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IMC > 3. Développement bactérien et culture en laboratoire > Flashcards

3. Développement bactérien et culture en laboratoire Flashcards

1
Q

De quoi les bactéries ont elles besoin pour bien se développer?

A

Bonne disponibilité en nutriments
Conditions environnementales favorables

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Q

Quels sont les éléments nutritionnels indispensables?

A

Macroéléments (carbone, hydrogène, azote, soufre et phosphore)
Oligoéléments (fer, calcium, magnésium,…)

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3
Q

Que sont les macroéléments?

A

Éléments nutritionnels dont la cellule a besoin en grande quantité

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4
Q

Quels sont les macroéléments et leurs rôles?

A

Carbone: constituant de base de toutes les molécules de la bactérie
Hydrogène : constituant de la structure des molécules organiques
Azote, soufre et phosphore: plus particulièrement pour la synthèse des protéines, des acides nucléiques (ADN et ARN), de l’ATP…

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5
Q

Quels sont les oligoéléments et leur rôle?

A

Minéraux (fer, calcium, magnésium)
Réactions enzymatiques (cofacteur)

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6
Q

Quelles sont les sources des principaux nutriments?

A

Carbone, hydrogène, oxygène et phosphore : glucides, acides organiques et acides gras

Azote et soufre: protéines faites d’a.a. dont la cystéine et la méthionine (soufre) ainsi que des nitrates (azote)

Oligoéléments : eau

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7
Q

Quels sont les mécanismes d’absorption des nutriments?

A

Diffusion passive
Osmose
Perméases
Exoenzymes

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8
Q

Décrivez la diffusion passive

A

Les nutriments traversent la paroi et la membrane plasmique sans apport particulier d’énergie

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9
Q

Décrivez l’osmose

A

Mécanisme d’équilibre de concentration ionique de part et d’autre de la membrane principalement par entrée et sortie d’eau

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10
Q

Décrivez les perméases

A

Mécanisme mettant en jeu des enzymes dont le rôle est de “transporter” des molécules vers l’intérieur de la bactérie

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11
Q

Décrivez les exoenzymes

A

Enzymes qui contribuent indirectement à l’absorption en fractionnaire les molécules qui sont trop grosses pour traverser la paroi et la membrane par les mécanismes précédents (diffusion passive, osmose, perméases)

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12
Q

À quoi servent les milieux de culture?

A

Obtenir des bactéries en plus grande quantité
Identifier et étudier
Exploiter afin de produire des substances (bioprocédés)
Assure l’apport des nutriments et certains des conditions favorables au développement bactérien

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13
Q

Quels sont les éléments nécessaires à l’apport de nutriments pour les milieux de culture?

A

Peptones (petites protéines)
Eau

Facultatif:
Glucides
Sels organiques
Facteurs de croissance particuliers requis pour le développement des bactéries plus exigeantes

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14
Q

Quelle est l’offre de conditions favorables des milieux de culture?

A

Valeurs de pH et d’osmolarité optimales

Système tampon maintenant le pH habituellement à une valeur entre 7.2 et 7.6

Sels minéraux tels que NaCl ou KCl pour assurer la tonicité optimale

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15
Q

Quels sont les types de milieux simples (usage général)?

A

Bouillon nutritif TSB (Trypticase Soy Broth)
Peptones extraits principalement du soya par l’action de la trypticase

Gélose de base TSA (Trypticase Soy Agar)
Peptones extraits principalement du soya par l’action de la trypticase
Agar provenant des algues et qui assure la gélification du milieu

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16
Q

Pourquoi utiliser l’agar plutôt que la gélatine pour gélifier les milieux de culture solide?

A

Les bactéries sont incapables d’utiliser l’agar comme substance nutritive (alors que certaines bactéries peuvent utiliser la gélatine comme substance nutritive)

17
Q

Quelle est la concentration d’agar dans le milieu et le rôle de cette concentration?

A

Plupart des géloses: entre 1.0% et 1.5%
Milieu semi-solides: entre 0.5% et 0.75% (test de mobilité)
Milieu légèrement visqueux: entre 0.05% et 0.5% (réduire les courants de convection)

18
Q

Qu’est-ce qu’un milieu enrichi?

