Animaux génétiquement modifiés Flashcards
Quels sont les trois types d’animaux génétiquement modifiés
1.Transgéniques : addition d’un gène inséré au hasard
2.Knock-out (ou invalidation de gène) : perte de fonction pour étudier la fonction d’un gène
3.Knock-in : insertion d’un ADN dans un locus spécifique
a)Gain de fonction
b)Modification de fonction (introduire une mutation)
c)« Humanisation » ou « sapienisation ». Par exemple, l’échange de gènes de souris pour leurs homologues humains a amélioré les modèles de souris plus utiles.
Quel est l’utilité des souris transgéniques
-Modéliser le développement de maladies humaines dans un environnement contrôlé
-Étudier spécifiquement la fonction de certains gènes et l’effet de certaines mutations
-Tester d’éventuels nouveaux traitements thérapeutiques : valider le mécanisme d’action, l’efficacité et l’innocuité (pharmacodynamique et pharmacocinétique)
Pour quel maladie utilise-t-on les différents type de modifications
KO ou gène invalidé : si maladie résulte d’une perte totale de fonction (mutation nulle), le gène peut être inactivé par ciblage génétique (knock-out).
KI : si maladie résulte d’une mutation modifiante (augmentation ou perte partielle de l’activité du gène), on peut reproduire les modifications ciblées de la séquence (knock-in) du gène endogène.
Transgène : si la mutation est due à une augmentation du nombre de copies de gènes, des transgènes peuvent être utilisés pour augmenter le nombre de copies de gènes.
Qu’est-ce qu’un transgène
-Un transgène est un ADN qui est pris dans un organisme et incorporé dans le génome d’un autre organisme. Cet ADN peut coder pour une protéine ou un ARN.
-Si séquence codante, alors on parle de cDNA. Résultat de la reverse transcriptase (possède juste les exons codants).
-Cette modification génétique peut entraîner une modification du phénotype de l’organisme génétiquement modifié.
-L’incorporation du transgène dans les cellules germinales permet la transmission du transgène aux futures génération.
Quel est l’inconvénients de l’utilisation des souris
-Malgré l’homologie entre les gènes de la souris et ceux de l’homme, certains gènes ne sont pas interchangeables ou uniques à chaque souris.
-Un traitement efficace chez la souris ne les pas forcément chez l’humain due aux différences biologiques.
-Certaines maladies humaines ne peuvent pas être entièrement modélisées chez la souris ou se développe différemment. Inconvénient pour la compréhension de la maladie et l’évaluation des traitements potentiels.
Quel sont les utilité des animaux d’élevage génétiquement modifiés
1) Améliorer la valeur nutritionnelle de la viande, du lait et des œufs
2) Rend les animaux résistants aux maladies vétérinaires telle la mammite et la maladie de la vache folle
3) Produire des médicaments → biopharming
Qu’est-ce que le biopharming
Technologie basée sur la modification de l’ADN d’un animal pour y introduire un nouvel ADN, appelé transgène, provenant d’une autre espèce.
Quel sont les enjeux relié aux animaux d’élevage génétiquement modifié
Enjeux des animaux d’élevage transgéniques (intégration aléatoire)
Enjeux pharmaculture (cout et besoin)
Avantages pour le développement durable : peut remplacer des composés d’origine chimiques et toxiques
Décrire l’acceptance des animaux génétiquement modifiés
-Relativement correct pour les modèles d’études en recherche fondamentale et clinique
-Compliqué pour la production de molécules d’intérêt thérapeutique (biopharming)
-Beaucoup d’opposition pour les animaux génétiquement modifiés à des fins de consommation humaine
Quels sont les tests pour confirmer la présence d’un transgène après un transgenèse classique ou avec vecteur rétroviral
Test PCR pour déterminer si les animaux sont transgéniques (biopsie)
Test d’expression puisque niveau varie en fonction du nombre de transgènes insérés et leurs positions
Croisements pour savoir si ceux transgéniques produisent des cellules germinales transgéniques.
Que permet l’utilisation de cellules ES
Utilisation de cellules ES va donner de la flexibilité pour faire des manipulations génétiques en cellule avant de passer dans la souris : expression conditionnelle et inductible.
Que permet la double sélection positive-négative
Double sélection qui permet de sélectionner majoritairement des cellules ES avec intégration ciblée
Quels sont les 3 stratégies/construction de ciblage
1-Plasmide < 20 kb
2-BAC bactérial artificial chromosome 100-300 kb
3-YAC yeast artificial chromosome 150-2000 kb
Quand utilise-t-on la stratégie KO
-Souris de laboratoire chez laquelle un locus (gène) a été inactivé en le délétant ou en le perturbant par un morceau d’ADN recombinant.
-Approche de référence pour étudier la fonction d’une protéine dans un organisme entier.
-Observation du phénotype des souris KO fournit des informations pour comprendre comment un gène similaire peut causer ou contribuer à une maladie chez l’homme.
Quels sont les 3 types de gain de fonction KI possibles
Un locus (gène) a été inséré dans un autre locus particulier
Un allèle normal a été remplacé par un allèle mutant
Des allèles murins ont été remplacés par des allèles d’une autre espèce
