6.3 Chromatographie D'exclusion Moléculaire Flashcards

1
Q

sous qu’elle fonction se fait la séparation

A

en fonction de la taille et de la forme

fonctionne comme un tamis moléculaire inverser

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2
Q

de quoi est composé la phase stationnaire,

A

bille poreuse

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3
Q

que se passe-t-il avec les grosse molécule et les petite?

A

¤ les grosse son exclue et éluée en 1ere

¤ les petite et moyenne elué plus tard, car inclue dans le gel

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4
Q

comment est la rétention

A

la rétention est plus importante que le poids moléculaire est faible (masse en Da)

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5
Q

comment est la phase mobile

A

liquide

bien choisir le tampon pour qu’il ne dénature pas les molécule

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6
Q

comment est la phase stationnaire

A

bille poreuse de diamètres calibré

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7
Q

matériaux le plus utilisé pour faire les bille

A

polymères de glucose réticulé (Dextran)

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8
Q

quesque la reticulation

A

la réticulation est le passage d’un polymères d’un état ou les macro molécule sont indépendante à un état relié par réaction chimique

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9
Q

que déterminé les maille ou pore

A

la limite haute d’exclusion

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10
Q

quesque Vt

A

c’est le volume total

Vt = Vo + Vs

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11
Q

quesque Vo

A

volume mort (1er volume élué )

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12
Q

quesque Vs

A

volume de la phase stationnaire

Vs = Vg + Vi

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13
Q

quesque Ve

A

volume d’élution

ve = Vo + Kav x Vi

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14
Q

quesque Vg

A

volume matrise gel

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15
Q

quesque Vi

A

Volume liquide dans les canaux

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16
Q

quesque Kav

A

Ces le coefficient de partage

Kav = (Ve - Vo) / (Vt - Vo)
Kav = (Ve - Vo) / Vs
Kav ~ (Ve - Vo) / Vi

17
Q

si Kav = 0

A

substance élué avec le volume mort => soluté totalement exclu (Ve = Vo)

18
Q

si Kav > 1

A

soluté totalement inclus Ve = Vo + Vi substance élué dans le volume liquidien

19
Q

quel genre de relation existe t - il a l’intérieur du domaine de fractionnement entre le log MM et le V d’élution

A

relation linéaire
on étalone grâce à des marqueur se taille
on obtient la droite d’étalonnage log MM = f(Ve)

20
Q

A quoi peu servir cette Chromatographie

A

¤A purifier des protéines en fonction de leurs taille (ou autre molécule)
¤décalage (désionisation) de macro molécule