a pop those Flashcards
définition apoptose
*une des dizaine de mort cellulaire (nécrose, autophagie)
*mort physiologique programmée
mécanisme neutre pour *l’environnement
rôles physiologiques
*maintien du stock de cellules: nécessaire dans l’organisme avec un système de prolifération continue
*élimination des cellules endommagée
localisation des mécanismes
dans le noyau:
-expression des gènes codant les protéines spécifiques de l’apoptose
-fragmentation de l’ADN
cycle normal (pour une cellule)
-prolifération
-différenciation
-survie cellulaire
-sénescence
cause de maladie
-absence ou excès de prolifération
-anomalie de la fonction
-absence de survie/ survie importante
durée de vie moyenne des cellules différente selon l’organe et le type cellulaire
-cellules intestinales:7 jours
-globules rouges: 4 mois
-globules blancs neutrophile: 5 jours
-plaquettes: 9 jours
-peau: 2 à 3 semaine
-cellules osseuses: 30 ans
cellules nerveuses: non remplacés
maintien du nombre de cellules différenciées
-grâce à des signaux de maintien de la survie cellulaire
-grâce à des signaux inhibant la mort cellulaire
apoptose mécanisme
-condensation de la chromatine
-condensation du cytoplasme
-bourgeonnement de l’enveloppe nucléaire
-fragmentation de l’ADN
-modification de la répartition de phospholipides
-activation d’hydrolases cytosoliques
-ruptures des mitochondries
-fragmentation de la cellule
-formation de corps apoptotiques
-phagocytose par les cellules avoisinantes
- pas de réaction inflammatoire
nécrose mécanisme
-condensation au hasard de la chromatine
-gonflement irréversible du cytoplasme
-modification morphologiques de certains organelles
-création d’une inflammation
autophagie mécanisme
-absence de condensation de la chromatine
-vacuolisation importante du cytoplasme
-accumulation de vacuoles autophagiques: aucun relargage du contenu interne dans le milieu extracellulaire
-peu de phagocytose par les cellules avoisinantes in vivo
apoptose
observation au MO
coloration, éléments observables
coloration par le May grunwald Gelmsa:
* passe la membrane de manière passive
* colore le noyau des cellules vivantess ou mortes
* autres éléments observables:
-condensationn de la chromatine
-absence de la membrane nucléaire
-corps apoptotiques
nécrose
observation au MO
coloration au bleu trypan:
* coloration vital qui rentre que s’il y a des trou dans la membrane cellulaire
* colore les cellules mortes
iodure de propidium
analyse de marqueurs spécifiques par cytométrie de flux
agent intercalant l’ADN:
* rentre dans les cellules en nécrose
* ne rentre pas dans les cellules où la membrane plasmique est intacte:
-cellule vivante
-cellules en apoptose
* naturellement fluorescent
annexine V
analyse de marqueurs spécifiques par cytométrie de flux
- couplée un fluorochrome pour être visible en cytométrie de flux (couplée au FITCH)
- reconnait spécifiquement la phosphatidylsérine dont la localisation dépend de l’état de la cellule
caractéristique biochimique de la mort par apoptose
- clivage internucléosomique de l’ADN
- visualisation par migration de l’ADN dans un gel
clivage internucléosomique
caractéristique biochimique de la mort par apoptose
formation de ragments de 180 à 200 pdb par CAD:
* DNAse dépendante des caspases (= Caspase Activated DNase)
* couplé à ICAD, un inhibiteur de CAD en absence d’apoptose
* activité dépendante de la caspase 3 et du Mg2+
visualisation par migration de l’ADN dans un gel
caractéristique biochimique de la mort par apoptose
ADN; molécule polarisée
migre sous l’effet d’un champs électrique en fonction de sa taille
(les fragments les plus petits migrents le plus rapidement)
caspases
diversité, fonctions
- chez l’homme, famille de 11 caspases
- protéases indispensabes au déroulement de la mort cellulaire
- les caspases coupent les protéines, leurs substrat après Asp
caspase 3
fonctions
- permet le décrochage de ICAD et la libération de la CAD active qui rjoint le noyau et amorce la fragmentation de l’ADN
- inactive des enzymzes de réparation de l’ADN comme PARP
- actives la majorité des voies apoptotiques
caspase 6
dégrade les lamines participant à la structures du noyau et aux liaison chromatine/membrane nucléaire
mécanisme d’activation
- caspases inactives sous forme de pro-caspases
- clivage du “pro-domaine”
- séparation des sous-unités (changemment des structures tertiaires de la protéine par repliement)
- liaisons des sous unités
voie extrinsèque
déclanchement de la mort cellulaire par apoptose
- signall de déclenchement extracellulaire
- cascade moléculaire intracellulaire
signal de déclechement extracellulaire
voie extrinsèque
protéine qui se lie à un récepteur membranaire spécifique:
* TNF
* ** Fas Ligand**
* TRAIL
cascade moléculaire intracellulaire
voie extrinsèque
- activation du domaine de mort intracytoplasmique (dd du récepteur membranaire)
- formation du DISC :
- complexe protéique** sous-membranaire** (partie intra-cytoplasmique des récepteur, protéine adaptatrices, pro-caspase 8 )
- activation de la pro-caspase 8 en caspase 8 par DISC
- activation successive par la caspase 8 de caspase 3, 6, 7
- apoptose
voie intrinsèque
- signaux de déclenchement intracellulaire
- cascade moléculaie intracellulaire
- interaction avec la voie extrinsèque
signaux de déclenchement intracellulaire
interaction avec la voie extrinsèque
voie intrinsèque
- dommage de l’ADN
- stress cellulaire
- voies intra et extra sèque active la caspase 3
- la caspase 8 peut activer la voie intrasèque de l’apoptose par lintermédiaire de la protéine Bid
cascade moléculaire intracllulaire
voie intrinsèque
- activation de la mitochondrie par des protéines intracellulaire telles que BAX
- modification de la** perméabilité de la membrane mitochondriale**
- libération de cytochromr c dan le cytosol
- formation de l’apoptossome constutié par des protéines APAF-1 et plusieurs cytochromes c fixés sur APAF-1
- recrutement de la pro-caspase 9 par l’apoptosome
- activation de la caspase 9 qui active la caspase 3
- apoptose
système régulateur de la voie intrinsèque
- protéine anti-apoptotique (famille des Bcl-2)
- protéine pro-apoptotique (famille des BAX)
- mécanisme d’action (formation d’homo ou hétéro dimères
inhibition de la voie intrinsèque
- Bcl-2 empèche le relargage du cytochrome c et APAF-1
- Akt inhibe caspase 9
- IAP inhibe caspase 9 et 3
- Hsc 70 inhibe l’action en aval de la caspase 3
protéine P53
fonctions, moyen d’activation
- protéine pro-apoptotique
- protéine transcriptionnelle (active la transcription des gènes codant les protéines qui déclenchent l’apoptose comme BAX)
- stress cellulaire
- dommage à l’ADN
- radiations ionisantes
- oncoprotéines
physiologie et pathologie
- apoptose physiologique (au cours de l’embryogenèse)
- vieillissement (trop ou pas asser d’apoptose)
- cancer (Bcl-2 et P53)
