9. Criopreservación Flashcards
Generaciones
- IA
Criopreservación - Transplante de embriones
Superovulavión
Ultrasonografía reproductiva - Fertilización in vitro
Sexaje
Recuperación de Oocitos - De células 2n
Clonación
Biología células madre
Transgénesis
Germoplasma
Cualquier material biológico que permite llevar información genetica de una generación a otra
Formas de preservar crioplasma?
- Criopreservación (congelamiento lento)
- Vitrificación
Congelamiento sin solutos
Se forman cristales
5- 15 °C
Soluciones cristales
- Necesito mayor rango de temperatura para no entrar en fase de formación cristales
-Coloco solutos
Criprotectores
Sales
Hiperosmótico
Azücares
No pueden entrar membrana
Regulan cantidad sales
Polioles (DMSO, Etilenglicol, Glicerol)
Regula cantida sales adentro y afuera
Se coloca entre moléculas y células
Entra a célula y se deforma menos
Estabilizan membrana por enlaces de hidrógeno con grupos hidrofilos externos de bicapas lipídicas, ante cambios mecánicos
Aumenta viscosidad de fracción no congelada (fuera)
Debe ser lenta?
Sí, así se acostumbra
Se saca todo el agua
(De 1 a -10 se demora 5 horas)
Lo peor es congelación rápida y descobgelaxión lenta
Daños criogénicos
Daños membranas: lípidos se oxidan. Se atacan a sí mismo
Sokución: antioxidantes como DMSO o vit. C
Choque térmico:
Por rapidez
Al dividirse se desorganiza
Anueoploidías
Superenfriamiento
-1.5 a -15 se empieza a congelar
Sin formación cristales
Temperatura no cae de forma lineal
Por calor latente de fusión de medii de congelación
Función Diluyentes
-Multidosis
-Nutrientes como fuentes energía
-Protegen
-Búferes pH
-Presión osmótica (entorno isotónico) y electrolítica
Componentes diluyente
-Búferes
Citrato sodios. Yema huevo. Tampones tris
-Lípidos: protección mebrana
Leche descremada. Yemaa huevo
-Nutrientes: energía
Fructosa. Glucosa
-Antibióticos
Penicilina. Estreptomicina
-Glicerol: criporeservante
Vitrificación
Coloco azúcar muy concentrada
Luego puedo poner en refrigeradores normales
Estructura amorfa