A

Faits à partir de milieux simples, de base (TSB ou TSA) auxquels on ajoute des substances qui favorisent une croissance plus importante des germes plus exigeants

19
Q

Nommez deux types de milieux enrichis

A

Gélose au sang
Gélose chocolat

20
Q

Décrivez la gélose au sang

A

Enrichi le plus souvent de sang de mouton
Occasionnellement, de sang de lapin ou de cheval

21
Q

Décrivez la gélose chocolat

A

Enrichi de sang de mouton qui est lysé par la chaleur lors de sa préparation
Libéré le contenu des GR qui fournit entre autres du facteur V (NAD+)
Inhibe l’enzyme qui dégradé le facteur V (NADase)
Le facteur X (hématine) est présent dans le sang

22
Q

Nommez et décrire les 3 types d’hémolyse

A

Non hémolytique (gamma): aucune hémolyse
Alpha hémolytique (alpha): hémolyse partielle (zone verte), dégradation de l’hémoglobine jusqu’à la biliverdine
Beta hémolytique (beta): hémolyse complète (zone claire), dégradation de l’hémoglobine

23
Q

Décrivez les milieux sélectifs

A

Contiennent des agents inhibiteurs qui limitent la croissance de certains groupes de germes tout en laissant croître d’autres: permettant de sélectionner ceux qu’on désire garder

24
Q

Nommez un milieu sélectif et décrivez le

A

Milieu MacConkey

Sels biliaires: inhibent la croissance de la majorité des bactéries à Gram positif
Violet de cristal: inhibe les Staphylococcus et les Enterococcus qui sont des Gram positif qui résistent aux sels biliaires

Sélectif pour les BGN (les coccis ne poussent pas)
PAS tous les BGN poussent sur MacConkey, certaines bactéries sont plus exigeantes

25
Q

Décrivez les milieux différentiels

A

Permettent de différencier divers groupes de bactéries selon leur comportement sur ce milieu
Contiennent une substance que seulement certains groupes bactériens peuvent transformer et un indicateur de cette réaction de transformation (généralement un indicateur de pH)

26
Q

Nommez un milieu différentiel et décrivez le

A

Milieu MacConkey

Lactose: substance “test” à dégrader
Indicateur de pH: rouge neutre
Résultat : colonies roses ou incolores (lactose -> acide pyruvique (acide))

27
Q

Décrivez les milieux de transport

A

Pas vraiment des milieux de culture
Pas de substances nutritives
Ne permettent pas le développement des MO
Protège les MO de la dessiccation, des variations importantes d’osmolarité et de pH

28
Q

Quels sont les buts des milieux de transport?

A

Garder les bactéries viables
Garder les bactéries en proportions

29
Q

Nommez 3 milieux de transport

A

Milieu Stuart
Milieu Amie
Milieu Cary-Blair

30
Q

Quels sont les conditions environnementales importantes pour les bactéries?

A

Température
Atmosphère

31
Q

Quels sont les 3 types de température auxquelles les bactéries vivent?

A

Psychrophiles: 0-20°C (idéal 15°C)
Mésophiles: 20-40°C (idéal 37°C)
Thermophiles: >55°C

En microbiologie clinique: mésophiles
Contrôle qualité pour l’autoclave: 2 bactéries thermophiles

32
Q

Quelle est l’humidité relative pour les bactéries ?

A

≥70%

33
Q

Quels sont les types d’atmosphère selon le type respiratoire de la bactérie?

A

Aérobique: O2
Anaérobique: sans O2
Facultative: O2 ou sans O2

Air ambiant: 20% O2 et 80% N2
Air ambiant enrichi (capnophile): 5 à 10% (environ 7.5%) CO2
Sans O2 et enrichi de CO2
Microaérophile: entre 3 et 8% O2 (taux inférieur à l’air ambiant)

34
Q

Quels sont les appareils et instruments pour les conditions environnementales?

A

Incubateur
Chambre anaérobie
Jarres anaérobiques
Générateurs d’atmosphère anaérobie

35
Q

Quelles sont les étapes globales de la reproduction bactérienne?

A

Réplication de l’ADN
Les 2 ADN se séparent
Un septum (cloison) se forme
Les 2 parties se séparent pour donner deux cellules filles identiques et ainsi de suite

36
Q

Le mode de reproduction est il responsable des arrangements bactériens?

A

Oui

37
Q

Décrivez les modes de reproduction et l’arrangement bactérien associé

A

Mêmes plans: chaîne (streptocoque)
Plusieurs plans: amas (staphylocoque)
BGN: plupart sans arrangement

38
Q

Nommez les 4 phases de la croissance de la population bactérienne

A

Latence/adaptation
Croissance exponentielle/logarithmique
Stationnaire
Décroissance ou déclin

IMC (4 decks)

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