la culture circulaire.
Quel est la fonction d’un verrie invitro végétale?
- Tige de verre : Utiliser pour mélanger et agité des substances
- Ballon volumétrique : Volume de liquide de précis
Quel est la fonction d’un parafilm?
- Sert à seller et protéger les récipients
Quel est la fonction d’un scalpel?
- Préparer des échantillons biologiques via le sectionnement
Quel est la fonction d’un produit chimique et d’un pH-mètre?
Produit chimique:
* Les composantes d’un milieu de cultures
pH-mètre:
* Utiliser pour mesurer le pH d’une solution pour savoir s’il est acide ou alcalin
Quel est la fonction d’une hotte à flux laminaire (horizontale et verticale)?
- Elle sert à avoir un environnement de travail stérile
- Filtre à haute intensité (HEPA)
- Air poussé
Définir contamination.
Est la présence d’un constituant, d’une impureté ou d’autres éléments indésirables qui gâtent, corrompent, infectent, rendent impropre ou rendent inférieur un matériau, un corps physique, un environnement naturel, n lieu de travail, etc.
Quels sont les contaminants physiques?
- Température (dénaturer les cellules)
- Lumière (Produit photodégradable, B2)
- Radiation (Lampe UV hotte à flux laminaire)
Quels sont les contaminants chimiques?
Ions métalliques: systèmes de purification d’eau (osmose inverse, ultrafiltration)
Les ions métalliques, comme le chrome, le fer, le cobalt, le cuivre
et le sélénium, perturbent les processus de réplications de l’ADN
et de synthèse de protéines.
Résidus et impuretés:
Dépôts laissés par les détergents sur la vaisselle et le matériel doivent être évités.
Plusieurs cycles de rinçage permettent de pallier à ce problème.
Quels sont les contaminants biologiques?
Virus:
Un virus est une particule microscopique infectieuse qui ne peut se répliquer qu’en pénétrant dans une cellule et en utilisant sa machinerie cellulaire.
Bactéries:
Fréquentes et faciles à détecter par des observations macroscopiques et microscopiques.
L’élimination s’effectue à l’aide d’antibiotique.
Mycètes:
Les levures et moisissures sont fréquentes.
Observables à l’oeil nu
Élimination grâce aux antifongiques
À part les contaminants physique, chimique et biologique, quel autre contaminants existe t’il?
INVERTÉBRÉS:
- Insectes et acariens
- Vecteurs de microorganismes tels que les bactéries et les mycètes.
DÉfinir stérilisation et désinfection.
Stérilisation : Détruire ou éliminer tout microorganisme
Désinfection : Éliminer tout microorganisme présent à la surface d’un tissu d’intérêt pour la culture
Hypochlorite de sodium et de calcium
Quels sont les deux méthodes physiques de stérilisé? Avec leur définition.
Chaleur sèche :
Détruire ou éliminer tout microorganisme
Chaleur humide:
Éliminer tout microorganisme présent à la surface d’un tissu d’intérêt pour la culture
Hypochlorite de sodium et de calcium
Quel information peux t’on dire sur l’autoclave? Est-ce que c’est une stérilisation par chaleur sèche ou humide?
- Vapeur d’eau 121 degré Celsius
- Pression 100 kPa
- 15 minutes
- Ajustement des cycles / Qtés
HUMIDE
La chaleur sèche est utilisé pour stérilisé quoi? Quels sont les nom d’équipement qui utilise ce principe de stérilisation?
Verre, métal et certains plasiques.
Incinération : sous la flamme (350 degré Celsius)
Bain de billes de verres (250 degré Celsius)
Bacticinérateur (815 degré Celsius)
Four (160 degré Celsius 1 heure)
Une hotte à flux laminaire fonction par quel principe pour stérilisé et qu’est-ce qu’elle fait pour stérilisation?
MICROFILTRATION,
Les hottes à flux laminaire possèdent des filtres de type HEPA ( de l’anglais high efficiency particulate air).Les hottes à flux laminaire vertical, c’est à dire que l’air filtré et stérile est poussé du haut vers le bas.
Un micro-onde fonction par quel principe pour stérilisé?
IRRADIATION,
Les rayons UV provoquent des bris dans l’ADN et entraînent la mort des cellules. Les fours à micro-ondes sont utilisés pour de petits volumes de solutions aqueuses ou de gel. 5 minutes à puissance maximale
quels sont les désinfectants liquides? Et la quel des deux nous utilisons pour le matériel végétal et l’autre plus pour les surface de travail?
Éthanol (surface)
Hypochlorite de sodium (eau de javel) matériel végétal
Quel est l’effet du désinfectant Tween 20?
Améliorent la désinfection du matériel végétal en aidant à la dissolution des lipides de la membrane plasmique des microorganisme et en réduisant la tension de surface de l’eau.
Comment on contrôle les envahisseurs?
- la formation du personnel
- instaurer des techniques aseptiques
- lignes directrices pour tous
- nettoyage fréquent
- détection rapide des contaminants
- réserve de cellules saines (backup)
Définir Milieu de culture.
Mélange complexe de substances nutritives et de facteurs biologiques qui assurent la survie et stimulent la croissance de cellules invitro en mimant les conditions invivo.
Quels sont les compositions des milieux (principale)?
- eau distillé
- sels minéraux (inorganiques)
- éléments organiques
- régulateurs de croissance
- agents gélifiant (agar)
Pourquoi on inclut des sels inorganiques?
Car la plante transforme les éléments inorganiques en organiques.
Combien de temps est conservé la solution mère?
1 an
Qui je suis?
Pyridoxine
biotine
pantothénate de calcium
myo-inositol
Vitamines
Quels sont les régulateurs de croissance?
produit de synthèse ou de produits synthétiques, il est préférable d’utiliser le terme régulateur de croissance.
Auxine, cytokinines, gibberellines
Qu’est-ce qui guide la quantité utilisé?
Avec l’article scientifique
Quels sont les rôles de l’auxine?
- Favorise la croissance de cals, les divisions cellulaires, l’allongement cellulaire
- Favorise l’enracinement.
Quels sont les rôles des cytokinines dans le in vitro?
- Stimule les divisions cellulaires
- Régularise la morphogénèse (acquisition de la forme)
- Stimule la croissance des bourgeons axillaires et adventifs
- Contribue au renouvellement de la chlorophylle
Quels sont les rôles des gibbérellines?
- Favorise le grandissement cellulaire
- Favorise l’allongement des entre-nœuds
- Lève la dormance des graines
À quoi sert la gélose? et à quoi sert la qualité d’un milieu gélosé?
La gélose (ou agar) ajoutée au milieu nutritif permet l’obtention d’un milieu semi-solide ou solide dans lequel les explants peuvent être repiqués et supportés.
La qualité d’un milieu gélosé est donc dépendante d’une part de sa fermeté, indispensable au support des plantes, et d’autre part de sa souplesse, qui facilite la diffusion des éléments nutritifs.
Le agar c’est quoi?
Substance naturelle extraite de différentes espèces d’algues marines
Dissoute dans l’eau entre 90 et 100 degré Celsius
Redevient en gel à +- 40 degré Celsius
À la sortie de l’autoclave, la gélification se fait normalement en 2 à 3 heures, selon le volume de milieu par contenant
Quel cytokinines est très commun?
6-benzylaminopurine (BAP)
Entre la gelrite et phytagel est la plu gélifiante?
Phytagel
